早熟砂梨‘苏翠1号’与其亲本‘翠冠’‘华酥’成熟果实差异代谢产物及差异基因比较分析

王宏; 杨王莉; 蔺经; 杨青松; 李晓刚; 盛宝龙; 常有宏; 《园艺学报 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：‘苏翠1号’梨因其极早熟、汁多味甜、肉质细脆而深受广大消费者喜欢。为了解‘苏翠1号’成熟果实主要代谢产物及代谢通路相关基因表达情况，探究其果实优异性状形成的物质和分子基础，对‘苏翠1号’及其亲本‘翠冠’和‘华酥’成熟果实样本进行代谢组和转录组测序分析。代谢组分析发现，3个品种间，前25个差异代谢产物主要包括有机酸、碳水化合物、氨基酸、甘油磷酸脂、脂肪酸和绿原酸。HPLC测定表明，蔗糖含量在‘苏翠1号’中最高，葡萄糖含量在‘翠冠’中最高，果糖含量在‘苏翠1号’和‘翠冠’中相似，略高于‘华酥’，山梨醇含量在‘苏翠1号’和‘华酥’中均显著低于‘翠冠’；苹果酸含量在‘苏翠1号’中最高，柠檬酸含量在‘华酥’中最高，‘苏翠1号’和‘华酥’总酸含量相近，均高于‘翠冠’。氨基酸含量分析表明，‘苏翠1号’的氨基酸总含量及天冬氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸含量显著高于‘翠冠’和‘华酥’。转录组GO和KEGG分析表明，相较于‘翠冠’和‘华酥’，‘苏翠1号’有机底物分解过程、脂质代谢、有机酸生物合成、羧酸生物合成、多糖代谢等生物学过程及代谢途径显著富集。进一步挖掘差异基因发现，糖代谢中的SPS、山梨醇代谢中的S6PDH、SDH,TCA循环中的FUM1、ICDH、PDH、OGDHL，氨基酸代谢途径中的GAT、GLSN、LASPO、SAMS，以及脂肪酸代谢中的DGK1、ACCA、KASC2、ADH、PLDA等基因在‘苏翠1号’中显著高表达。这些基因可能与‘苏翠1号’更活跃的蔗糖、山梨醇、氨基酸、甘油磷酯代谢及TCA循环有关。

关键词： 砂梨 果实品质 差异代谢产物 差异基因 qRT-PCR

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现代工厂化鱼菜共生绿色生态循环系统建立与应用

高源; 张龙; 吴宜文; 鲍恩财; 《农业工程技术 》 2022

摘要：文章介绍了现代工厂化鱼菜共生绿色生态循环农业系统的绿色生产工艺以及智能化技术要点,为推进农业生产绿色高质量发展提供参考.通过高效绿色生产技术应用,现代工厂化鱼菜共生中蔬菜种植产量高于传统有机种植5倍以上,水产养殖产量高于池塘养殖20倍以上.

关键词： 工厂化;鱼菜共生;绿色生态循环

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超高温预处理对畜禽粪便持水特征和后续堆肥腐熟进程的影响

黄莹; 陈月红; 林久军; 黄红英; 常志州; 徐跃定; 曹云; 《生态与农村环境学报 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：为探讨超高温预处理对畜禽粪便持水特征及后续堆肥腐熟进程的影响机制，以常规堆肥为对照，采用干燥法测定不同时间（2、4和6 h）高温（90℃）预处理后鸡粪和猪粪的水分分布特征，并对后续堆肥过程的脱水率和腐熟周期进行监测。结果表明：经过不同时间高温预处理后，猪粪和鸡粪中结合水（毛细管水+吸附水+内部结合水）含量均显著（P<0.05）低于对照。其中，猪粪和鸡粪经过高温预处理4 h的毛细管水占结合水的比例分别为72.0%和68.0%,显著（P<0.05）高于各自对照，而吸附水占结合水的比例分别为25.9%和30.9%,显著（P<0.05）低于各自对照。与对照相比，超高温预处理4 h可使后续堆肥过程提前升温、提高堆体温度并延长高温期，种子发芽指数达到80.1%。此外，经超高温预处理，后续堆肥的脱水率显著（P<0.05）高于对照，且脱水率与种子发芽指数呈极显著（P<0.01）正相关。因此，超高温预处理促进了畜禽粪便中高结合能形态水分向低结合能形态水分的转化，有助于提升后续堆肥过程的脱水效率，有利于缩短堆肥腐熟时间，为畜禽粪便的脱水技术研究提供新的方法和思路。

