科研产出
双孢蘑菇分解基质能力退化的DDRT-PCR分析
《菌物学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：对4种不同液体培养基培养的双孢蘑菇Agaricus bisporus CGMCC No.0214及其分解基质能力退化菌株0214-3、0214-5进行了24对引物组合的mRNA差异显示(DDRT-PCR)分析,结果发现8对引物组合扩增出可重复的差异,并克隆了9条差异片段。序列分析结果显示9条差异片段代表了5个基因的差异,它们与不同生物的ATP结合盒式运输亚家族A某蛋白、碳水化合物酯酶家族4蛋白、几丁质脱乙酰基酶、乙酰木聚糖酯酶II及其他一些未知蛋白具有较高的同源性。本研究结果为进一步进行双孢蘑菇分解基质能力退化的分子机理研究奠定了良好的基础。
关键词： 食用菌 mRNA 差异DNA片段 克隆 多糖类基质
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创伤弧菌FJ03-X2株培养条件的优化研究
《中国人兽共患病学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：目的探讨创伤弧菌毒株FJ03-X2的优化培养。方法以创伤弧菌毒株FJ03-X2进行实验,研究摇瓶培养温度、接种量、培养基、初始pH值、溶解氧等因素对菌株生长的影响,确定最适培养条件为:TSB培养基初始pH值为7.0,适宜接种量10%,培养温度28℃,装液量25mL/250mL,转速180r/min。培养菌数可达8×109cfu/mL,生物量为25mg/mL。以TSB为基础培养基,采用单因子和正交实验相结合的方法,确定最佳培养基主要成份为:葡萄糖0.2%、胰蛋白胨1.8%、大豆胨0.4%和玉米浆0.4%。以最佳培养基配方给菌体提供营养,在最适培养条件下培养,可以使培养液中的细菌生物量高达50mg/mL以上。结果得出创伤弧菌FJ03-X2的优化培养条件和培养基配方。结论国内首次优化鳗源创伤弧菌培养条件,并给出相关依据。
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变异型猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立与初步应用
《中国兽医学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：参照GenBank的变异型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与普通PRRSV的Nsp2段基因序列,设计并合成1对引物和TaqMan探针。通过对反应条件优化,标准质粒构建,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR诊断变异型PRRSV方法。结果表明,该方法具有特异性强,敏感性高等特点,能够检测出264个拷贝数的标准质粒品,0.562 3TICD50的病毒量,比RT-PCR敏感10倍。对22份病料样品进行检测,结果有8份为阳性,阳性率为36.4%。由于该方法具有定量、快速、准确、敏感等优点,适用于对猪群感染变异型猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)早、中、晚期的诊断,对有效诊断及防治高致病性PRRS的发生起到重要作用。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 TaqMan 荧光定量PCR
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鸭圆环病毒PT07基因组序列测定与分析
《中国预防兽医学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：本研究采用PCR方法从临床健康的番鸭法氏囊组织中分段扩增获得鸭圆环病毒(DuCV)PT07全长基因组,将扩增片段分别克隆,获得重组质粒,测序结果表明,DuCV基因组全长为1988nt。经基因组结构分析发现,DuCVPT07的基因组有3个开放阅读框(ORF),其中V1/rep和C1/cap是2个主要的ORF,分别编码Rep蛋白和Cap蛋白;在V1/rep和C1/cap的5'起始端之间存在与启动滚环复制有关的1个茎环结构和1个正向重复序列。遗传进化分析发现,DuCV可分为2个群,PT07与TC1/2002～TC4/2002和FJ0604同处一个进化分支,而与Ger、33753-52和MH25关系较远。
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柑橘果园凋落物量及凋落叶的分解特征
