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绵羊FecB基因高通量HRM检测方法的建立及准确性评价

中国畜牧杂志 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了建立绵羊FecB基因高通量检测HRM方法并对其准确性进行检验,实验首先采用基因组PCR产物直接测序法,分别筛选出BB、B+和++基因型基因组各 2 份,参照HRM原理分别设计检验引物H1 和H2并进行系统检验分析.分析结果发现,使用H1 引物扩增效率及特异性良好,但不能分辨BB基因型,而使用H2 引物扩增效率及特异性良好,且能够有效识别 3 种基因型.扩大检验群体发现,使用H2 引物的HRM技术重复性良好.以基因组PCR产物直接测序结果为参考标准,检验HRM方法的准确性发现BB基因型检验敏感度为 75%,B+和++基因型敏感性分别为 96.2%和 100%,总体准确率为 96.9%,证实该方法能够满足育种实践对检测技术准确性的要求.绵羊FecB基因HRM检验方法的建立为高繁殖性状肉羊育种提供了新的技术工具.

关键词: 绵羊 FecB基因 高分辨率溶解曲线法 基因组PCR 测序

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东北半干旱区滴灌玉米对不同磷钾肥施用方法的响应

华北农学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:旨在研究不同磷钾肥施用方法对东北半干旱区滴灌玉米生长发育、磷钾养分吸收和利用及产量的影响,明确滴灌玉米磷钾滴施时期和次数,为东北半干旱区玉米磷钾滴灌施肥技术提供理论依据.2018-2019 年在吉林松原,以翔玉998 为试验材料,设置P0(不施磷处理)、K0(不施钾处理)、P1(磷肥 100%基施、钾肥 50%基施,50%钾肥分 3次追施)、K1(钾肥100%基施、50%磷肥基施,50%磷肥分4 次追施)、P1K1(磷钾肥100%基施处理)和P4K3(50%磷钾肥基施,剩余50%磷肥分4 次追施、50%钾肥分3 次追施)6 个处理.结果表明:磷肥分次滴施(P4K3)处理与P1 相比,玉米产量提高4.2%,成熟期干物质积累量提高6.8%(P<0.05),花后磷素积累增加 33.3%(P<0.05),显著提高磷肥当季回收率21.6 百分点和磷肥农学效率28.5%.钾肥分次滴施(P4K3)处理与钾肥一次基施(K1)处理相比,玉米产量提高3.5%,成熟期干物质积累量提高5.1%(P<0.05),钾肥当季回收率和钾肥农学效率分别显著提高了14.9 百分点和 53.5%;磷钾分次滴施处理与磷钾一次性基施相比,玉米产量提高 5.0%,花后磷素吸收量增加26.3%,磷肥当季回收率和农学效率分别提高19.5 百分点和32.6%;钾肥当季回收率和农学效率分别提高15.2 百分点和95.5%.在滴灌条件下,磷钾肥分次滴施不仅有利于提高玉米产量,还可以促进花后养分吸收、提高养分利用率.综合考虑,磷钾分次滴施(P4K3)处理是较为适宜大田生产的滴灌施肥技术.

关键词: 玉米 磷钾肥 滴灌 产量 磷钾利用

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近四十年来我国玉米大品种的历史沿革与发展趋势

作物学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:种子是农业的芯片,优良品种更新换代对我国玉米产量提高发挥了重要作用。研究近40年来我国玉米大品种的历史贡献和发展趋势对当前我国玉米育种具有重要的现实意义。本研究以1982—2020年期间全国农业技术推广服务中心发布的历年玉米品种推广面积为依据,筛选出近40年来我国种植的郑单958等27个玉米大品种,累计推广3.21亿公顷,占期间我国玉米总种植面积的29.09%,其中超大品种4个,分别是郑单958、中单2号、丹玉13、先玉335;特大品种6个,分别是浚单20、掖单2号、农大108、掖单13、四单19、烟单14,推广年限在8~30年之间,平均17.63年,单年最大推广面积在69.97万~456.95万公顷,平均150.79万公顷。主要分布于山东、河南、河北、吉林、黑龙江、内蒙古等省区, 13个品种单年超66.67万公顷的省(区)是山东、河南、河北、吉林、黑龙江、内蒙古、辽宁、四川。大品种种植面积占总面积的比例变化特征是1982—1989年期间快速上升、1990—1997年期间面积占比稳定、1998之后下降,至2020年面积占比下降到12%左右。裕丰303、中科玉505等具有发展成为大品种的潜力,未来智能设计育种将高效培育出新一代突破性品种,加速提升我国玉米单产水平。面对当前玉米生产问题及今后发展趋势,建议在区域试验的分布布局、试验精准度和品种审定标准等方面进一步完善玉米品种区域试验。

关键词: 1982—2020年 玉米 大品种 历史沿革 发展趋势

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基于截短绵羊鹦鹉热衣原体rMOMP183-390蛋白的间接ELISA检测方法建立与应用