关键词： 超高温预处理 畜禽粪便堆肥 水分特征 脱水效率 腐熟效果

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影响壁蜂辅助萝卜制种质量的因素

刘哲; 沈峰; 郑佳秋; 徐良; 祖艳侠; 吴永成; 王薇薇; 张丽娜; 张力; 冯汝超; 梅燚; 《长江蔬菜 》 2022

摘要：<正>壁蜂属膜翅目切叶蜂科的野生蜂，是果树及十字花科蔬菜的优良传粉昆虫，主要有角额壁蜂、凹唇壁蜂、紫壁蜂、叉壁蜂、壮壁蜂，目前应用最多的是角额壁蜂和凹唇壁蜂[1～4]。壁蜂比蜜蜂略小，1 a有320 d左右在管巢中生活，以茧内成虫在管巢内越冬。雌蜂在巢管中集中0.6 cm~3左右花粉和蜂蜜的混合物，将卵产在上面后用泥浆（蜂巢附近设置泥浆盘）封堵制作花粉蜂蜜混合团[5]。生产中一般于1～5℃贮藏种茧备用^[6]。

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芽胞杆菌工程菌株B9BD产表面活性素发酵培养基优化

乔俊卿; 孙凯; 刘永锋; 陈夕军; 刘邮洲; 《中国生物防治学报 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：生物农药“纹曲宁”的主要活性成分—枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis Bs916可产生多种脂肽类抗生素。前期研究发现，degU和bmyA基因的突变株B9?degU?bmyA（B9BD）可以高效合成表面活性素（Surfactin）。本研究通过对培养基主要成分的单因素筛选并利用Design expert软件优化了工程菌株B9BD高效发酵产生Surfactin的培养基组分。通过Plackett-Burman试验、中心组合试验（CCD）和响应曲面法（RSM）优化了发酵Surfactin的最优培养基配方：葡萄糖24.27 g/L，黄豆粉29.05 g/L，牛肉浸膏3 g/L,NH₄NO₃ 4 g/L,L-亮氨酸2.36 g/L,KH₂PO₄ 3 g/L,Na Cl 3 g/L,Fe SO₄ 0.02 g/L。在优化培养基中，B9BD产生Surfactin的量高达到（934.25±32.67）mg/L，是其在LB培养基产量的5.6倍。以上研究结果将为Surfactin的高效发酵和应用提供理论基础和技术支撑。

关键词： 枯草芽胞杆菌 表面活性素 Plackett-Burman试验 中心组合试验 响应曲面法

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江苏省花生全程机械化生产现状分析及发展建议

丁彬; 谢吉先; 冯梦诗; 常蕾; 蒋莹; 王瑞; 《农业科技通讯 》 2022

摘要：为优化江苏省花生产业布局,提升花生产业竞争力,对江苏省花生产业现状、种植规模及栽培模式进行总结.分析花生种植规模化程度对产量和农业生产成本的影响,指出制约江苏花生生产全程机械化发展的问题主要有播种面积小、缺少有效的社会化服务体系和组织保障机制、花生专用机械规模化程度和农机农艺融合度低、关键技术和现有装备稳定性和适应性不成熟等.为促进花生生产全程机械化发展,建议进一步增强农机农艺融合度,加强社会化服务特别是花生机械化服务组织建设,优化研制新型实用花生机械的研发改进和完善、增加适应当前当地生产需求的中小型花生作业机械补助力度等建议.

关键词： 花生 全程机械化 农机农艺 服务体系

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新时期基层党组织党建档案信息化建设探索

王礼伟; 《办公室业务 》 2022

摘要：本文针对基层党组织在党建档案信息化建设过程中存在的管理观念滞后、规章制度欠缺、管理模式落后和人才队伍缺乏的问题,提出了加强档案工作重视程度、深化管理机制改革、重视人才队伍建设和强化保密技术及安全管理方面的解决措施.

关键词： 基层党组织 党建档案 信息化 探索

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非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立

