文献类型： 中文期刊

作者： 杨颖 ¹ ; 肖亦辰 ¹ ; 马平 ¹ ; 赵冬敏 ¹ ; 章丽娇 ¹ ; 李银 ¹ ; 刘青涛 ¹ ; 杨婧 ¹ ; 刘宇卓 ¹ ; 韩凯凯 ¹ ; 黄欣梅 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 新型鹅星状病毒;鹅星状病毒变异株;一步法双重RT-PCR

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 1612-1619

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立能同时快速鉴别新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株的检测方法，根据新型鹅星状病毒的ORF2基因和鹅星状病毒变异株的ORF1a基因的保守区域序列，设计并合成2对特异性引物。通过优化反应体系及反应条件，建立了能同时检测2种鹅星状病毒的一步法双重RT-PCR检测方法。该方法可同时扩增出新型鹅星状病毒658 bp和鹅星状病毒变异株381 bp的特异性条带，对坦布苏病毒、鹅细小病毒、鹅副黏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、大肠杆菌和沙门菌的扩增结果均为阴性，具有良好的特异性。对新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株重组质粒的最低检测量分别是1μl 1.71×10~3拷贝和1μl 1.70×10~3拷贝，敏感性良好，并且具有良好的重复性。应用该方法对临床采集的雏鹅泄殖腔拭子进行检测，结果显示，124份样品中新型鹅星状病毒阳性率为45.16%,鹅星状病毒变异株阳性率为28.23%,2种鹅星状病毒均为阳性的占11.29%,与单一RT-PCR方法检测结果符合率为100.00%。本研究建立的一步法双重RT-PCR检测方法快速简便，特异性强、灵敏度高，可用于临床样品的鉴别诊断，该方法的建立对2种鹅星状病毒病的流行病学调查和有效防控以及混合感染的致病性研究具有重要意义。