科研产出
香蕉分化芽BBTVDAS-ELISA检测方法的建立和应用
《植物保护 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了解海南海口香蕉分化芽携带香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)的情况,本研究建立了双抗夹心酶联免疫反应(DAS-ELISA)检测法,对来自海南地区组培厂的香蕉分化芽进行检测。检测结果表明,6个品种1 852个香蕉分化芽平均带毒率为2.1%,其中‘皇帝蕉’为1.98%,‘粤科1号’为2.07%,‘广粉蕉’为1.98%,‘大蕉’为6.25%,‘218’为1.89%,‘巴西蕉’为2.25%。为了进一步验证ELISA结果的可靠性,随机选取12个阳性样品提取总DNA进行PCR鉴定。鉴定结果显示,12个样品中11个检测出有BBTV,表明DAS-ELISA方法的准确率较高,与分子检测结果基本一致,可以胜任日常香蕉组培苗BBTV的检测。
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富硒益生菌对罗非鱼幼鱼生长和抗氧化水平的影响
《动物营养学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究富硒益生菌对罗非鱼幼鱼生长及抗氧化水平的影响。试验选取600尾罗非鱼幼鱼,随机分为5组,每组设3个重复,每个重复随机放养初始体重为(12.40±0.13)g的罗非鱼幼鱼40尾。其中,对照组饲喂硒含量为0.257 mg/kg的基础饲料,其他4组分别饲喂在基础饲料中添加由富硒酵母菌、酵母菌、乳酸菌组成的富硒益生菌的试验饲料。4种试验饲料中富硒酵母菌的添加量折算为硒添加量分别为0(A组)、0.4(B组)、0.6(C组)、0.8 mg/kg(D组),乳酸菌的添加量均为3.04×105CFU/g,并通过调节酵母菌添加量使4种试验饲料中添加的总活菌数相同。试验期为70 d。结果表明:D组和C组分别在第50~60天和第60~70天阶段表现出最高的特定生长率,并均显著高于对照组(P<0.05)。C组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性在第30天和第50天均显著高于A组(P<0.05);对照组血清GPx活性在第60天显著低于其他各组(P<0.05)。在第30天,血清过氧化氢酶(CAT)活性以C组最高、A组最低,各组间均差异显著(P<0.05);对照组血清CAT活性在第60天显著低于A组、B组和C组(P<0.05)。C组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性在第30天和第50天显著高于其他各组(P<0.05)。各组罗非鱼的肝脏谷胱甘肽过氧化物酶1(G Px1)mRNA相对表达量均随饲养天数的延长呈现出上升态势,至第50天达到最高值后开始呈下降的趋势。在第50天,A组和C组的肝脏GPx1 mRNA的相对表达量显著高于其他各组(P<0.05),且以C组的值最高。由上述结果可知,在含硒0.257 mg/kg的基础饲料中添加0.6 mg/kg的富硒益生菌(以硒计)可促进罗非鱼幼鱼(体重12~55 g/尾)的生长,提高其抗氧化水平。
关键词： 富硒益生菌 罗非鱼 生长 GPx1 mRNA相对表达量 抗氧化水平
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菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用
《植物保护 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：菠萝凋萎相关病毒-1(Pineapple mealybug wilt associated virus-1,PMWaV-1)是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物,建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为y=-3.307×log x+38.18,相关系数r2为0.998。试验结果表明,该方法能特异性地检测PMWaV-1,对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应;最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1.98%,是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。
关键词： 菠萝凋萎相关病毒-1 TaqMan探针 实时荧光定量RT-PCR 检测
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一株感染家蚕的高致病性白僵菌的鉴定及在僵蚕生产中的应用
《蚕业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：僵蚕是传统中药材,筛选对家蚕具有高致病性的球孢白僵菌用于提高规模化生产僵蚕的产量和品质。从蚕区采集的僵蚕虫体分离纯化到一株高致病力的白僵菌,通过形态学鉴定和rRNA ITS序列系统发育分析,确定该菌株为球孢白僵菌(Beauveria bassiana),命名为Beauveria bassiana JC-1。优化该菌株应用于僵蚕生产中的接种菌液浓度为1×106~5×106mL-1,用此浓度的菌液喷洒接种5龄起蚕后5~6 d,幼虫大量死亡,僵化率达90%以上,万头蚕可生产僵蚕约5 kg。利用该菌株感染家蚕收获所得僵蚕的各项质量指标均符合《中国药典》中的有关标准,且僵蚕的总灰分和酸不溶性灰分含量较市售僵蚕更低。初步认为该菌株在僵蚕的标准化、规模化生产中具有应用价值。
