科研产出
美洲鳗鲡"脱黏败血综合征"病原的分离鉴定及其致病性研究
《中国预防兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为明确美洲鳗鲡"脱黏败血综合征"的病原,本研究采集福建省某养殖场的美洲鳗鲡病料组织样品制备病理切片,观察各组织病变,结果显示,病鳗的鳃、肝脏和肾脏呈现广泛性红细胞渗出和组织细胞变性、坏死.将病料样品接种鳗鲡肾脏细胞系(EK)进行病毒的分离,对分离病毒经电镜观察,结果显示,接种病料样品匀浆液的EK细胞出现合胞体病变,可见细胞核内有大量直径约120 nm的病毒.提取病毒基因后作为模板,采用PCR鉴定,结果证实其为鳗鲡疱疹病毒(AngHV),将其命名为AngHV-20713.进一步扩增分离病毒的ORF71基因并分析其同源性和遗传进化关系,结果显示,AngHV-20713与其它AngHV的同源性为93.6%~99.0%,且与分离自美洲鳗鲡的AngHV亲缘关系最近.将分离病毒以106 pfu/尾腹腔注射健康的美洲鳗鲡和欧洲鳗鲡,进行人工感染实验,结果显示,AngHV-20713对鳗鲡具有致病性,感染鳗鲡可见体表黏液脱落、胸鳍出血等"脱黏败血综合征"症状,并导致美洲鳗鲡60%的发病率和20%的死亡率,而感染的欧洲鳗鲡死亡率高达56.7%.利用qPCR从感染病毒的美洲鳗鲡各组织内均可检测到AngHV,从内脏可再次分离培养到AngHV-20713,表明AngHV是美洲鳗鲡"脱黏败血综合征"的病原.本研究为深入开展鳗鲡"脱黏败血综合征"的防控研究奠定了基础.


马铃薯营养品质变异特征及优异品系发掘
《植物遗传资源学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:选育营养品质优良的马铃薯品种有利于加工行业的发展和人们日常膳食营养的丰富,也有利于供给侧种植结构的调整。蛋白质、维生素C和钾是马铃薯的重要营养品质性状。本研究以118份马铃薯后代品系为材料,研究了马铃薯蛋白质、维生素C和钾含量的遗传变异特征,以及3个品质性状间的相关性,并综合应用聚类分析和二维象限法进行优质品系发掘。分析表明,蛋白质、维生素C和钾含量的变异系数分别为16.34%、26.01%和14.19%,遗传多样性指数分别为1.9744、1.9952和2.0411,显示这3个品质性状具有较广泛的遗传基础。相关性分析发现,马铃薯块茎蛋白质含量和钾含量呈极显著正相关。经聚类分析,可将118份品系分为4个类群,第Ⅰ类为低蛋白低维生素C低钾群体,第Ⅱ类为高维生素C低蛋白低钾群体,第Ⅲ类为高蛋白高钾群体,第Ⅳ类为高维生素C群体。在此基础上,应用二维象限分析筛选出20份兼具多个较高营养品质的马铃薯品系。本研究筛选出营养品质性状优良且适宜在福建省种植的马铃薯品种,为马铃薯高营养品质品种选育和品质形成基础研究提供有用材料。


南洋臀纹粉蚧生物学特性及LAMP检测
《昆虫学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:[目的]明确南洋臀纹粉蚧Planococcus lilacinus生物学特性及实现对该虫的可视化检测.[方法]室内观察记录南洋臀纹粉蚧不同发育阶段的形态特征和历期及雌成虫的繁殖能力;以南洋臀纹粉蚧28S rDNA序列为靶标,设计其特异性的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物组用于建立相应的可视化检测方法,并进行特异性、灵敏度及稳定性验证.[结果]南洋臀纹粉蚧雌雄虫具有不同的世代生活史,卵初产时即可见虫体轮廓,并具1对暗红色单眼;1龄若虫行动活泼,雌雄难辨;2龄若虫体缘出现白色细蜡棒,雌雄体型出现分化;3龄若虫仅存在雌虫,形似雌成虫;蛹仅存在雄虫,分为预蛹期和蛹期;雌成虫体表覆盖厚实的白色蜡粉,体缘18对粗蜡棒突出明显;雄成虫有一对透明发达的前翅,腹部末端具1对白色长蜡丝.该虫卵历期(1.37±0.26)h,雌成虫历期(32.67±4.82)d,各龄若虫、蛹和雄成虫历期均不超过(7.65± 0.82)d;两性生殖的单雌产卵量和卵孵化率分别为(531.92±69.98)粒和96.02%±1.35%,孤雌生殖的单雌产卵量和卵孵化率分别为(403.50±71.11)粒和88.41%±3.03%.建立的LAMP可视化检测方法能有效扩增南洋臀纹粉蚧DNA,最佳反应温度和时间及最低检测浓度分别为66 ℃、55 min和100 fg/μL,反应产物呈绿色阳性,检出率达91.67%~100.00%,但无法扩增其他7种近缘种属粉蚧DNA,反应产物呈橙黄色阴性.[结论]南洋臀纹粉蚧雌雄二型,生长发育快,繁殖力强,急需作好其检测与监测工作;该虫的LAMP可视化检测方法便捷高效、特异性强、灵敏度高且稳定性好,有望用于非专业鉴定人员对该虫的现场快速、准确识别.
关键词: 南洋臀纹粉蚧 形态特征 发育繁殖 LAMP 可视化检测


