科研产出
延黄牛CIDEC基因多态性及与肉质性状的相关性分析
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了探究延黄牛CIDEC基因多态性及其与肉质性状的影响，试验以80头延黄牛为研究对象，利用PCR法与Sanger测序法结合的方式检测CIDEC基因外显子中的单核苷酸多态性位点（SNP），并与肉质性状数据进行关联分析。结果表明：延黄牛CIDEC基因外显子4第56 bp、75 bp和165 bp处存在突变位点，A56G存在AA、AG和GG 3种基因型；C75T存在CC、TC 2种基因型；C165T存在CC、TC、TT 3种基因型；群体遗传参数分析可知，A56G处纯合度0.727 8、有效等位基因数1.374,C75T纯合度0.975 3、有效等位基因数1,C165T纯合度0.585 8、有效等位基因数1.707，多态信息含量（PIC）表现为第1、2处SNP位点为低度多态（PIC<0.25），第3处SNP位点为中度多态（0.25
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识别NG PAM序列的Cas9变异体编辑玉米ZmSCD基因及其效率测试
《华北农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了探究评估SpCas9-NG在玉米基因组编辑中的应用潜力，以叶绿素合成关键基因ZmSCD作为编辑对象，该基因缺失会使苗出现白化现象，以此直观评估编辑效率。依据SpCas9和SpCas9-NG分别识别的5′-NGG-3′和5′-NG-3′PAM序列的规则，在ZmSCD的第2和第3外显子上设计了靶点后，成功将靶点序列构建至SpCas9及SpCas9-NG敲除载体上，再利用农杆菌介导的遗传转化方法将敲除载体导入玉米自交系KN5585中，将愈伤组织培养至分化出叶片组织时，统计白化苗率，以此得出不同编辑器的编辑效率，并对白化苗提取基因组后进行测序。通过3轮遗传转化SpCas9分别获得76,125,28个愈伤组织，SpCas9-NG获得100,69,30个愈伤组织。结果显示，SpCas9的3轮遗传转化的基因编辑效率分别为14.47%,13.60%,10.71%,SpCas9-NG编辑效率分别为12.00%,10.14%,13.33%;对其白化苗测序结果显示，均在靶点附近获得重叠峰。结果表明，SpCas9-NG在玉米中的编辑效率与传统SpCas9相似，显示出同样的基因编辑能力；相比之下，SpCas9-NG具备更宽泛的PAM序列适应性，这意味着它的靶点设计能力更为灵活，允许在玉米基因组中实现更加精准和多样化的编辑。
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长期施肥对黑土和棕壤团聚体稳定性的影响及驱动因素
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】比较长期不同施肥措施对两种典型土壤（黑土和棕壤）团聚体分布和稳定性的影响，探究影响团聚体稳定性的关键因素，为缓解土壤结构退化提供理论支撑。【方法】依托34年黑土和45年棕壤长期定位试验，选取两定位点共有的不施肥（CK）、化肥（NPK）、化肥配施有机肥（NPKM）处理，以及黑土特有的化肥配施秸秆（NPKS）处理、棕壤特有的有机肥——猪厩肥（M）处理，采集0—20 cm土层土壤样品，测定土壤化学性质，采用湿筛法对土壤团聚体进行筛分。【结果】相比于CK,NPK处理下黑土和棕壤大团聚体（>0.25 mm）比例显著降低8.6%和11.3%，团聚体平均重量直径（MWD）分别显著减少18.6%和10.7%，说明单施化肥导致黑土和棕壤团聚体稳定性显著降低；NPKM和M处理下棕壤的MWD分别显著增加44.2%和17.9%，而NPKM处理下黑土MWD未发生显著变化，但NPKS处理下黑土MWD显著提高11.8%，说明在棕壤中施用猪厩肥，黑土中秸秆还田是提高团聚体稳定性的重要措施。土壤团聚体的稳定性主要受土壤化学性质的影响。长期施用化肥（NPK）导致黑土和棕壤的pH和交换性钙、镁离子(Ca2+、Mg2+)降低，阻碍了大团聚体的形成和稳定。