科研产出
基于小孢子培养创制DW871矮秆彩色油菜新种质
《中国油料作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：彩色油菜具有油用和观赏价值，因易种植、花色鲜艳和开花时间长等特点备受关注。然而，目前报道彩色油菜多为高芥酸、高硫甙的高秆株型，不满足兼作观赏和油用推广应用要求。因此，选育品质优良、株型适宜的彩色油菜新种质是观赏油菜的育种目标之一。本研究中以具有特异花序性状、观赏价值大的DW871为基础材料，与普通彩色高秆油菜杂交后，F1代利用小孢子培养技术创制具有DW871特性同时品质优良的彩色花新种质。研究表明，采用前期集成的油菜小孢子培养技术，产胚率达到了312～507胚/蕾，共纯合到14株彩色花油菜，其中白色花5株，橘红色花4株，金桔色花5株。经过农艺性状调查和品质分析，从DH植株中筛选出的Y57是一株含有DW871特异花序、矮杆、金桔色花、品质“双低”的优良新种质，株高88 cm，一次分支数18个，含油量39%，蛋白质含量25.96%，芥酸为0.95%，硫苷为28.15μmol/g饼，是培育集观赏和油用价值的甘蓝型彩色油菜新种质，具有较高的利用价值和广阔的应用前景。
关键词： 甘蓝型油菜 小孢子培养 产胚率 彩色油菜种质 DW871
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基于mtDNA COⅠ基因序列的山香圆平背粉虱遗传多样性分析
《生物学杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究茶树害虫山香圆平背粉虱(Crenidorsum turpiniae)的遗传多样性，掌握山香圆平背粉虱的遗传分化现状及精准防控提供理论依据，通过基因组DNA提取、PCR扩增与测序，测定贵州省11个不同地理区域的山香圆平背粉虱种群mtDNA COⅠ基因序列片段，开展基因序列特征、单倍型及遗传多样性、遗传分化与基因交流、分子变异和单倍型系统发育分析。结果表明，山香圆平背粉虱mtDNA COⅠ基因序列片段扩增长度均为658 bp,序列具有明显的A+T偏倚性，共定义10个单倍型。贵州茶园山香圆平背粉虱总群体遗传多样性较高，表现出高单倍型多样性(Hd=0.800)和高核苷酸多样性(Pi=0.067 0)。11个地理种群的山香圆平背粉虱总群体遗传分化程度高(Fst=0.920 3),基因交流水平低(Nm=0.04)。AMOVA分析显示，山香圆平背粉虱的遗传变异主要来自组间(F_(CT)=0.912 9);中性检验与错配分布分析综合表明，山香圆平背粉虱近期未发生过明显扩张现象；单倍型系统发育分析及中介网络图聚类结果均表明，山香圆平背粉虱聚为3分支，分化枝可能已达物种水平。
关键词： 茶树新害虫 山香圆平背粉虱 线粒体COⅠ基因 遗传多样性 遗传分化
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萝卜开花基因RsFLC3的克隆与表达分析
《种子 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：植物开花春化途径中关键抑制因子FLC基因属于MADS-box基因家族，为探索萝卜开花抑制基因FLC3的功能，以抽薹开花差异较大的萝卜品种YZH（易抽薹）和XHT（耐抽薹）为研究材料，对萝卜开花基因进行生物信息学分析，克隆了萝卜RsFLC3基因，并进行亚细胞定位和两个萝卜品种不同时期的qRT-PCR分析。结果表明，共鉴定出萝卜开花相关基因638个，亚细胞定位显示该基因编码的蛋白定位于细胞核，RsFLC3基因在萝卜抽薹开花过程中表达量整体呈下降趋势，但不同品种间大部分时期的表达量差异较大。
关键词： 萝卜 RsFLC3 亚细胞定位 生物信息学分析 表达分析
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鼠伤寒沙门菌小RNA RybB及伴侣蛋白Hfq对孔蛋白OmpD的表达调控
《微生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究小RNA （small RNA, sRNA） RybB和伴侣蛋白Hfq对沙门氏菌孔蛋白OmpD表达的调控作用。【方法】以鼠伤寒沙门菌（SalmonellaTyphimurium,STM）为研究对象，将含有编码β-半乳糖苷酶的lacZ报告基因的pCE40质粒转入ompD基因单缺失菌株中以获得lacZ报告菌株；在此基础上，利用P22噬菌体转导技术分在lacZ报告菌株中构建rybB全序列缺失、hfq全序列缺失、hfq点序列敲除和hfq序列截短以获得双突变实验菌株，以及rybB全序列缺失和hfq全序列缺失的三突变实验菌株。通过β-半乳糖苷酶活性试验和RT-qPCR探究sRNA RybB及伴侣蛋白Hfq对孔蛋白OmpD表达的调控作用。【结果】成功在lacZ报告菌中构建rybB全序列缺失、hfq全序列缺失、hfq点序列敲除和hfq序列截短等双缺失实验菌株，以及rybB全序列缺失和hfq全序列缺失的三突变实验菌株。与野生型（wild type, WT）菌株相比，在lacZ报告菌株中，hfq基因截短为87个氨基酸序列的突变株中的OmpD蛋白活性下调了2.16%，其余实验株OmpD蛋白的β-半乳糖苷酶活性均呈上升趋势。与WT菌株相比，实验菌株ompD基因转录水平除了STM LT2?ompD::lacZΔhfq65的上调不具有显著性外，其余实验菌株均显著（P＜0.05）上调，其中lacZ报告菌株、rybB全序列缺失和hfq全序列缺失的三突变实验菌株ompD基因转录水平上调最明显，为1.83倍。【结论】ompD基因的转录及蛋白表达主要受hfq基因和sRNA RybB的负反馈调节；Hfq的远端面在对ompD基因的转录抑制中起关键作用。通过多个基因突变菌株的构建，阐述了sRNA伴侣蛋白Hfq与孔蛋白OmpD的相互作用关系，探索了Hfq对ompD的调控关键区域，丰富了sRNA的调控理论。
