科研产出
山药PAL基因全长cDNA序列的克隆、表达与分析
《核农学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：为了阐明苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC4.3.1.5)基因在山药地下块茎酚类物质积累过程中的分子机理,本研究运用普通PCR、RACE和TAIL-PCR技术从大薯(Dioscorea alataL.)’Zixiao’地下块茎中克隆到同一个PAL基因的3个片段,即长度分别为1 145bp、1 151bp和424bp的中间片段、3’端和5’端的cDNA序列;将3段cDNA序列拼接后获得大小为2 376bp的PAL基因全长cDNA序列,该序列含有一个1986bp的最大开放阅读框(ORF),一个28bp的5’端非翻译区,一个362bp含25 nt的Poly(A+)尾的3’端非翻译区,最大ORF可推测编码一个包括PAL酶活性中心的特征序列(GTITASGDLVPLSYIA)在内的661个氨基酸的多肽,分子量为71.974kDa,等电点6.310;大薯地下块茎的PAL基因分别在核苷酸与氨基酸水平上和GenBank中所选已知其他物种的同源性为73%~77%和76%~82%,说明PAL基因在系统进化上相对保守;RT-PCR分析表明该基因仅在地下块茎中表达,而且表达丰度在收获前逐渐降低。
关键词： 大薯 苯丙氨酸解氨酶 全长cDNA 基因克隆 序列分析 时空表达
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螯合细胞外钙离子对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞成熟的影响
《细胞生物学杂志 》 2008 CSCD
摘要：在发现利用钙离子螯合剂EGTA螯合细胞外钙离子(Ca2+)后,可以显著抑制促滤泡(激)素(FSH)刺激体外培养的颗粒细胞合成和分泌雌激素,并且该抑制作用呈剂量依赖性。假设该特异性反应是通过Ca2+影响细胞内腺苷酸环化酶(AC)发挥作用的,因为Ca2+具有激活ACVIII的作用。通过RT-PCR和Northern印迹检测大鼠不同阶段卵巢组织中ACVIII的表达。结果表明,虽然Ca2+可以调控颗粒细胞类固醇激素的合成,但不同阶段的卵巢组织中均检测不到ACVIII的mRNA。实验间接提示了Ca2+促进颗粒细胞成熟的作用不是通过ACVIII发挥作用的,而可能是通过其他AC同工酶或其他Ca2+信号通路发挥作用。
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固定化木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽工艺的研究
《浙江农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：以戊二醛为交联剂,制备壳聚糖微球固定木瓜蛋白酶,研究固定化木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽的工艺。结果表明,壳聚糖固定化酶的制备条件,给酶量为0.4%,壳聚糖浓度为4%,加入的戊二醛(终浓度达到1.0%)交联,制备微球交联时间为3 h,制备得到的固定化酶活力最大,达167.1 U/mg。水解试验结果表明,pH 6.0,底物浓度4.0 mg/ml,流速0.6 ml/min,温度为55℃的工艺条件下,固定化木瓜蛋白酶水解乳酪蛋白的水解度达43.65%。
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浙东白鹅催乳素基因表达特点
《遗传 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：克隆了浙东白鹅催乳素基因(Prolactin,PRL)的全序列,并应用荧光定量PCR技术研究了浙东白鹅在产蛋期、就巢期和恢复期时催乳素基因在下丘脑、垂体和卵巢中的表达特点。结果表明,浙东白鹅催乳素基因在就巢期、产蛋期和恢复期的表达量差异显著(P<0.05),在就巢期表达量最高,产蛋期次之,恢复期表达量最低。对不同组织PRL的表达量分析,发现在垂体与卵巢中的表达量、卵巢与下丘脑的表达量均有极显著的差异(P<0.01),但在垂体与下丘脑中的表达量差异不显著(P>0.05),在垂体表达量最多,其次是下丘脑,卵巢中的表达量最低。因此,浙东白鹅PRL基因在不同繁殖时期体内表达差异较大。