施用有机物料（M、NPKM、NPKS）抑制了土壤pH的降低，提高土壤颗粒态有机碳（POC）和矿物结合态有机碳（MAOC）的含量，促进有机碳与铁铝氧化物、钙镁离子的结合，推动了黑土和棕壤颗粒的团聚过程，进而维持和提高了团聚体的稳定性。综合分析表明，影响黑土团聚体稳定的因素从大到小依次为络合态氧化铝（Alp）、Ca2+、POC、pH、MAOC，其中黑土团聚体稳定性与Alp显著负相关，与其余因素显著正相关。影响棕壤团聚体稳定性的关键因素从大到小依次为POC、络合态氧化铁（Fep）、pH、Mg2+、Ca2+、无定形态氧化铝（Al_o）、Alp、无定形态氧化铁（Fe_o），其中棕壤团聚体稳定性与Al_o和Fe_o显著负相关，与其他因素显著正相关。【结论】化肥配施有机物料（猪厩肥、秸秆）可以抑制土壤酸化，通过增加土壤POC和Ca2+含量，提高黑土和棕壤团聚体的稳定性，是延缓土壤结构退化的重要施肥措施。
关键词： 长期施肥 黑土 棕壤 团聚体稳定性 有机碳组分 铁铝氧化物
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东北半干旱区浅埋滴灌下玉米高产高效的尿素硝酸铵溶液投入阈值
《中国生态农业学报(中英文) 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探明滴灌玉米尿素硝酸铵溶液（UAN）对尿素的增效作用及适宜投入阈值,在吉林省半干旱区（乾安县）开展连续2年（2020—2021年）的田间定位试验,以UAN为试验材料,设6个氮肥用量[0 kg（N）·hm-2、100 kg（N）·hm-2、140 kg（N）·hm-2、180 kg（N）·hm-2、220 kg（N）·hm-2和260 kg（N）·hm-2],并以尿素优化用量处理[Urea,220 kg（N）·hm-2]为对照,研究玉米产量与构成、干物质积累、叶面积指数、氮素利用率、土壤氮素含量及氮素平衡差异。结果表明,施氮显著提高了玉米产量,并随施氮量增加而增加,当氮肥用量超过180 kg·hm-2后，增产幅度不显著,且高于Urea处理,两年平均增幅为2.02%。增产原因是施用UAN提高了玉米每穗粒数和百粒重。对于施用UAN的处理来说,玉米各生育期叶面积指数、干物质积累量、干物质转运量和吐丝后干物质积累对籽粒贡献率总体随施氮量增加呈增加趋势,当施氮量增至180 kg·hm-2后以上指标不再显著增加,但均高于Urea处理（2021年吐丝后干物质积累对籽粒贡献率除外）;氮素回收率、氮素农学利用率和氮素偏生产力随氮肥用量的增加呈下降趋势,且相同氮肥用量下,UAN处理较Urea处理分别提高4.45%、2.09 kg·kg-1和2.09 kg·kg-1。与Urea处理相比,相同用量下UAN处理降低了60～100 cm土壤无机氮含量,使氮素损失量较Urea处理降低7.51%。通过拟合施氮量与玉米产量、氮素回收率和土壤表观氮素损失量,确定UAN适宜用量为188.90 kg·hm-2,相应玉米产量为11 863.42 kg·hm-2,氮素回收率为44.21%,氮素表观损失量为151.79 kg（N）·hm-2。与传统尿素优化用量处理（Urea）相比,UAN的施用可在降低14.14%氮肥用量的前提下,使得玉米产量增加4.78%,氮素回收率增加7.61%,氮素表观损失量降低29.55%。以理论最高产量施氮量95%为置信区间,确定UAN适宜施氮范围为179～198 kg（N）·hm-2。综上所述,与施用尿素相比,施用UAN可减少氮素投入总量,获得更高的玉米产量和氮素利用效率,并降低氮素损失,是东北半干旱区实现玉米减氮增效的有效途径。
关键词： 玉米 浅埋滴灌 尿素硝酸铵溶液 东北半干旱区 氮素利用效率 氮素表观平衡
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排酸处理对沃金黑牛肉品质的影响