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连续化生产线加工过程中客家炒青绿茶主要品质成分的变化
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为研究连续化生产线加工过程中客家炒青绿茶品质成分的变化,以金萱茶树品种为原料,通过实时3次重复取样的方法,对连续化生产线加工过程中7个工序客家炒青绿茶主要品质成分的变化进行测定和比较分析。结果表明,在连续化生产线加工过程中,从鲜叶、萎凋、杀青、揉捻、动态失水、一炒到二炒,客家炒青绿茶的主要品质成分发生了显著变化,表现为茶多酚、游离氨基酸、可溶性糖、咖啡碱和非酯型儿茶素含量总体呈下降趋势;儿茶素总量和酯型儿茶素含量呈增加趋势。利用该生产线生产的清香型客家炒青绿茶具有与手工制作产品同样的品质特征。萎凋、杀青和一炒是连续化加工7个工序中茶叶主要品质成分发生最显著变化的工序,科学控制好萎凋、杀青和一炒工序,对于提高连续化生产线加工清香型客家炒青绿茶品质具有重要意义。
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一种快速提取香蕉叶片总核酸、总RNA和总DNA的新方法
《热带作物学报 》 2014 CSCD
摘要：在SDS法的基础上,以富含多糖、多酚等次生代谢物质的香蕉叶片为材料,通过选择性添加适量5 mol/L KAc(pH4.8)或不同体积无水乙醇分别提取香蕉叶片总核酸、总RNA(不含DNA)和总DNA(不含RNA)。结果表明:不添加KAc的可提取到总核酸;添加1/3体积和2/3体积的KAc得到总RNA,添加1/3体积无水乙醇处理得到总DNA。该结果获得一种简单、快速,能在1次实验中添加不同试剂提取香蕉叶片总核酸、总RNA和总DNA的新方法。
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木薯SYP基因的序列特征及表达分析
《植物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：植物突触融合蛋白(SYP)是一类与植物细胞内囊泡介导转运有关的蛋白。部分SYP基因与植物对生物和非生物胁迫的响应有关。该文利用生物信息学工具分析了木薯(Manihot esculenta)SYP基因及其蛋白结构、核苷酸多态性和系统进化关系,并利用RT-PCR技术检测了木薯不同组织中SYP基因的表达。结果表明,木薯SYP基因及其蛋白结构均具有明显的规律性和家族成员间的保守性;SYP基因的cDNA在基因间以及不同品种间具高度一致性,核苷酸变异以同义替换为主。进化分析表明,植物SYP基因可分为2个亚家族,木薯SYP基因倾向于与蓖麻(Ricinus communis)SYP基因聚在进化树同一分支的末端。半定量RT-PCR分析表明,5个木薯SYP家族成员具有组织特异性。上述研究结果为木薯SYP基因功能研究和功能单核苷酸标记的开发奠定了重要基础。
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基于EST-SSR标记的甘薯种质资源DNA指纹图谱构建
《植物遗传资源学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用EST-SSR标记构建了国家种质广州甘薯圃中52份甘薯种质资源的DNA指纹图谱。利用52份供试资源,从早期筛选出的342对候选多态性引物中筛选出16对核心引物,16对引物在52份资源中共扩增出159个等位位点,每对引物的等位位点数为5~19个不等,平均为9.94个,多态性信息含量变化范围为0.6235~0.9593,平均为0.7991。选择带型清晰、重复性好、易于统计且能将52份资源完全区分开的2对引物组合构建供试资源的DNA指纹图谱。NTSYS软件聚类分析表明,EST-SSR标记能正确反映出不同资源间的亲缘关系,为构建甘薯大型DNA指纹图谱数据库奠定了基础。
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饲粮胆碱水平对绍兴鸭脂质代谢的影响
《畜牧兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮不同胆碱水平对绍兴鸭脂质代谢的影响,并探究产蛋鸭最佳的日粮胆碱水平。采用单因子随机分组试验设计,在玉米-豆粕型基础饲粮中分别添加5个胆碱水平(0、250、500、750、1 000mg·kg-1),探讨饲粮中添加不同水平胆碱对绍兴鸭脂质代谢的影响。试验选用刚进入产蛋期的绍兴鸭540只,分为5组,每组6个重复,每重复18只,饲养20周。结果表明:1)与对照组相比,饲粮添加胆碱显著降低了试验鸭肝和胸肌中粗脂肪和胆固醇的含量(P<0.05),各组间肝体比和胸体比无显著差异(P>0.05)。2)随着饲粮胆碱水平的提高蛋中胆固醇的含量显著降低(P<0.05),粗脂肪含量显著升高(P<0.05)。3)饲粮添加胆碱显著降低了试验鸭肝和胸肌中饱和脂肪酸(SFA)的比例(P<0.01),显著升高了试验鸭肝和胸肌中单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)的比例(P<0.01)。4)饲粮不同胆碱水平对绍兴鸭血浆中胆碱(Ch)含量、脂肪酶活力(LPS)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、甘油三酯(TG)、血清磷脂(PL)、游离脂肪酸(NEFA)、总胆固醇含量(T-CHO)、碱性磷酸酶活性(AKP)没有显著影响。由此可知,基础饲粮中添加一定量的胆碱可降低蛋鸭肝和胸肌中胆固醇和粗脂肪的含量,降低蛋中胆固醇的含量,影响肝和胸肌中不同脂肪酸的比例。
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