《生态与农村环境学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：对福州郊区7年生柑橘果园生态系统凋落物的发生及凋落物叶分解特征进行观测研究。结果表明,柑橘果园年凋落物总量为1 682.48 kg.hm-2,其中以叶凋落量最大,占58.97%;凋落物的发生呈现不规则的月变化,以3月和7月凋落物量最大;柑橘果园凋落物年碳、氮归还量分别为704.56、43.72 kg.hm-2。凋落物叶分解过程呈现先快后慢的规律,经过1 a分解后,凋落物叶分解残留率为21.50%,凋落物叶分解95%所需时间为1.83 a。
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酶动力学方法在黄曲条跳甲抗性监测中的应用
《中国农学通报 》 2010 北大核心
摘要：利用酶标仪动力学方法测定4个菜区黄曲条跳甲的总酯酶、乙酰胆碱酯酶活性分布频率,并与浸叶法测定的药剂敏感性进行比较分析,结果表明利用酶标动力学方法能够快速测定黄曲条跳甲总酯酶、乙酰胆碱酯酶活性在不同活性区段的频率分布,通过分析总酯酶活性大于3.2D(450nm)/(min·insect)、乙酰胆碱酯酶活性小于0.016D(405nm)/(min·insect)的个体数可以快速监测黄曲条跳甲田间种群的药剂敏感性水平高低。
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变异猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR检测方法的建立
《中国农学通报 》 2010 北大核心
摘要：根据GenBank已发表及笔者所在研究室分离鉴定的变异猪繁殖与呼吸综合征病毒的NSP2基因序列,设计并合成了一对引物,建立了一种鉴别PRRSV的RT-PCR检测方法。结果表明:该方法扩增变异PRRSV基因组时可获得217bp的片段,扩增普通PRRSV时则获得307bp的片段,同条件扩增猪瘟病毒(CSFV)、圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、伪狂犬病病毒(PRV)均为阴性;该体系可检测到2.6pg的PRRS病毒核酸,具有较高敏感性。对2007—2008年送检的40份临床样品进行检测,结果检出12份为变异PRRSV,其阳性率为30.0%。研究结果表明,建立的RT-PCR鉴别变异PRRSV方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点,适用于对猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴别诊断。
关键词： 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 RT-PCR 建立
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余甘子SRAP反应体系的优化
《中国农学通报 》 2010 北大核心
摘要：为建立余甘子SRAP-PCR反应的最优体系,通过正交设计和单因素试验调整优化PCR反应各因素(模板DNA、Mg~(2+)、dNTPs、引物)。结果表明,各因素对扩增结果均有不同的影响。采用50ng模板DNA,2.0mmol/L Mg~(2+),0.4 mmol/L dNTPs,0.2 μmol/L引物的20μL反应体系可扩增出最清晰丰富的多样性条带。使用该优化体系检测12份余甘子种质资源样品,结果稳定可信,适用于分子遗传学研究。
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螺旋粉虱产卵行为及产卵分泌物的形态和化学成分
《昆虫学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：螺旋粉虱Aleurodicus dispersus Russell具独特的产卵过程——成虫将卵产在叶片上排列成螺旋状并覆盖丝状蜡泌物。本研究利用数码摄像机拍摄记录螺旋粉虱的产卵过程,并采用体视显微镜、扫描电镜及气相色谱/质谱联用研究产卵分泌物的结构和化学成分。结果表明:单头雌成虫产卵时可形成典型螺旋轨迹,当其他雌成虫加入产卵时,其产卵行为包括跨越螺旋轨迹后继续在外围扩大螺旋圈、仅在螺旋轨迹表面穿过及在螺旋轨迹外围直接产卵3种情况。在体视镜及扫描电镜下产卵分泌物呈交错的白色丝状结构。另用GC/MS联用仪检测发现产卵分泌物主要是一些饱和长链烃(66.21%)和芳香酯类(26%),同时有少量酸和酚。其中烃类化合物含有3种碘代物(10.64%),其他为直链烃类,碳原子数介于C8～C30;芳香酯类化合物有3种,碳原子数介于C16～C24,其中含量最大的是邻苯二甲酸二丁酯(21.19%)。最后讨论了产卵分泌物在吸引初孵爬虫、抵御天敌及阻碍其他植食性者进入螺旋圈的可能性。
关键词： 螺旋粉虱 产卵行为 产卵分泌物 形态结构 化学成分
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