《东北农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为研究排酸处理对沃金黑牛肉品质的影响，选择体重接近、健康无病、发育正常的沃金黑牛8头，同一饲养管理，饲养至30月龄进行屠宰，宰后取同一背最长肌12～13肋处西冷部位，试验分为未排酸组和排酸组（4℃排酸6 d），分别测定剪切力、肉色、加压失水率、离心失水率、蒸煮损失、滴水损失、熟肉率、pH值等食用品质参数，水分、粗蛋白、肌内脂肪等营养品质参数以及黏合力、凝聚性、弹性、黏结性、黏性、咀嚼度、硬度等质构特性参数。结果表明，食用品质：未排酸处理组肉样与排酸处理组肉样的pH值、加压失水率、离心损失、滴水损失、剪切力之间差异极显著（P<0.01）。肉色L*值：未排酸处理组、排酸处理24 h组、排酸处理6 d组差异极显著（P<0.01）。肉色a*值：未排酸处理组和排酸处理24 h组差异不显著（P>0.05），与排酸处理6 d组差异极显著（P<0.01）。肉色b*值：未排酸处理组和排酸处理24 h组差异显著（P<0.05），未排酸处理组和排酸处理24 h组分别与排酸处理6 d组差异极显著（P<0.01）。未排酸处理组肉样与排酸处理组肉样的熟肉率、蒸煮损失之间无显著差异（P>0.05）。营养品质：未排酸处理组肉样和排酸处理组肉样粗蛋白差异显著（P<0.05）。未排酸处理组肉样和排酸处理组肉样的水分、肌内脂肪之间无显著差异（P>0.05）。质构特性：未排酸处理组肉样与排酸处理组肉样黏合力、弹性差异极显著（P<0.01）。未排酸处理组肉样与排酸处理组肉样凝聚性、黏结性、硬度差异显著（P<0.05）。未排酸处理组肉样与排酸处理组肉样黏性、咀嚼度差异不显著（P>0.05）。综上食用品质、营养品质以及质构特性分析得出，低温排酸处理6 d组的沃金黑牛肉品质整体上优于未排酸处理组。
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转基因大豆多靶标质粒DNA标准分子的研制及应用
《生物技术通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]为了确保转基因检测技术的标准化和准确性,开发一种适用于转基因大豆定性定量检测的多靶标质粒标准分子.[方法]针对 13 种转基因大豆转化体的分子特征信息,合成了含有多靶标序列的核酸片段,通过将外源片段插入pUC57 质粒多克隆位点并经大肠杆菌转化,研制了含有 27 个转基因大豆靶标序列的质粒DNA标准分子pUC57-SOY.采用普通PCR、单重、双重实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法对DNA标准分子pUC57-SOY的靶标特异性进行测试,利用 13 种大豆转化体进行定量检测适用范围和定值参数性能进行评估.[结果]在普通PCR检测中,质粒DNA包含的 24 种检测靶标,均能稳定扩增,且无非特异性扩增产物,表明质粒DNA标准分子pUC57-SOY在实际检测中具有良好的特异性;实时荧光定量PCR(qPCR)方法测试表明,质粒标准分子的不同浓度与靶标扩增效率具有良好的线性相关性.以pUC57-SOY标准分子为阳性参照物,应用标准曲线内插法,实际样品检测结果与预期相一致.[结论]开发的多靶标质粒标准分子pUC57-SOY表现出符合转基因成分定性定量检测要求的优良性能.在定性检测中,24 种检测靶标均能稳定检测出并具有良好的特异性;在定量检测中,可实现一个标准分子对应 13 种靶标的精准测定.因此,该研究创制的质粒标准分子pUC57-SOY可作为转基因大豆检测的阳性对照品.
关键词： 转基因成分检测 转基因大豆 质粒DNA标准分子 定量
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蔬菜嫁接砧穗互作分子机制研究进展
《生物技术通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：嫁接技术是园艺作物增产、改良品质和增强抗逆性最经济有效的手段之一,其应用范围仍在不断扩大.除了要求嫁接技术不断提高外,还需进一步探索嫁接亲和性与砧穗互作的机制.嫁接成活包括一系列的生理、生化过程,嫁接激活、激素通路或参与维管束形成相关基因都有可能参与嫁接组织的再生重建,明确其调控机制具有重要意义.嫁接是砧木/接穗相互识别与作用的过程,砧穗间长距离信号传导是理解嫁接生理的基础.不同基因型的砧木/接穗嫁接组合,嫁接植株在生长发育、表型、产量及胁迫抗性方面表现不同.本文就蔬菜嫁接砧穗互作分子机制的研究进展进行综述,如嫁接成活、砧穗间遗传信号传递、嫁接与表观遗传变化及嫁接与基因表达,以期为深入研究蔬菜嫁接分子机制提供理论参考,为砧木选择和蔬菜种质材料创新提供指导.