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基于多光谱图像的水稻叶片叶绿素和籽粒氮素含量检测研究
《中国水稻科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：先利用常规技术分析了水稻的叶片叶绿素和籽粒氮素含量,然后用包含绿(G)、红(R)和近红外(NIR)三波段通道的电荷耦合器件(CCD)成像技术对水稻叶片和籽粒进行了无损检测。试验结果显示,水稻叶片叶绿素a、叶绿素b分别与G、NIR通道图像灰度呈极显著线性相关,叶绿素(a+b)含量则与上述两通道图像灰度呈显著线性相关;而且,水稻籽粒氮素含量与G、NIR通道、归一化植被指数(NDVI)灰度呈显著线性相关。由此建立了水稻叶片叶绿素和籽粒氮素含量的多光谱图像预测模型,并分别用21个样本对模型进行检验,其中线性显著相关的7个模型的相对误差RE(%)介于9.36%～15.7%,实现了对水稻叶片叶绿素和籽粒氮素含量的快速、准确、非破坏性检测。
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浙东白鹅催乳素基因的扩增及其序列分析
《浙江农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：利用PCR技术扩增得到了浙东白鹅的催乳素基因全序列,通过Dnaman软件分析,浙东白鹅催乳素基因序列与鸡、火鸡、牛、绵羊和斑马鱼等催乳素基因具有同源性,表明该基因在进化上是一个比较保守的基因;分析浙东白鹅催乳素基因的表达调控位点,可预测其氨基酸序列及其二级结构。
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覆土对双孢蘑菇菌丝产量的影响
《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：在双孢蘑菇(Agaricus bisporus)栽培中,以传统蘑菇砻糠田泥覆土为对照,研究了不同泥炭比例覆土配方的理化性状、细菌生长量、双孢蘑菇菌丝生物量及其产量。理化性状分析结果表明,不同泥炭比例覆土的空隙度、持水率,以及在-2.16~-17.28kPa水柱牵力下的水分释出量,都随着覆土中泥炭含量的增大而增大。磷脂脂肪酸(PLFA)分析结果表明,100%、50%和30%泥炭覆土中的菌丝生物量均显著高于传统砻糠田泥覆土(P<0.05),并随着泥炭比例的增大而增高;覆土中的菌丝生物量均于第2潮菇原基形成期达最大值。覆土中的细菌数量随着双孢蘑菇菌丝的生长而增多,不同覆土的细菌数量与其中的蘑菇菌丝生物量正相关,覆土中的细菌与蘑菇菌丝存在营养共生关系。栽培试验结果表明,蘑菇子实体形成量与覆土中的菌丝生物量密切正相关,与覆土持水率(含水量)正相关;覆土层蘑菇菌丝生物量和持水率是蘑菇覆土基质优化的重要技术指标。
关键词： 双孢蘑菇 覆土 理化性状 磷脂脂肪酸 菌丝生物量 细菌数量 产量
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氮素形态、用量及施用时期对小青菜产量和硝酸盐含量的影响
《植物营养与肥料学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：采用田间试验研究了氮素形态、用量及施用时期对小青菜产量和硝酸盐含量的影响。结果表明,等氮量施肥下,产量最高的是硝酸钙,尿素+微量元素处理;尿素,有机无机复混肥和碳酸氢铵处理间无显著差异,DMPP处理产量最低;追施微量元素能提高小青菜的产量。硝酸盐含量随着收获时期的延后而降低,有机无机复混肥处理则略有升高,但未达到显著水平;收获期取样时,不同氮肥对硝酸盐的积累是:硝酸钙>DMPP>尿素>有机无机复混肥>尿素+微量元素>碳酸氢铵。配施微量元素及氮磷钾的协同吸收均能降低硝酸盐含量。综合考虑产量和品质指标,以有机无机复混肥处理效果较好。小青菜产量和Vc含量随着施氮量的提高而提高,但硝酸盐含量也随之提高;小青菜产量和Vc含量随着施氮时期的延后而降低,硝酸盐含量高峰出现在追肥后20d左右。
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