关键词： 鼠伤寒沙门菌 λ-Red同源重组 sRNA RybB Hfq ompD
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优化肥药模式对贵州喀斯特山区直播冬油菜产量及经济效益的影响
《华中农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为优化贵州喀斯特山区直播冬油菜肥药模式，于2018—2019年和2019—2020年在贵州省11个冬油菜主产县（市、区）连续2 a开展田间试验，研究不同肥药模式（T1：传统肥药模式、T2：优化肥药模式、T3：优化肥药模式下不施用化肥和T4：优化肥药模式下不喷施农药）对直播冬油菜产量及经济效益的影响，探讨适合贵州喀斯特山区直播冬油菜生产的高产高效肥药技术。结果显示，与T1相比，T2总养分投入量减少19.9%，农药投入量减少69.5%。T2模式（直播冬油菜）株高、茎粗、一次有效分枝数、角果长度、角果密度、单株角果数、每角粒数和千粒重均低于T1处理，2018—2019年T2处理的株高、茎粗、一次有效分枝数、角果长度和角果密度分别比T1处理低9.8%、26.4%、10.9%、10.2%和24.2%,2019—2020年分别低9.5%、28.3%、12.8%、10.9%、23.9%；但T2处理有群体优势，2 a收获密度较T1处理分别显著增加199.0%、194.2%。2aT2冬油菜产量分别为2224.4和2 103.3 kg/hm2，较T1分别增加10.1%和3.7%。T2化肥利用效率和农药防治效率2 a分别为2.20、2.14和141.82、106.23 kg/kg，显著高于T1。T2冬油菜2 a产值和净收益分别为11 121.8、10 516.4和5 286.8、4 681.4元/hm2，较T1分别增加1 020.0、371.6和2 625.0、1 976.6元/hm2，实现节本增收。结果表明，当前优化肥药模式（T2）能够满足贵州喀斯特山区直播冬油菜生长，能有效提高冬油菜产量、肥料和农药利用效率及经济效益，此优化肥药模式可作为贵州喀斯特山区直播冬油菜生产的主推模式进行推广应用。
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2个佛手瓜品种核型分析及基因组大小测定
《种子 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本试验以贵州省惠水县主要品种绿皮佛手瓜、白皮佛手瓜为材料，通过去壁低渗法染色体制片、流式细胞术分别对其核型、基因组大小，染色体数量、倍性等特征进行研究。结果表明，贵州惠水白皮佛手瓜、绿皮佛手瓜均为2倍体，染色体数目均为28条，白皮佛手瓜、绿皮佛手瓜的核型公式均为2n=2x=28m,白皮佛手瓜核型类型为1B型，绿皮佛手瓜为1C型，绿皮佛手瓜的不对称系数为52.38%,白皮佛手瓜的不对称系数为52.07%,通过流式细胞术测定，白皮佛手瓜、绿皮佛手瓜基因组大小分别为（0.73±0.02）Gb、（0.70±0.02）Gb。
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施氮量对优质稻G优325氮肥利用率和产量的影响
《四川农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探明优质杂交籼稻新品种G优325的适宜施氮量.[方法]设5个施氮量处理(0、60、120、180和240 kg/hm2,分别记为N0、N60、N120、N180和N240)进行田间试验,研究不同施氮量对G优325主要生育时期茎糵数、干物质积累与转运能力、氮肥吸收利用率和产量及其构成因素的影响.[结果]适当增加施氮量能显著提高G优325的产量,且在N180处理下产量最高.施氮量对产量构成因素、茎蘖数和干物质积累总量影响显著,随着施氮量增加,G优325成熟期的有效穗数、每穗总粒数和干物质积累总量均表现为先增加后降低的趋势,且有效穗数和干物质积累总量均在N180处理达到最高值,而每穗粒数在N120处理最多.随着施氮量增加,抽穗前后的干物质积累向籽粒的转运量均表现为处理N180>N240>N120>N60>N0;拔节期、抽穗期和成熟期的氮素积累总量均表现为先增加后降低的趋势,且均在N180处理下最高;氮素干物质生产效率、氮素稻谷生产效率、氮素收获指数、氮肥吸收利用率、氮肥农学利用率、氮肥偏生产力和氮素生理利用率均表现为处理N0>N60>N120>N180>N240.[结论]适宜提高施氮量(180 kg/hm2),可协同实现优质杂交籼稻新品种G优325高产与较高氮肥利用效率.
