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猪黑素皮质激素受体-4基因(MC4R)启动子克隆及其分析

农业生物技术学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:本研究旨在对猪黑素皮质激素受体-4基因(MC4R)的转录调控机制进行初步探讨。首先通过PCR方法扩增MC4R基因5'上游启动区1234bp(-1264~-31bp)的片段,再利用生物信息学方法对这一区域内潜在的转录起始位点进行了预测,最后采用步移缺失获得了11段长度不等的启动子片段,并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒(pGL3-Basic)中。同时,通过双荧光素酶报告活性分析检测MC4R基因启动子区不同长度片段在猪上皮型肾细胞(PK15)中瞬时转染后的活性。结果表明,猪MC4R5'端-682bp处存在1个潜在的转录起始位点(TSS),细胞检测结果显示-514~-486bp区域内存在控制MC4R基础转录活性的顺式调控元件,推测该序列内的热休克转录因子(HSF)结合位点可能对MC4R基因的表达调控及功能行使具有重要作用。

关键词: 黑素皮质激素受体-4(MC4R)基因 启动子 调控序列

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大豆优良品种合丰50迅速大面积推广应用原因分析

大豆科学 2011 北大核心 CSCD

摘要:合丰50是近年育成的高油、高产优良大豆品种,2010年推广面积就达到64.2万hm2,是黑龙江省第一大品种,推广4 a面积扩大了17.4倍。合丰50迅速大面积推广的主要原因有:合丰50特点突出,品种优秀;栽培技术配套,大面积示范和高产创建;项目带动,提供示范与高产创建的资金支持;抓好种子繁育与供应体系,创新成果转化模式。

关键词: 大豆优良品种 合丰50 推广应用

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冷诱导下民猪磷酸葡萄变位酶基因的表达变化

黑龙江畜牧兽医 2011 北大核心

摘要:磷酸葡萄变位酶(PGM)是糖代谢过程中的一个关键酶,为了研究其表达变化,研究采用RT-PCR和Real-time PCR方法,对PGM在大肠、腿肌、肺脏、脂肪、心脏、脾脏和肝脏组织的表达水平以及冷诱导前后民猪骨骼肌内PGM mRNA的表达变化进行了研究。结果表明:在所检测的7个组织中除大肠外其余组织PGM均高水平表达,而且冷诱导后PGM mRNA的水平出现了明显的下降。

关键词: 磷酸葡萄变位酶(PGM) 民猪 冷诱导 Real-time PCR RT-PCR

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大豆加工领域的科学技术问题

中国食品学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:随着我国大豆消费量的持续上升,大豆食品加工业也有了很大的发展,大豆的综合利用和深加工水平不断提高。大豆食品以其全面、独特的营养保健功能越来越受到消费者的青睐,同时也对大豆加工的科学和技术提出了更高的要求。本文分析了大豆蛋白、大豆油脂、大豆糖类和大豆功能性物质的研究现状,阐述了目前大豆加工领域的科学技术问题和大豆加工的发展趋势,明确了今后的研究方向。

关键词: 大豆 加工 科学技术

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猪TPST1基因的克隆、序列分析及真核表达载体的构建

东北农业大学学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:酪氨酸硫化转移酶(Tyrosylrotein sulfotransferase,TPST)在酪氨酸硫化修饰过程中起调节作用。试验参照人、鼠、牛等动物的TPST1 mRNA全长序列设计引物,通过电子克隆结合RT-RCR的方法首次克隆获得包括完整CDS区的猪TPST1基因cDNA序列(HQ439987),分析其核苷酸序列及其编码蛋白质分子结构特征。结果表明,猪TPST1序列全长1 543 bp,包含1 113 bp的完整开放阅读框,编码370个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,该基因编码蛋白质与牛(97.6%)、小鼠(96.8%)、大鼠(97%)、人(97.03%)等物种TPST1蛋白质具有较高的一致性。蛋白质序列预测分析发现,猪TPST1氨基酸序列理论等电点(pI)为9.0,相对分子质量(MW)为42.13 ku。

关键词: 民猪 TPST1基因 序列分析 载体构建

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利用Affymetrix芯片分析民猪冷应激后肌肉组织的基因表达谱