中国预防兽医学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为建立绵羊鹦鹉热衣原体(Cp)间接ELISA抗体检测方法,本实验将编码Cp主要外膜蛋白MOMP的omp A基因序列按大肠杆菌密码子偏好性优化后,合成质粒pET-28b(+)-ompA,另外设计特异性引物,分别将omp A截短克隆至pET-28b(+)载体中构建重组表达质粒pET-28b(+)-ompA1-182和pET-28b(+)-ompA183-390,测序鉴定正确后分别转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导并纯化后,经western blot鉴定3个重组蛋白,结果显示,重组MOMP183-390蛋白(rMOMP183-90)表达效果最好.以rMOMP18-390作为包被抗原,采用方阵滴定法优化各反应条件,初步建立了检测Cp抗体的间接ELISA方法.采用建立的该方法检测羊痘病毒、布鲁氏菌、羊口疮病毒、小反刍兽疫病毒、口蹄疫病毒等羊临床常见病的阳性羊血清,结果显示,除Cp外,该方法与其他阳性羊血清均无交叉反应,特异性强;将Cp阳性血清2倍倍比稀释(1:50~1:6 400)后采用该方法检测,结果显示,当Cp阳性血清稀释达1:1 600时,仍可检测到抗体,敏感性高;批内、批间重复性试验结果显示,变异系数均小于10%.采用本研究建立的ELISA方法,以及间接血凝(IHA)试验和western blot分别检测随机选取的120份临床羊血清,结果显示该方法与IHA、western blot的总符合率分别为85%和91.67%;进一步采用建立的间接ELISA方法检测381份吉林省5家羊场的绵羊血清样品,结果显示阳性率为22.83%(87/381).本研究建立的绵羊Cp ompA重组截短蛋白的间接ELISA抗体检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,为Cp临床样品检测及流行病学调查提供了可靠的技术手段.

关键词: 鹦鹉热衣原体 ompA基因 间接ELISA 待检血清 抗体检测

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EMS诱导粒用高粱的突变体筛选和鉴定

核农学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为确定粒用高粱EMS处理的最佳浓度和时间,并创制粒用高粱新种质,本研究以粒用高粱亲本系2055B和10125为试验材料,采用不同时间和不同浓度甲基磺酸乙酯(EMS)处理,调查EMS诱变对高粱出苗、叶色、叶形、穗型、育性及生育期等农艺性状的影响。结果表明,两粒用高粱亲本系的出苗率、幼苗成活率、结实率均随着EMS诱变时间和浓度的增加而降低,突变率则随着EMS诱变时间和浓度的增加而升高。同一水平EMS处理对两亲本的抑制作用不同,恢复系10125的出苗率、成苗率、结实率受抑制作用均小于保持系2055B。综合考虑出苗率、结实率和突变率等数据,2055B的最佳诱变处理时间和浓度为14 h和0.25%,10125的最佳诱变处理时间和浓度是14 h和0.3%。通过对诱变后M2代进行表型观察、鉴定和筛选,获得了早熟、矮秆、分蘖等性状的突变材料,初步构建了粒用高梁EMS突变体库,为开展高粱育种和功能基因定位提供了新种质和基础材料。

关键词: 粒用高粱 甲基磺酸乙酯(EMS) 突变体 筛选

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甜菜碱在作物上应用的国内研究进展

东北农业科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:甜菜碱是一种生物碱,普遍存在于动植物体内,是动植物代谢的中间产物和非常重要的渗透调节物质,在营养物质的代谢中起着十分重要的作用。本文综述了在低温、盐、干旱、重金属等非生物胁迫下,施用外源甜菜碱在作物上应用的国内最新研究进展,并对应用进行了展望。

关键词: 甜菜碱 作物 应用

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4株虫生真菌对亚洲玉米螟致病力评价及其与松毛虫赤眼蜂的相容性

玉米科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:利用球孢白僵菌与赤眼蜂联合控制亚洲玉米螟已被证明具有较好的协同增效防治效果,但未见其他昆虫病原真菌与赤眼蜂共同施用下的相容性研究报道。本研究从田间采集的斜纹夜蛾幼虫僵虫中分离并鉴定出4株对亚洲玉米螟具有较高毒力的昆虫病原真菌菌株,分别为诺米曲霉(Aspergillus nomiae)、木贼镰孢(Fusarium equiseti)、莱氏绿僵菌(Metarhizium rileyi)和糙孢蓝状菌(Talaromyces trachyspermus),对亚洲玉米螟2龄幼虫半致死时间(LT50)分别为4.37、4.11、3.69和5.19 d。采用0.1%(w/v)的淀粉溶液作为吸附助剂可实现赤眼蜂单头蜂载菌量超过3.29万个孢子。进一步研究发现,这4种昆虫病原真菌对松毛虫赤眼蜂羽化及其对亚洲玉米螟虫卵寄生性无明显影响。

