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蟹源易损气单胞菌气溶素基因的克隆及其PCR检测

浙江农业学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:利用设计的特异引物,采用PCR技术,对蟹源致病性易损气单胞菌气溶素基因(aer)进了克隆和序列分析,从其基因组中克隆出长为622 bp的基因片断,用限制性内切酶BamHI对扩增产物进行酶切,产生长约570 bp和50 bp两条片断;研究还利用设计的特异引物,对蟹源致病性易损气单胞菌进行PCR快速分子鉴定的研究。

关键词: 易损气单胞菌 气溶素 基因 PCR

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不同类型蔬菜重金属(Pb,As,Cd,Hg)积累量的比较

浙江农业学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:本研究采用盆栽的方法,以不同重金属(Pb,As,Cd,Hg)含量的土壤种植瓜类、叶菜类、茄果类、根茎类蔬菜中的9个浙江省主栽蔬菜品种,于采收期检测各蔬菜食用部分的重金属积累量。结果表明:不同类型蔬菜对重金属的积累量与土壤重金属含量呈显著正相关;瓜类为重金属低积累型蔬菜,其食用部分重金属含量在土壤Pb,As,Cd,Hg浓度分别为919.600,96.800,0.985,1.970 mg/kg的条件下均未超标(GB18406.1-2001);供试各蔬菜可食用部分均对Hg低积累,Hg含量均在标准(GB18406.1-2001)安全食用范围内。

关键词: 重金属 蔬菜类型 积累量

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H9N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆表达及反应原性分析

中国农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:【目的】对H9N2亚型猪流感病毒NS1(nonstructural protein1)基因进行原核表达,获得纯化表达产物,以期为检测猪流感抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增了猪流感病毒(H9N2)的NS1基因,将其克隆于表达载体pET-28a(+)上构建成重组质粒pET-NS1,转化受体菌E.coliBL21-DE3感受态细胞,经酶切鉴定及序列分析,筛选出正确重组质粒转化子。【结果】经终浓度5mmol·L-1乳糖诱导,SDS-PAGE电泳结果显示,重组蛋白NS1得到大量表达,分子质量约为26kD。经Western-blotting分析,表达蛋白能与阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应;ELISA检测显示,在被检血清稀释1280倍时,阳性血清的OD650值大约是阴性血清的3倍,差异明显。【结论】重组蛋白NS1表达量高,易于纯化并且具有良好的血清学反应的特异性。

关键词: 猪流感病毒 NS1基因 反应原性

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转基因油菜“超油1号”昆虫的生物多样性初步研究

生物技术通报 2008 北大核心 CSCD

摘要:包括转基因油菜"超油1号"、受体油菜"浙优油1号"、非受体油菜"浙双72"等3个油菜品种的随机区组田间试验显示,蚜虫、潜叶蝇、菜青虫、小菜蛾、瓢虫、蜘蛛、蜜蜂等7种油菜主要昆虫的发生情况,转基因油菜与其受体油菜均无显著性差异;转基因油菜与其非受体油菜,蚜虫以前者为多,潜叶蝇、菜青虫、小菜蛾、瓢虫、蜘蛛、蜜蜂等6种昆虫则无显著性差异。初步结果表明转基因油菜转入基因不影响油菜上主要昆虫的多样性,转基因油菜通过改变其非靶标生物的多样性从而导致农田生态系统可观改变的风险很小。

关键词: 转基因油菜 昆虫 生物多样性 风险

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不同包装对山核桃脂肪氧化的影响

农业工程学报 2008 EI 北大核心 CSCD

摘要:为了选择合适的包装措施以减缓山核桃仁中油脂在贮藏期间的氧化酸败,延长其贮藏期,研究了用聚乙烯塑料膜(Polyethylene,PE)和聚乙烯塑料铝箔膜(Polyethylene/Al,PE/Al)的普通包装与PE、PE/Al的真空包装,4种不同包装措施对山核桃贮藏过程中油脂氧化的影响。通过不同包装对山核桃油脂的酸价、碘价、过氧化值、p-茴香胺值和脂肪氧合酶活性在贮藏过程中的变化情况的影响,确定适合山核桃的包装形式。试验结果表明PE/Al真空包装能有效减缓山核桃油脂的氧化进程,从而延缓山核桃的品质的下降,延长其货架期。