畜牧兽医学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:冷应激可引起动物生产性能下降,诱发多种疾病,甚至造成死亡。民猪是我国北部地区特有的一个抗寒品种,为了研究冷应激下基因的表达调控机制,本研究利用Affymetrix猪基因芯片对民猪冷应激后肌肉组织内表达发生变化的基因进行了高通量的检测。结果,共检测到差异基因34个,其中下调表达的基因27个,上调表达的基因7个。在下调表达的基因中有7个(OAS1、IRG6、ISG20、DDX58、IFITl、ISG15、CXCL9)与干扰素诱导相关,1个(FST)与生长性状相关,2个(MX1、PG-2)与抗病毒有关,2个(S100A9、Numb)与细胞生长和凋亡有关;上调表达的基因功能还不清楚,推测它们可能与提高机体的抗寒性有关。对其中5个基因进行了Real-time PCR分析,证实它们都受到了温度的调节,与芯片检测结果吻合。结果提示,重度冷应激会造成机体免疫力下降,生长减缓。

关键词: 民猪 冷应激 基因芯片 Real-timePCR

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‘藤稔’葡萄VvGAI基因的克隆、亚细胞定位及时空表达分析

园艺学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:以‘藤稔’葡萄(Vitisvinifera×V.labrusca‘Fujiminori’)的茎、叶、花和果为试材,采用RT-PCR结合RACE技术,克隆获得1个推测为葡萄赤霉素响应因子VvGAI基因的cDNA序列,全长2295bp,其编码590个氨基酸。该基因在GenBank基因数据库的登录号为HQ834311。序列分析表明:VvGAI与杨树、拟南芥、水稻的同源基因的氨基酸序列相似性分别为68.56%、62.79%和54.16%。半定量与定量PCR结果都表明,VvGAI在葡萄茎尖、叶、花和果等营养与生殖器官中均有表达,但在茎尖中的表达最高,是一个与快速生长和分裂关系密切的基因。50mg·L-1赤霉素处理后,各阶段果实中VvGAI表达量趋势与对照基本一致,但水平低于对照,其中幼果中表达量最高。洋葱表皮细胞的瞬时表达显示,VvGAI蛋白定位于细胞核。

关键词: 葡萄 VvGAI 克隆 表达 亚细胞定位

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西藏地区燕麦与箭筈豌豆不同混播比例对牧草产量和质量的影响

草地学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:在西藏日喀则地区,将燕麦(Avenasativa L.)与箭筈豌豆(Viciasativa L.)种子按不同比例进行混播试验,通过对混收牧草产量和品质的测定分析,研究适宜在当地生长的燕麦与箭筈豌豆的最佳混播比例,以期获得最大的生物产量和营养价值。结果表明:在燕麦播种量不变的情况下,随着箭筈豌豆混播比例的增加,粗蛋白质(CP)含量随之增加,而中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量降低。在49种混播组合中,混播播种量为燕麦210kg.hm-2和箭筈豌豆75kg.hm-2(G1)混播组合的干草产量和营养成分的综合指标最高,可在西藏日喀则地区推广应用。

关键词: 西藏地区 燕麦 箭筈豌豆 混播

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牛源无乳链球菌sip蛋白抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

中国预防兽医学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:为测定牛源无乳链球菌表面免疫相关蛋白(sip)的抗原性,本实验通过建立间接ELISA方法,对该蛋白的抗原性进行分析及鉴定。根据无乳链球菌sip基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位优势区编码的基因序列,并将其与原核表达载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-sip,转化宿主菌BL21中,经IPTG诱导,获得重组蛋白,western blot分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性。以纯化的表达产物作为包被抗原,建立检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.125μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。应用该方法对无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌兔阳性血清进行检测,结果表明,该方法具有良好的特异性和灵敏度。

关键词: 无乳链球菌 sip基因 原核表达 间接ELISA

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离子液体在香料制备中的应用

安徽农业科学 2011 北大核心

摘要:离子液体作为环境友好的"绿色"溶剂和"可设计"溶剂在合成化学中得到了广泛应用。离子液体的应用为各种香料和香豆素提供了高效、环保的制备途径,特别是功能化离子液体的应用避免了使用额外的催化剂,建立了更加经济、环境友好的反应工艺。综述了离子液体在香料制备中的应用进展。

关键词: 离子液体 香料 催化

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