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鹅星状病毒和鹅坦布苏病毒双重nano-PCR检测方法的建立及初步应用

中国兽医科学 2022 北大核心 CSCD

摘要:为快速鉴别诊断鹅星状病毒(GoAstV)和鹅坦布苏病毒(TMUV),本研究根据GenBank上公布的GoAstV和TMUV基因保守区设计了 2对特异性引物,结合金纳米材料,通过对反应条件的优化,建立了一种可同时检测这两种病毒的双重nano-PCR诊断方法.结果显示,该方法对鹅细小病毒(GPV)、鹅圆环病毒(GoCV)、新城疫病毒(NDV)和禽腺病毒(FAdV)这4种鹅常见病毒的扩增结果均为阴性.该方法对GoAstV和TMUV的最低检测浓度分别为1.21×101 copies/μL和1.21×103 copies/μL,敏感性较普通PCR分别高100倍和10倍.对42份临床样品的检测结果显示,共检出GoAstV 13份,TMUV 1份.上述结果表明,本研究建立的双重nano-PCR方法快速、特异、敏感,可用于鹅星状病毒和鹅坦布苏病毒的临床检测和流行病学调查.

关键词: 鹅星状病毒 鹅坦布苏病毒 双重nano-PCR

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不同耕作措施对土壤质构和玉米产量的影响

玉米科学 2022 北大核心 CSCD

摘要:通过4年定位试验,研究不同耕作措施对黑钙土区耕地土壤结构和质量以及玉米产量的影响。结果表明,播种前,和常规旋耕(CK)相比,深松旋耕(DP)、秸秆覆盖还田+深松(DSM)和秸秆深翻还田(PS)使土壤容重降低5.22%~11.19%,孔隙度增加5.09%~11.45%;DP、DSM处理土壤含水率分别提高14.99%和18.58%;DSM处理下>5 mm的团粒量与CK差异不显著,DP和PS处理使>5 mm的团粒比例降低,2~1 mm、1~0.5 mm和0.5~0.25 mm团粒比例升高。收获期,DSM、PS和DP处理的有机质含量较CK分别增加3.92、3.03和2.47 g/kg,DSM、PS和DP处理均能提高各时期土壤全量和速效养分含量,最终使玉米增产3.2%、6.8%和1.3%。从综合效应来看,秸秆覆盖还田+深松是黑钙土区更为适宜的耕作措施。

关键词: 玉米 耕作措施 黑钙土 土壤结构 土壤质量 产量

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苜蓿花叶病毒RT-PCR和RT-qPCR检测技术体系的建立与应用

植物保护学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为准确检测侵染马铃薯核心种苗和种薯的苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV),以AMV马铃薯分离株为阳性材料,建立AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和基于EvaGreen及TaqMan探针的反转录实时荧光定量PCR(reverse transcription real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR)检测技术,比较3种方法的检测灵敏度,并测定不同马铃薯品种6种组织和桃蚜Myzus persicae、蓟马体内AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量。结果表明:建立的TaqMan探针RT-qPCR法对RNA 1和RNA 2的检测灵敏度分别为1.45×101copies/μL和1.46×101copies/μL,分别是EvaGreen RT-qPCR法和RT-PCR法的10倍;建立的TaqMan探针RT-qPCR法对RNA 3的检测灵敏度与EvaGreen RT-qPCR法相同,为1.15×102copies/μL,是RT-PCR法的10倍。丽薯15号6种组织中AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量为3.04×106~1.67×108copies/μL,以叶片中病毒平均含量最高;中薯21号6种组织中AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量为2.94×10~2~4.78×108copies/μL,未发现明显分布规律。蓟马体内AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量分别为8.64×104~4.76×10~7、2.13×103~1.50×10~5和8.08×10~3~4.96×105copies/μL,RNA 1的含量高于RNA 2和RNA 3。桃蚜体内AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量分别为4.71×103~3.44×104、2.22×102~1.32×105和5.41×101~8.08×102copies/μL,RNA 3的含量最低。表明RT-PCR法、TaqMan探针RT-qPCR法和EvaGreen RT-qPCR法均可有效扩增马铃薯6种组织和2种昆虫中的AMV。

