稻曲病菌cDNA文库的构建

张震; 王教瑜; 杜新法; 柴荣耀; 毛雪琴; 邱海萍; 孙国昌; 《植物病理学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：以稻曲病菌菌丝和薄壁分生孢子提取的总RNA为起始模板,利用SMART cDNA library construction kit构建稻曲病菌cDNA文库,并分析文库质量。结果显示,未扩增文库滴度9.03×106pfu/mL,重组率为99.5%,扩增后文库滴度达5.52×109pfu/mL。随机挑取10个噬菌斑转化成质粒,SfiⅠ酶切显示插入片段长度在400~2000bp之间;经测序得到10条表达序列标签(EST),GenBank数据库相似性联配结果显示6条EST具有同源序列。其中,克隆R2为乙酰胺酶同源物编码蛋白。

关键词： 稻曲病菌 cDNA文库 文库构建

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AFLP分子标记技术在浙蒲2号种子纯度快速鉴定中的应用

王玲平; 戴丹丽; 吴晓花; 汪宝根; 李国景; 《浙江农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：以瓠瓜杂种一代浙蒲2号及其父、母本和品系J099为材料,建立了利用AFLP分子标记技术进行瓠瓜杂种纯度鉴定技术体系。从64对引物组合中筛选出了两对稳定扩增、多态性好、分辨率高的引物组合E-ACC/M-CTA和E-ACC/M-CTT,可有效区分父、母本和杂种一代,适宜用于浙蒲2号种子纯度快速鉴定。

关键词： 瓠瓜 杂交种 AFLP 纯度鉴定

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激发标签技术在植物功能基因组研究中的应用

李志邈; 杨悦俭; 王荣青; 周国治; 阮美颖; 叶青静; 姚祝平; 《遗传 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：获得突变体是研究植物功能基因组的有效方法。与传统的T-DNA插入功能缺失突变相比,建立在功能获得突变基础之上的激发标签技术具有独特的优势,主要表现为可以获得功能冗余基因的显性突变体并方便地克隆相关基因。文章对激发标签技术的原理,及其在拟南芥、水稻等植物功能基因组研究中的进展进行了综述,并介绍了激发标签技术在植物抗逆、抗病和生长发育机理研究方面的新进展。文章最后探讨了激发标签技术的发展前景。

关键词： 激发标签 功能获得突变 植物功能基因组

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能量对香石竹切花在瓶插期间呼吸电子途径的影响

宋丽丽; 蒋跃明; 李长涛; 刘海; 尤艳莉; 易春; 徐志防; 《热带亚热带植物学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：采用外加0.1mmol/L ATP或0.5mmol/L二硝基苯酚(DNP)的方法,研究了香石竹(Dianthus caryophyllus L.)切花在25±1℃和80%~90%相对湿度下瓶插期间呼吸电子传递途径的变化情况。结果表明,香石竹切花在瓶插7d时的呼吸速率达到高峰;ATP处理明显加快切花的呼吸速率,在瓶插7d时呼吸速率高峰值较对照(未用ATP处理)升高1倍。细胞色素途径与总呼吸活性存在显著正相关。细胞色素途径占总呼吸的比重在切花瓶插4d后上升,并且线粒体电子传递主要依靠细胞色素主路途径进行。经ATP处理后香石竹切花的交替呼吸途径的容量、实际运行活性和运行系数明显增加;交替呼吸途径占总呼吸活性比重在瓶插4d后迅速上升,并且交替呼吸途径容量与总呼吸活性存在显著正相关。而DNP处理则降低交替呼吸途径容量。这说明外源ATP处理加强了香石竹切花在整个瓶插期间的呼吸作用,增加了呼吸速率的高峰值,提高了抗氰呼吸作用。