西番莲病毒可视化多重RT-LAMP检测技术的建立
《病毒学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:东亚西番莲病毒(East Asian Passiflora virus,EAPV)、夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus,TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是当前危害我国西番莲的主要病毒种类.为建立同时快速检测西番莲上EAPV、TeMV和CMV的可视化多重逆转录环介导等温核酸扩增(Multiplex reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,multiplex RT-LAMP)技术,本研究根据 GenBank 已报道的 EAPV、TeMV 和 CMV 外壳蛋白(Coat protein,CP)基因序列保守区域分别设计、筛选特异性引物,并通过反应体系和反应条件的优化,建立了可同时快速检测EAPV、TeMV和CMV的多重RT-LAMP技术,并进行了特异性、灵敏度测定及西番莲果园样品的检测.结果表明,建立的多重RT-LAMP方法特异性良好,可对EAPV、TeMV和CMV同时进行检测,而与西番莲上其他病毒及阴性对照无交叉反应;多重RT-LAMP的灵敏度最低可检测稀释至145×10-3ng/μL总RNA,与一步法RT-PCR方法的灵敏度相当;西番莲果园样品3种病毒的多重RT-LAMP检测结果与一步法RT-PCR检测结果一致.本研究建立的多重RT-LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,适用于基层实验室和现场对西番莲上EAPV、TeMV和CMV的快速初筛.
关键词: 西番莲 东亚西番莲病毒 夜来香花叶病毒 黄瓜花叶病毒 多重逆转录环介导等温核酸扩增 病毒检测


鹅细小病毒诱导番鸭胚成纤细胞自噬
《中国兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:细胞自噬在病毒生命周期中发挥着重要作用,目前国内仍然没有鹅细小病毒(GPV)与细胞自噬关系的系统研究。本研究旨在探讨番鸭小鹅瘟病毒(MDGPV)PT株与短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV) M15株细胞适应毒感染番鸭胚成纤维细胞(MDEFs)后对细胞自噬的影响,以及细胞自噬对病毒增殖的作用。通过激光共聚焦方法观察自噬标记物LC3-Ⅱ特异绿色荧光聚集颗粒,借助蛋白免疫印迹检测LC3蛋白与p62蛋白的表达量,以及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白转化分析,确定GPV感染能够促进细胞自噬发生。利用膜通透性半胱氨酸蛋白酶抑制剂阿洛司他丁、自噬诱导剂雷帕霉素以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤,调控自噬来研究细胞自噬对病毒增殖的影响,结果显示细胞自噬有利于GPV在MDEFs中的复制。结果表明GPV感染能够诱导细胞自噬,同时细胞自噬有利于病毒在宿主细胞中的复制。


纤维素降解菌的分离筛选及产酶条件优化
《福建农业学报 》 2023 CSCD
摘要:[目的]为获得秸秆降解的应用型菌株,自制秸秆腐熟菌剂.[方法]从林下土壤和堆肥样品中,采用羧甲基纤维素钠和刚果红培养基进行分离筛选,并对菌株纤维素酶活性、滤纸酶活性和木聚糖酶活性进行测定.[结果]获得 1株羧甲基纤维素酶活力最高的菌株,经形态学和分子生物学鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).该菌株对滤纸有崩解效果,滤纸酶活性 14.21 U·mL-1,木聚糖酶活性 24.03 U·mL-1,玉米秸秆降解率为 21.2%.[结论]菌株TB1滤纸崩解试验效果较好,纤维素酶活性、滤纸酶活性和木聚糖酶活性均较高,具有秸秆降解开发应用价值.