张冯禧; 肖琦; 朱家平; 尹力鸿; 赵霞玲; 严明帅; 徐晋花; 温立斌; 牛家强; 何孔旺; 《中国农业科学 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：[背景]非洲猪瘟(ASF)于2018年8月在中国首次出现,对养猪业造成了巨大危害,损失惨重.目前尚无安全有效的疫苗用来预防ASF,于是建立快速特异的检测方法对于防控ASF提供了有效的手段.[目的]制备非洲猪瘟病毒(ASFV)特异性单克隆抗体,建立ASF快速特异性的检测方法.为ASF的检测和防控提供借鉴技术手段.[方法]构建表达载体pET-28a-P30,通过原核表达系统获得ASFV P30重组蛋白,以纯化的P30蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和细胞亚克隆制备出ASFV P30蛋白特异性杂交瘤细胞株;对P30蛋白进行截短表达,利用Western Blot和间接酶联免疫吸附试验(iELISA)鉴定单克隆抗体所对应的抗原表位;并利用制备的单克隆抗体建立非洲猪瘟阻断ELISA抗体检测方法.[结果]通过双酶切和PCR验证,结果显示构建出重组载体pET-28a-P30,经测序其序列未发生突变;IPTG诱导后,P30重组蛋白主要表达在包涵体中,分子量约为33 kD.纯化的P30蛋白与弗氏佐剂1:1混合免疫小鼠,3次免疫后,小鼠血清效价达到1:102 400,说明表达的蛋白具有良好的免疫原性.经细胞融合和亚克隆,获得8株P30蛋白特异性杂交瘤细胞,Western Blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测获得的8株单抗均具有良好的反应性.叠加试验显示8株单克隆抗体均针对相同的抗原位点;截短表达P30蛋白不同片段,选取制备的2-12B单克隆抗体与不同的截短P30蛋白反应,显示单克隆抗体的抗原表位区为187-194aa.利用2-12B单克隆抗体并经过条件优化,成功建立了 ASF阻断ELISA抗体检测方法,检测了 190份临床样品,并与商品化非洲猪瘟ELISA抗体检测试剂盒进行对比,两方法阳性符合率为90.91%,总符合率为96.32%.[结论]本研究成功获得ASFV P30蛋白,经过iELISA、Western Blot和IFA筛选出反应性良好的特异性单克隆抗体8株,抗原识别表位区为187-194aa.并利用制备的单克隆抗体建立了特异性高,敏感性好的ASFV阻断ELISA抗体检测方法,为ASF的检测及其防控提供了手段和支撑.

关键词： 非洲猪瘟病毒 P30蛋白 单克隆抗体 抗原表位 阻断ELISA

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2种鹅星状病毒一步法双重RT-PCR检测方法的建立与应用

杨颖; 肖亦辰; 马平; 赵冬敏; 章丽娇; 李银; 刘青涛; 杨婧; 刘宇卓; 韩凯凯; 黄欣梅; 《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：为建立能同时快速鉴别新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株的检测方法，根据新型鹅星状病毒的ORF2基因和鹅星状病毒变异株的ORF1a基因的保守区域序列，设计并合成2对特异性引物。通过优化反应体系及反应条件，建立了能同时检测2种鹅星状病毒的一步法双重RT-PCR检测方法。该方法可同时扩增出新型鹅星状病毒658 bp和鹅星状病毒变异株381 bp的特异性条带，对坦布苏病毒、鹅细小病毒、鹅副黏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、大肠杆菌和沙门菌的扩增结果均为阴性，具有良好的特异性。对新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株重组质粒的最低检测量分别是1μl 1.71×10~3拷贝和1μl 1.70×10~3拷贝，敏感性良好，并且具有良好的重复性。应用该方法对临床采集的雏鹅泄殖腔拭子进行检测，结果显示，124份样品中新型鹅星状病毒阳性率为45.16%,鹅星状病毒变异株阳性率为28.23%,2种鹅星状病毒均为阳性的占11.29%,与单一RT-PCR方法检测结果符合率为100.00%。本研究建立的一步法双重RT-PCR检测方法快速简便，特异性强、灵敏度高，可用于临床样品的鉴别诊断，该方法的建立对2种鹅星状病毒病的流行病学调查和有效防控以及混合感染的致病性研究具有重要意义。

关键词： 新型鹅星状病毒 鹅星状病毒变异株 一步法双重RT-PCR

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甘薯叶片中多酚成分及其抗菌活性研究

张毅; 刘锦秀; 钮福祥; 孙健; 岳瑞雪; 徐飞; 朱红; 张文婷; 马晨; 《食品安全质量检测学报 》 2022 北大核心

摘要：目的 提取分离纯化甘薯叶片中多酚的成分,并研究其抗菌活性。方法 采用Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱、液相色谱等方法,分离纯化甘薯叶片乙酸乙酯和正丁醇部位的多酚成分,根据波谱数据和文献对其结构进行鉴定;采用平板稀释法测定不同化合物对3种病原菌最小抗菌浓度;采用肉汤二倍稀释法测量不同化合物对3种病原菌的抑制率,并计算半数抗菌浓度。结果 从甘薯叶提取物中分离并鉴定出3个酚酸类单体化合物、2个黄酮类单体化合物,分别为咖啡酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯、3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷。5种化合物均具有不同程度的抗菌活性,其中咖啡酸对肺炎克雷伯菌抑制作用明显;山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对金黄色葡萄球菌抑制作用明显; 3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯和槲皮素-3-O-β-吡喃葡萄糖苷对鲍曼不动杆菌抑制作用明显。结论 多酚成分是甘薯叶片抗菌作用的有效成分之一,具有作为天然抗菌剂应用于食品和医药领域的潜力。

关键词： 甘薯叶 多酚 成分 抗菌活性

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