关键词: 苜蓿花叶病毒 TaqMan探针RT-qPCR EvaGreen RT-qPCR RT-PCR 马铃薯

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小豆根系对水分胁迫的生理响应及S3307的缓解效应

中国农业科技导报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为探究幼苗期淹水胁迫及喷施烯效唑(S3307)对小豆(Vigna angularis)根系生理代谢和产量的影响,以龙小豆4号和天津红为材料,盆栽条件下,苗期预喷施S3307,然后进行连续淹水5 d处理,测定淹水后小豆根系活性氧物质的积累、膜脂过氧化程度、抗氧化酶活性及小豆产量。结果表明,幼苗期淹水胁迫引起小豆根系H2O2和丙二醛(malonaldehyde,MDA)、脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量显著提高,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性显著提高;淹水胁迫3~5 d导致龙小豆4号单盆产量显著降低4.77%~8.40%,天津红单盆产量显著降低5.59%~9.91%。喷施S3307具有抵御淹水胁迫的作用,能有效增加小豆根系脯氨酸和可溶性糖含量,显著降低H2O2和MDA含量,显著提高SOD、POD和CAT活性并降低SOD/CAT比值。喷施S3307使淹水4 d的龙小豆4号产量显著提高2.85%,使天津红产量显著提高5.29%。综上,淹水胁迫下,不同品种小豆根系在活性氧物质积累、膜质过氧化、抗氧化酶活性以及渗透调节等方面的生理响应存在显著差异;喷施S3307能够有效缓解淹水胁迫对小豆生理和产量的影响,为进一步研究小豆苗期抵御淹水胁迫的生理机制及提高淹水胁迫下小豆产量提供理论依据。

关键词: S3307 小豆 淹水胁迫 根系生理 产量

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极早熟超强适应性大豆黑科56号选育及遗传组成

植物遗传资源学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:黑科56号系黑龙江省农业科学院黑河分院以黑河33号为母本、黑河34号为父本,经有性杂交,系谱法选育而成。在适应区出苗至成熟105~110 d,需≥10℃活动有效积温2030~2100℃。亚有限结荚习性,株高69.6~75.0 cm,有分枝,白花,尖叶,灰色茸毛,荚镰刀形,成熟时呈褐色。籽粒圆形,种皮黄色,种脐浅黄色,有光泽,百粒重16.5~19.0 g。5年品质平均:蛋白质含量38.80%~43.05%,脂肪含量18.18%~19.69%。经过两级审定机构抗病鉴定,灰斑病为2级,抗(R),病毒病为3级,中抗(MR)。适合黑龙江省第五积温带下限及第六积温带上限种植。通过遗传系谱分析,黑科56号细胞质基因来源于克山白眉,通过育种第3轮到育种12轮共经历了9个传递过程,细胞质遗传物质通过克山白眉→紫花四号→丰收1号→黑河54→黑河4号→黑交7710→黑河9号→黑河18→黑河33号→黑科56号完成100%遗传传递。黑科56号细胞核遗传追溯到14份祖先亲本,具有丰富的遗传基础,其核基因来自2份国外优异种质,7份东北地区的骨干地方品种,4份地方育成品系,1份野生大豆。祖先亲本贡献率从高到低依次:北92-28(25.00%)、十胜长叶(15.63%)、黑交83-1345(12.5%)、尤比列(7.81%)、黑河51(L)(6.25%)、蓑衣岭(4.69%)、克山白眉(4.30%)、克山四粒荚(3.91%)、四粒黄(3.71%)、金元(3.71%)、黑河野生豆3-A(3.13%)、黑交75-861(3.13%)、黑龙江41(3.13%)、长叶1号(3.13%),广泛的遗传基础为黑科56号的高产稳产、优质、抗逆、超强广适奠定遗传基础。

关键词: 黑科56号 选育 遗传组成

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诱变育种技术在大豆育种与基因挖掘中的应用现状及展望

大豆科学 2022 北大核心 CSCD

摘要:植物诱变育种能够创造许多优异变异资源,诱变获得的突变体可以作为种质材料,为大豆新品种培育提供丰富的资源;构建的突变体库也有助于大豆功能基因组研究的开展,可为特定性状的研究提供遗传材料。本文介绍诱变育种技术在大豆生长特性、品质和抗性改良育种中的应用,分析利用诱变突变体库进行大豆生长特性、品质性状改良和抗性相关基因挖掘的研究进展,介绍诱变技术与其他生物技术相结合发掘目的基因的应用现状,并展望今后大豆诱变育种技术在基因挖掘方面的应用前景,以期能更好地运用诱变育种技术推动大豆遗传研究和品种选育。