优质早熟大果百香果新品种蜜语的选育
《果树学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:蜜语是福紫(♀)×芭乐味黄金果(♂)杂交选育的鲜食百香果新品种(新品种权号CNA20191006864).该品种果实近圆形,果顶突,果大,单果质量83.8~92.8 g.果皮紫红色,较厚;果肉黄色,酸甜可口,多汁,香味浓郁.可溶性固形物含量(w,后同)17.3%~17.9%,可食率55.5%,总酸含量2.1%,维生素C含量19.3 mg·100 g-1.该品种生长势强健,在福建福州地区开花期为3月中旬到6月下旬和9月上旬到11月下旬,自交亲和性好,持续结果期长,果实生育期65~90 d.早熟,品质好,较丰产,耐贮藏,产量800~1200 kg·666.7 m2.该品种耐寒性强于黄果百香果,适宜在福建、广西、云南、贵州等百香果种植区种植.


尿苷二磷酸-葡萄糖4-差向异构酶编码基因galE影响甘薯青枯菌致病性和碳代谢
《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为明确尿苷二磷酸(uridine diphosphate, UDP)-葡萄糖4-差向异构酶编码基因galE的功能,通过构建甘薯青枯菌galE基因敲除菌株ΔgalE及回补菌株CΔgalE,探索galE基因与甘薯青枯菌致病相关表型间的关联及对甘薯青枯菌生理代谢的影响。结果表明:galE基因缺失显著降低了青枯菌对甘薯的致病性,并且影响了致病相关表型。ΔgalE菌落流动性、菌体泳动能力、胞外多糖含量和生物膜形成量均明显低于野生型SPRS911和CΔgalE。在半乳糖代谢途径中,galE基因缺失后,参与尿苷二磷酸葡糖与葡萄糖之间代谢的galU、pgm、glk基因表达量降低,D-葡萄糖-6-磷酸累积;与UDP-半乳糖代谢有关的dgoK、dgoAa、dgoAb、malZ和galM基因表达量升高。galE基因缺失还加强了甘薯青枯菌对于苹果酸的同化作用。上述研究结果说明,galE基因对青枯菌的致病性与碳代谢水平均有明显影响。
关键词: 甘薯青枯菌 甘薯瘟病 尿苷二磷酸-葡萄糖4-差向异构酶 胞外多糖 半乳糖代谢 碳代谢


福建省6个桃园养分、重金属、抗生素特征分析与评价
《中国土壤与肥料 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为了解福建省主要桃产区桃园的土壤养分状况以及重金属、抗生素污染情况,测定了宁德市古田县、龙岩市连城县、南平市建瓯市、南平市建阳区、福州市晋安区、福州市闽侯县共 6 个桃园有机肥和土壤的养分含量、土壤样品中的重金属残留量、有机肥及土壤中的抗生素含量.根据相关标准对土壤的安全性进行了初步分析评价.测定结果表明,养分投入在各产区桃园差别不大,但是土壤各养分含量差异明显,对比国家土壤养分分级标准,全氮含量均小于 0.05 g/kg,为第 6 级,显示极度缺乏;有效磷、速效钾含量平均值均达到 1 级标准,变化范围分别在 0.650~631.186 和 44.606~418.595 mg/kg,变异程度大.8 种重金属在样品土壤中的检出率为 100%,除建瓯桃园Cr含量超标外,其余重金属及其他桃园重金属含量均低于国家农用地土壤污染风险筛选值,但重金属含量差异较大,其中Cr、Cu、Zn和Pb的含量较高,Hg和Cd的含量较低,建瓯桃园的Cr以及闽侯桃园的Cd单项污染指数均大于 1,达到污染水平;建瓯、闽侯的内梅罗综合污染指数在 0.7~1.0 范围内,污染等级达到警戒线.测定的 24 种抗生素结果显示,有机肥中检出 7 种、土壤中检出 5 种,土壤中检测的抗生素含量高于有机肥中抗生素含量,特别是喹诺酮类中的恩诺沙星和环丙沙星.总之,各桃产区应加强施肥,调整养分投入配比,保证养分吸收平衡;虽然土壤重金属、抗生素总体污染水平较低,但仍需警惕.


5个番石榴品种果实食用品质和香气特征分析
《热带亚热带植物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为比较番石榴(Psidium guajava)不同品种果实的外观、营养价值和香气特征,采用国家标准方法,对5个番石榴品种(‘红宝石’、‘粉红蜜’、‘西瓜’、‘水蜜’、本地种)果实的外观和营养成分进行测定,采用顶空气质联用(HS-GC-MS)技术对5个品种果实的香气成分进行测定。结果表明,不同品种果实外观及营养成分差异明显。‘水蜜’的果形指数最低,果实扁圆形,种籽最少;大多数糖类物质(总糖、还原糖、蔗糖等)、糖酸比、总酚含量最高;果糖、VC和总黄酮含量位居第2;总酸、脂肪、粗纤维、灰分含量最低。主成分分析表明,‘水蜜’作为鲜食水果的食用品质最高。己醛和石竹烯是红肉型品种的特征风味物质,3-羟基-2-丁酮是白肉型品种的特征香气成分。