关键词： 能量 香石竹 切花 瓶插 呼吸途径

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黄鳍鲷骨骼肌伴肌动蛋白的纯化及其抗体制备

杜雪莉; 周利亘; 王锡昌; 熊何健; 苏文金; 曹敏杰; 《水产学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：采用Sephacryl S-400凝胶过滤柱层析和电洗脱等纯化方法,首次从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化到伴肌动蛋白,并制备了特异性多克隆抗体。多克隆抗体经Protein A-Sepharose亲和层析柱纯化得到高纯度免疫球蛋白G(IgG)。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫斑点印迹(Dot-Blot)和免疫印迹(Western-Blot)等方法对纯化的伴肌动蛋白及其多克隆抗体进行分析鉴定,并研究了不同贮藏条件下伴肌动蛋白的变化情况。SDS-PAGE结果显示本研究从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化了高纯度伴肌动蛋白;Dot-Blot检测结果显示兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体效价为5×104;Western-blot检测表明兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体能与肌原纤维蛋白中的伴肌动蛋白发生特异性反应,而与其它蛋白不发生免疫交叉反应。

关键词： 黄鳍鲷 伴肌动蛋白 纯化 抗体

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浙江马尾松毛虫不同地理种群间基因差异的ISSR分析

翁宏飚; 牛宝龙; 何丽华; 蒋平; 孟智启; 《林业科学 》 2008 北大核心 CSCD

关键词： 马尾松毛虫 ISSR 遗传差异 多态性

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微卫星标记及其在家畜育种中的应用

刘玮孟; 张静; 卢立志; 任晋东; 陶争荣; 《浙江农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：分子遗传标记是近年来现代遗传学发展最快的领域之一。文章系统论述了微卫星标记的功能及其产生的机理、研究概况及其在动物育种中的应用,并针对目前的研究现状及存在的问题,探讨了今后的研究趋向和发展前景。

关键词： 分子标记 动物育种 SSR

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ACC脱氨酶活性菌株的筛选、鉴定及其对茄子耐盐性的影响

刘琛; 赵宇华; 傅庆林; 杨丽; 贾小明; 《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：从浙江上虞海涂土样中分离、筛选到1株具有1-氨基环丙烷1-羧酸(ACC)脱氨酶活性的菌株DW1.根据生理生化特征、16SrDNA序列分析、(G+C)mol%测定,菌株DW1被鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.DW1).研究该菌株对茄子耐盐性的影响,结果表明:用菌株DW1处理可以提高种子的发芽势及芽长;在茄苗盆栽实验中,经DW1菌液处理的种子,在高盐浓度下茄苗的鲜重与对照相比有显著提高,同时Ca2+含量有所增加而Na+含量则有所下降,其茄苗的长势明显优于对照.说明用具有ACC脱氨酶活性的菌株DW1处理可以有效地提高茄苗的耐盐性.

关键词： ACC脱氨酶 盐胁迫 茄子 海涂

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甘蓝型油菜及近缘种中异质型ACCase亚基accD编码基因的克隆及序列分析

王伏林; 吴关庭; 郎春秀; 刘仁虎; 陈锦清; 《农业生物技术学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：采用RT-PCR方法,以甘蓝型油菜(Brassica napus)、甘蓝(B.oleracea)、芥菜型油菜(B.juncea)和白菜型油菜(B.rapa)的幼嫩叶片cDNA为模板对异质型乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的β-CT亚基(羧基转移酶)的accD编码基因进行扩增,得到长度分别为1470、1470、1464和1464 bp的编码序列,分别可编码489、489、487和487个氨基酸的蛋白质。白菜型油菜、芥菜型油菜和甘蓝的accD序列Genbank登录号分别为EU410075、EU410076和EU410077。序列分析表明,来自4个油菜近缘种的accD基因高度同源,编码的蛋白质都具有相似的锌指结构和C-末端5个相同的基元,其中基元Ⅰ(GSMGSVVG)和基元Ⅱ(PLIIVCASGGARMQE)在所有植物及大肠杆菌(Escherichia coli)的β-CT亚基中普遍存在。Southern杂交显示该基因在甘蓝型油菜及其近缘种的基因组中呈单拷贝。

关键词： 甘蓝型油菜 近缘种 乙酰辅酶A羧化酶(ACCase) accD基因 克隆

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紫花苜蓿耐逆诱变和转基因研究进展

黄新; 叶红霞; 舒小丽; 吴殿星; 《核农学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：本文简述了紫花苜蓿耐逆性状遗传基础研究,并综述了利用生物技术和诱变技术改良紫花苜蓿耐逆性的研究进展,旨在为紫花苜蓿的耐逆育种提供参考。

关键词： 紫花苜蓿 诱变 转基因 耐逆

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