关键词: 大豆 诱变 育种 基因挖掘 生物技术

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清肺颗粒的急性毒性和亚慢性毒性试验

动物医学进展 2022 北大核心 CSCD

摘要:通过小鼠急性毒性试验和大鼠亚慢性毒性试验对清肺颗粒进行安全性评价,为临床安全用药提供理论依据.给82只昆明小鼠灌胃给药进行半数致死量试验和最大给药量试验;将40只大鼠分为高、中、低剂量中药组和对照组进行灌胃给药,每天给药1次,连续给药35 d,灌胃结束后测定大鼠的一般情况、血液指标、生化指标、脏器系数和病理组织学变化.试验显示,小鼠急性毒性试验中未能测出半数致死量,最大给药剂量为每千克体重75 g时小鼠未出现死亡情况;大鼠亚慢性毒性试验中各剂量组清肺颗粒对大鼠的一般情况无影响,血液检查、生化指标和脏器系数也均在正常范围内,与对照组差异不显著(P>0.05),病理组织学检查显示试验组和对照组也未见显著差异.研究表明,清肺颗粒的安全性高,无毒性作用,合理使用时可应用于兽医临床.

关键词: 清肺颗粒 急性毒性试验 亚慢性毒性试验

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高产优质小麦新品种-龙麦81

麦类作物学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:龙麦81是由黑龙江省农业科学院作物资源研究所小麦研究室2009年根据亲本互补原则配置杂交组合克02-850/AMAZON//龙麦33, F1~F6代的选择采用生态派生系谱法,并于2015年获得稳定品系,代号为龙15-5233。2016-2017年参加所内产量比较试验及黑龙江各生态区异地鉴定试验,2018-2020年参加黑龙江省区域试验和生产试验,参试品种名称为龙麦81。于2021年3月通过黑龙江省农作物品种委员会审定,

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留胚米脂质稳定化及其贮藏关键技术研究进展

食品科学 2022 EI 北大核心 CSCD

摘要:留胚米具有营养全面和蒸煮方便等优点,但其在保质期内表现出的脂肪酸值升高、陈化气味明显等质量问题严重限制了留胚米制品的流通和推广。留胚米品质劣变的主要原因在于稻米碾磨后其表层脂质迅速发生难以控制的水解与氧化,且现有抛光、钝酶及包装等加工技术均不能使留胚米制品达到正常流通要求。为解决留胚米类产品的生产难题,本文在对稻米中脂质稳定性进行系统阐述的基础上,分别对不同加工和胁迫条件对稻米脂质稳定性的影响进行分析,最后对稻米中脂质氧化与其自身抗氧化系统的协同作用进行了综合评价,旨在为进一步开展留胚米品质劣变机理相关研究提供理论参考,为探索切实可行的留胚米安全贮藏技术提供新思路。

关键词: 留胚米 贮藏 脂质劣变 抗氧化体系

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猪嵌合RNA BCL2L2CR克隆与功能初步分析

东北农业大学学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:研究前期鉴定一个嵌合子标签——BCL2L2CR,含有B细胞淋巴瘤/白血病-2样蛋白2(B-cell CLL/lymphoma 2 like protein 2,BCL2L2)重复序列,为分析BCL2L2CR作用,利用RT-PCR方法克隆其cDNA序列,采用流式细胞术、过表达、CCK-8和细胞划痕试验等分子生物学技术分析其对细胞凋亡、增殖和迁移的影响.发现BCL2L2CR是BCL2L2外显子3部分序列发生顺式重复形成,前141个氨基酸与BCL2L2完全相同,含有BCL2同源结构域4、3和1,缺少同源结构域2;BCL2L2CR促进PK-15和3T3L细胞增殖和迁移.研究结果确定嵌合RNA BCL2L2CR具有一定功能,将为深入揭示BCL2L2CR功能提供基础,有助于进一步认识嵌合RNAs及其在正常生理活动中的作用.

关键词: 嵌合RNA BCL2L2 克隆 细胞增殖 细胞迁移

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