关键词： 蔬菜嫁接 嫁接愈合 遗传物质传递 表观遗传修饰 基因表达调控
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莱氏绿僵菌与异色瓢虫协同增效防治蚜虫研究
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确莱氏绿僵菌(Metarhizium rileyi)和异色瓢虫(Harmonia axyridis)二者联用能否实现协同增效作用,为高效生物防治蚜虫提供理论依据和应用技术.[方法]通过莱氏绿僵菌孢子喷施异色瓢虫成虫、喷施蚜虫后饲喂异色瓢虫,分别以不喷施莱氏绿僵菌的异色瓢虫和饲喂不喷施莱氏绿僵菌蚜虫的异色瓢虫为对照,测定莱氏绿僵菌对异色瓢虫的直接和间接致病力;对蚜虫喷施莱氏绿僵菌,测定饥饿不同时间的异色瓢虫对其取食选择性;并测定取食莱氏绿僵菌处理的蚜虫后异色瓢虫对蚜虫的捕食能力、产卵量及卵孵化率等指标,明确取食莱氏绿僵菌处理的蚜虫对异色瓢虫捕食蚜虫能力的影响;分别设置先施用莱氏绿僵菌再释放异色瓢虫和单独释放异色瓢虫两个处理,以虫口减退率为指标,利用控制试验测定莱氏绿僵菌与异色瓢虫联合应用对蚜虫的防治效果.[结果]直接致病力与间接致病力评价均表明,异色瓢虫存活率与对照组无显著差异;饥饿处理 0 h,莱氏绿僵菌处理组中异色瓢虫对豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)取食选择率显著低于对照组,但在饥饿处理24和48 h后,处理组与对照组间取食选择率均未出现显著差异,这与捕食功能反应模型结论相符;莱氏绿僵菌处理组和对照组的异色瓢虫对豌豆蚜的瞬时攻击率分别为0.6585和0.6479,差异不显著(P>0.05);莱氏绿僵菌处理组和对照组的异色瓢虫连续 7 d的单雌产卵量分别为 161.67 和 167.33 粒,卵孵化率分别为 65.60%和 67.60%,均未出现显著差异(P>0.05);施用莱氏绿僵菌后再释放异色瓢虫处理组在释放瓢虫后第 2-3 天表现出更好的豌豆蚜控制效果,在第 2-4 天表现出更好的玉米蚜(Rhopalosiphum maidis)控制效果.[结论]莱氏绿僵菌对异色瓢虫在捕食能力、产卵量及卵孵化率方面无明显影响,且施用莱氏绿僵菌后释放异色瓢虫对蚜虫的防治效果得到提高,二者具有协同增效的作用.
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HPLC法测定工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的不确定度评定
《东北农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：对采用高效液相色谱法（HPLC）测定工业大麻中大麻二酚（CBD）和四氢大麻酚（THC）的不确定度进行评估，依据《测量不确定度评定与表示》（JJF 1059.1-2012）和《化学分析中不确定度的评估指南》（CNAS-GL006-2019），建立了HPLC法测定工业大麻中CBD和THC的不确定度评定的数学模型，逐层对测定过程中各不确定度来源进行分析，对各不确定度分量进行计算，再对测定结果进行合成不确定度和扩展不确定度评估。结果表明，检测CBD过程中，不确定度来源的主要因素所占分量由大到小排序为：标准溶液配制>标准工作曲线拟合>重复次数>提取>样品称量；检测THC过程中，不确定度来源的主要因素所占分量由大到小排序为：标准工作曲线拟合>重复次数>标准溶液配制>提取>样品称量。CBD结果平均值为0.166 g/100 g，扩展不确定度为0.031 2 g/100 g，取值结果为X=(0.166±0.031 2)g/100 g，包含因子k=2;THC平均值为0.052 2 g/100 g，扩展不确定度为0.003 44 g/100 g，取值结果为X=(0.052 2±0.003 44)g/100 g,包含因子k=2。此方法适用于类似条件下CBD和THC测定不确定度的评定。
关键词： 不确定度评定 工业大麻 大麻二酚 四氢大麻酚 高效液相色谱法
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