科研产出
猪卵母细胞去核方法的改进
《中国兽医学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：对猪体细胞克隆技术中关键步骤之一的去核方法作了较深入的研究。结果表明,由本实验室改进的Willadsen去核法———二步挤压去核法,无论在去核操作成功率(73.9%)上还是在去核效率(81.2%)上都明显好于McGrath-Solter去核法(42.5%、67.4%,P<0.05);同时,本试验还发现,卵母细胞成熟培养36 h后去核组去核效率(89.1%)显著地高于成熟培养44 h后去核组(55.8%,P<0.05),而核移植重构胚的发育率2个组间无显著差异。
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重叠延伸PCR技术及其在基因工程上的应用
《分子植物育种 》 2006 CSCD
摘要：重叠延伸PCR技术(genesplicingbyoverlapextensionPCR,简称SOEPCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片段重叠拼接起来。此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组,而且不需要内切酶消化和连接酶处理,可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物。重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计。重叠延伸PCR在基因的定点突变、融合基因的构建、长片段基因的合成、基因敲除以及目的基因的扩增等方面有其广泛而独特的应用。本文综述了重叠延伸PCR的原理和目前的应用情况,并指出了此技术中的注意事项,展望了其应用前景。
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番茄刺皮瘿螨对番茄叶片生理指标的影响
《园艺学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：番茄叶片被番茄刺皮瘿螨危害后,一些生理生化指标发生了变化。与对照相比叶绿素、可溶性糖含量下降,螨量大和危害时间长则下降速度快。少量瘿螨在短时间内危害导致可溶性蛋白质和游离氨基酸含量上升,且随着螨量增加和危害时间的延长含量增加,而危害时间过长,其含量则下降。对于游离脯氨酸,则是螨量大,危害时间长其含量增加快。危害期为6d,处理20头/叶与60头/叶的游离脯氨酸含量分别比对照增加31.7887%、82.0439%。
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酚酸化合物对土壤酶活性和土壤养分的影响
《植物营养与肥料学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：研究了酚酸化合物对连作西瓜土壤酶活性和土壤养分的影响。结果表明,添加外源酚酸入土刺激了土壤酶活性,土壤过氧化氢酶活性、脲酶活性均比对照提高,土壤呼吸强度增加,施入酚酸化合物2周时,500 mg/kg浓度的苯丙烯酸和对羟基苯甲酸土壤呼吸强度分别比同期对照增加了22.5%和20.0%;处理4周时,750 mg/kg浓度的苯丙烯酸和对羟基苯甲酸脲酶活性分别比对照提高了34.4%和29.0%。苯丙烯酸和对羟基苯甲酸类酚酸化合物降低了土壤碱解氮、速效磷、速效钾含量,有机质含量也降低,250 mg/kg苯丙烯酸处理2周时,碱解氮、速效钾、速效磷和有机质含量分别比对照降低了9.6%,18.4%,20.7%和11.0%。
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温室黄瓜干物质分配与产量预测模拟模型初步研究
《农业工程学报 》 2006 EI 北大核心 CSCD
摘要：依据温室黄瓜(Cucum is sa tivus)器官生长与温度和辐射的关系,建立了基于分配指数和采收指数的温室黄瓜干物质分配与产量预测模拟模型,并利用不同品种和基质的试验资料对模型进行了检验。结果表明,模型对黄瓜地上部分干重、根干重、茎干重、叶干重、果实干重的预测结果与1∶1直线之间的R2分别为0.98,0.73,0.83,0.92,0.94;RM SE分别为232,6.8,157.6,173.9,196.8 kg/hm2。模型对黄瓜产量的预测结果与1∶1直线之间的R2为0.80,RM SE为7526.4kg/hm2。本模型对不同基质、品种的黄瓜干物质分配和产量的预测值与实测值符合度均较高,说明本模型的普适性较好。模型不仅能较好地预测中国现有生产水平下温室黄瓜的干物质分配及产量,而且可以为实现中国温室黄瓜生产环境优化调控和模式化栽培管理提供决策支持。
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西瓜蔓枯病分子诊断技术研究
《植物病理学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：本文测定西瓜上的西瓜蔓枯病菌(D idym ella bryoniae)、西瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)及西瓜枯萎病菌(Fu-sarium oxysporumf.sp.niveum)的rDNA的ITS序列,比对近缘种及西瓜上不同病菌的ITS序列同源性,设计出特异性上游引物XM-2和下游引物XM-R2。经过对XM-2/XM-R2引物的PCR扩增条件的优化,可以扩增出一条344bp的西瓜蔓枯病菌特异性DNA条带。上述方法可以检测到pg以上的蔓枯病菌基因组DNA,并且可以准确扩增出西瓜蔓枯病自然病样中特异性的DNA片段。本文建立了一项西瓜蔓枯病分子检测技术,该方法准确、快速、可靠,可用于西瓜蔓枯病田间的快速诊断。
关键词： 西瓜蔓枯病 西瓜蔓枯病菌 特异性引物 PCR诊断技术
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用玻璃微管法冷冻猪卵母细胞
《农业生物技术学报 》 2006 CSCD
摘要：用自制的玻璃微管(glassmicropipette,GMP)冷冻猪卵母细胞。以FDA染色鉴定冷冻-解冻后卵母细胞存活力,结果表明,用常规细管程序化冷冻和GMP管玻璃化冷冻猪成熟(MⅡ期)卵母细胞时,冻后存活率分别为34.5%和63.3%(P<0.05);以玻璃化冷冻比较细管和GMP管对猪MⅡ期卵母细胞冷冻效果的影响,两组冻后存活率分别为45.0%和65.9%(P<0.05);用常规细管程序化和GMP管玻璃化冷冻猪GV期卵母细胞时,冻后存活率为30.0%对59.7%,有显著性差异(P<0.05)。研究表明,GMP法为一种有效的猪卵母细胞冷冻保存方法。
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