关键词: 玉米 亚洲玉米螟 昆虫病原真菌 赤眼蜂 生物防治

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"十三五"国家东华北春玉米区域试验品种抗病性评价

作物学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:病害是影响玉米生产的重要生物逆境,培育抗病品种是玉米病害防控最为经济、有效和环保的策略.本研究以我国"十三五"期间国家东华北春玉米区域试验(中早熟、中熟和中晚熟3个熟期组)中724份(次)参试品种的病害鉴定数据进行分析,病害包括玉米大斑病、丝黑穗病、禾谷镰孢茎腐病、灰斑病和禾谷镰孢穗腐病.结果表明,5种病害抗性级别以中抗和感病为主,中早熟、中熟和中晚熟组的这2个级别分别占总数的82.94%、84.12%和72.46%;中晚熟组抗性强于中熟和中早熟,中早熟、中熟和中晚熟组达到中抗(MR)以上的品种分别占总数的50.24%、56.37%和69.33%,其中,达高抗(HR)的分别占4.52%、4.41%和7.84%,达抗(R)的分别占8.73%、10.59%和18.88%;大斑病和灰斑病的抗原较为缺乏,均无高抗品种,中早熟组达到抗(R)以上水平的病害排序从高到低是禾谷镰孢茎腐病、丝黑穗病、禾谷镰孢穗腐病、灰斑病和大斑病,中熟组排序是禾谷镰孢穗腐病、禾谷镰孢茎腐病、丝黑穗病、灰斑病和大斑病,中晚熟组排序是禾谷镰孢穗腐病、禾谷镰孢茎腐病、丝黑穗病、大斑病和灰斑病;年际间鉴定结果受气候环境影响较大,2020年总体表现较差;中早熟、中熟和中晚组5种病害同时达到中抗(MR)以上的品种分别占2.78%、6.37%和15.67%,但最终仅有1个品种(承玉88)通过审定,说明高产抗病绿色玉米品种选育难度较大,建议设立抗病绿色玉米品种试验组别,强化抗病绿色玉米品种审定标识,有效快速推动绿色品种的选育与推广.本研究明确了近年来我国东华北春玉米试验品种的主要病害抗性水平,为今后品种选育、审定与推广提供参考依据,从而支撑我国玉米种业绿色发展.

关键词: 十三五 东华北 春玉米 品种 抗病性

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不同秸秆利用方式对黑土团聚体及其腐殖物质的影响

吉林农业大学学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为探讨秸秆的不同利用方式还田对黑土肥力的影响,通过5年田间试验,研究了黑土连续施用玉米秸秆、生物质炭和牛粪配施化肥对土壤团聚体及其腐殖物质组成的影响.结果表明:与无化肥和有机物料添加对照处理相比,单施化肥(NPK)、NPK+生物质炭(BC)、NPK+牛粪(CM)和NPK+秸秆(CS)处理显著促进了>0.25 mm大团聚体的形成;与NPK相比,NPK+BC、NPK+CM和NPK+CS处理均显著提高了土壤总有机碳、胡敏酸与胡敏素含量,也显著增加了大团聚体与微团聚体中有机碳以及胡敏酸与胡敏素含量.不同秸秆利用方式之间相比,施用生物质炭更有利于提高土壤总有机碳和胡敏素的积累,而秸秆直接还田处理更有利于土壤胡敏酸的形成.连续5年施用秸秆、秸秆生物质炭和牛粪的田间试验促进了 黑土良好结构的重建,从而提升土壤物理保护有机碳的潜力及有机碳的稳定性,同时也促进了土壤胡敏酸和胡敏素的积累,改善了 土壤有机质品质,提高了土壤肥力,实现了提升黑土肥力与固碳的协同效应.

关键词: 秸秆还田 生物质炭 土壤团聚体 腐殖物质

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双乾肉羊ATG5基因第1外显子多态性及与肉质性状的关联分析

中国畜牧杂志 2023 北大核心 CSCD

摘要:实验旨在探索双乾肉羊ATG5(Autophagy-Related Gene 5,ATG5)基因多态性与肉质性状的连锁关系。选取49只双乾肉羊为研究对象,采用Sanger测序法寻找ATG5基因第1外显子的突变位点,利用Haploview软件进行单倍型分析,通过SPSS软件分析不同ATG5基因单倍型组合与双乾肉羊肉质性状的相关性,筛选部分肉质性状对应的ATG5基因优势单倍型组合。双乾肉羊ATG5基因第1外显子共检测到G61T、A64G、T215C3个SNPs位点,3个位点的等位基因频率与基因型频率一致,在该群体中处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05),且属于中度多态(0.25<PIC<0.5)。3个SNPs位点组成的8种可能单倍型中仅表现为2种单倍型,分别命名为H1(GAT)、H2(TGC),单倍型频率分别为0.745、0.255。ATG5基因不同单倍型组合与肉质性状关联分析表明,H1H1组合的24 h、48 h的滴水损失分别极显著或显著高于H1H2组合,十七烷酸显著高于H2H2组合;H1H2组合的pH、十八碳烯酸显著低于或显著高于其他2种组合,蛋白质显著高于H1H1组合;H2H2组合的肉豆蔻酸和棕榈油酸显著低于其他2种组合,硬脂酸显著高于H1H2组合。

关键词: 双乾肉羊 ATG5基因 肉质性状 单核苷酸多态性 单倍型

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