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不同类型多肉植物的花粉活力检测方法筛选及活力鉴定
《种子 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：以3个科6个属的13种多肉植物种质资源为材料,对比亚历山大染色法和碘-碘化钾(I2-KI)染色法染色后花粉活力的差异,筛选适宜不同类型多肉植物花粉活力的测定方法.结果表明,两种染色法对不同科属的多肉植物花粉染色结果差异极显著,I2-KI染色法检测的花粉活力平均值显著低于亚历山大染色法;种质资源的花粉活力普遍高于杂交组合,聚类分析结合差异显著性分析将26种目标种质资源及杂交组合的花粉活力划分为5个等级;显微镜下花粉形状呈现圆形、方形、椭圆形和不规则形,且同一品种存在一种到多种的花粉萌发孔形态.
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钩藤UrLAMT基因及其启动子的克隆与分析
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]克隆钩藤(Uncaria rhynchophylla)中马钱苷酸甲基转移酶(loganic acid methyltransferase,LAMT)基因及其启动子,对UrLAMT基因的组织表达及其对生物和非生物胁迫的响应进行分析,并对UrLAMT及其启动子的生物信息学进行分析,为进一步研究UrLAMT转录调控奠定基础.[方法]基于钩藤的转录组数据设计引物,采用PCR从钩藤cDNA中克隆UrLAMT序列,并对其进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR,分析UrLAMT在钩藤不同组织(根、茎、叶、花、果实、钩)中的表达,以及对外源茉莉酸甲酯(MeJA)、遮光/复光胁迫的响应;利用FPNI-PCR技术克隆UrLAMT上游启动子序列,并验证其活性,结合酵母单杂交试验,分析相应转录因子与UrLAMT启动子的调控关系.[结果]克隆得到钩藤UrLAMT序列,其长度为1 137 bp,共编码378个氨基酸.UrLAMT蛋白质相对分子质量为42.64 ku,理论等电点为5.76,为亲水性蛋白,无信号肽,不含跨膜结构,定位在细胞质中;UrLAMT基因在钩藤叶中表达量最高,其次为根;UrLAMT均能响应MeJA和光;其与短小蛇根草和长春花的进化关系较近.UrLAMT启动子序列长度为1 141 bp,除核心响应元件外还含有多个光响应元件,UrLAMT启动子在酵母中与光调控转录因子HY5存在相互作用.[结论]获得了 UrLAMT基因及其启动子序列,其在钩藤叶中表达量最高,可能受光诱导.
关键词： 钩藤 马钱苷酸甲基转移酶 基因克隆 启动子克隆 酵母单杂交
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UPLC-MS/MS法同时测定鲜黄精中12种杀菌剂残留
《分析试验室 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：建立了超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）同时检测鲜黄精中12种杀菌剂残留的分析方法。样品采用优化的QuEChERS法进行前处理，乙腈提取，NaCl盐析后经C18净化。12种杀菌剂经Thermo Hypersil GOLD色谱柱分离，使用UPLC-MS/MS电喷雾离子化、正/负源切换，多反应监测模式检测，基质匹配标准溶液外标法定量。结果表明，在5.0×10-4～1.0 mg/L范围内12种杀菌剂线性关系良好，线性相关系数（R2）>0.99。在0.001,0.01,0.1,1.0 mg/kg 4个添加水平下，12种杀菌剂的平均添加回收率为72.3%～109.0%，相对标准偏差（RSD）为0.6%～13%。12种杀菌剂在鲜黄精中的定量限均为0.001 mg/kg。该方法符合农药残留分析要求，适用于鲜黄精中12种杀菌剂的批量快速定性定量分析。
关键词： 黄精 杀菌剂 QuEChERS UPLC-MS/MS 残留
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