关键词: 山核桃 食品贮藏 油脂氧化 包装

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气相色谱法测定番茄、黄瓜中醚菌酯和肟菌酯残留

化学通报 2008 北大核心 CSCD

摘要:建立了一种同时测定番茄、黄瓜中醚菌酯和肟菌酯农药残留的气相色谱法。以乙腈高速匀浆提取、盐析后,再经氟罗里硅土柱层析,净化效果显著。采用气相色谱-电子捕获检测器对待测组份进行了分离和测定。实验证明,添加浓度在0.01、0.05和0.2mg/kg时,番茄、黄瓜中醚菌酯和肟菌酯添加回收率在80.2%~103%之间,相对标准偏差(RSD,n=5)小于10%,醚菌酯和肟菌酯在样品中的最低检出浓度为0.005mg/kg。

关键词: 醚菌酯 肟菌酯 气相色谱 残留

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基于GIS的耕地地力等级评价研究——以浙江省海宁市为例

浙江农业学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:以浙江省海宁市为试点,在GIS系统的支持下,利用耕地质量调查数据,农田水利设施状况数据及实验室分析数据,通过层次分析法和数学建模的方法,对海宁耕地进行了耕地地力的分级评价。评价得出的耕地分布状况和属性信息基本符合当地的实际情况,表明将GIS技术运用到耕地地力评价是一个切实可行的方法,对科学管理耕地具有指导意义。

关键词: GIS 耕地地力 层次分析

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棉铃虫HaKettin1基因的全长cDNA克隆、序列分析和表达谱

昆虫学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:【目的】为了克隆棉铃虫Helicoverpa armigera编码肌肉蛋白Kettin基因的全长cDNA序列以及鉴定该基因在棉铃虫发育周期内的表达模式。【方法】利用兼并引物,通过分段RT-PCR和5′-和3′-RACE的方法克隆全长cDNA序列。利用半定量RT-PCR进行表达谱分析。【结果】编码棉铃虫Kettin蛋白的基因HaKettin1全长cDNA序列为13805bp,包含一个13365bp的开放阅读框,编码4454个氨基酸,蛋白分子量约为504.3kD。组织表达结果显示HaKettin1基因在棉铃虫的整个生育周期都有表达,幼虫期的表达尤为显著。【结论】HaKettin1与家蚕的Kettin蛋白具有90%的同源性,表明鳞翅目昆虫的Kettin蛋白之间具有很高的保守性。表达谱结果显示HaKettin1基因在棉铃虫的整个发育过程中都发挥重要作用。

关键词: 棉铃虫 HaKettin1基因 克隆 结构域 表达谱

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硅和豇豆根茬腐解液对豇豆生长和抗氧化系统的影响

浙江农业学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:研究了硅和根茬腐解液对豇豆耐连作障碍品种"ZN016"和不耐连作障碍品种之豇282种子萌发、幼苗生长和叶片中抗氧化系统的影响。结果表明,根茬腐解液明显抑制两个品种种子的萌发、胚根和幼苗生长。根茬腐解液胁迫明显提高叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量,降低抗坏血酸(AsA)含量;外源加硅可明显提高上述酶活性和AsA含量,降低MDA含量。在无根茬腐解液胁迫时,硅对上述指标无明显影响。

关键词: 豇豆 根茬 腐解液 抗氧化系统

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不同外植体对草莓病毒脱除效果及病毒的多重RT-PCR检测

核农学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:以草莓茎尖和花药为外植体,多重RT-PCR为检测方法研究了不同培养材料对3种草莓病毒,即斑驳病毒(strawberry mottle virus,SMoV)、轻型黄边病毒(strawberry mild-yellow edge virus,SMYEV)和镶脉病毒(strawberry vein-band virus,SVBV)的脱除情况。结果表明,花药愈伤组织再生苗途径对3种病毒的脱除率为100%。而不同大小茎尖脱除病毒效果不同:0.2mm茎尖可完全脱除3种病毒,但成苗率低;0.5mm茎尖可有效脱除SMoV和SVBV,但对SMYEV脱除不彻底;0.5mm茎尖成苗率明显高于0.2mm茎尖,但较难脱除SMYEV。综合病毒脱除率和成苗率,对花药再生频率较高的草莓基因型(如红颊)可以采用花药愈伤组织再生途径进行病毒脱除,而对于花药再生困难的基因型可以考虑选用茎尖分生组织途径获取脱毒苗。

关键词: 草莓 茎尖 花药 脱病毒 多重RT-PCR 检测

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