科研产出
从寒丰A、秀水-04A与R378等组合看杂交粳稻库源特征及对籽粒充实度的影响
《上海农业学报 》 1999 CSCD
摘要：以目前大面积生产应用的2个粳稻不育系“寒丰A”、“秀水一04A”和R378等3个粳型恢复系配组成5个杂交组合，分析了杂交粳稻的库源特征及其对籽粒充实度的影响。结果表明，杂交粳稻产量库容优势明显，且这种优势主要表现为穗大；杂交粳稻抽穗期叶面积大、茎鞘干物质输出率高；成熟期杂交粳稻虽然叶面积下降幅度较小，但单位颖花获得的干物质量不如亲本和常规粳稻的多，而且，由于抽穗后期的干物质生产量对籽粒贡献最大，故杂交粳稻后期源库比例失调，因而籽粒充实度低下，但杂交粳稻出穗前干物质生产对籽粒充实度具有正效应。
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高温对耐热和不耐热蛋鸡体温的影响
《中国农业大学学报 》 1999 北大核心 CSCD
摘要：研究了青年蛋鸡的耐热力与其在高温下的体温（BT）、体温变化幅度（△BT）、热致死体温（LBT）及体重（BW）之间的关系。结果表明，以热应激存活时间（HSST）的长短为指标的耐热力，与鸡在38℃和40℃下的BT及△BT呈极显著负相关（在38℃下相关系数r分别为-0．49和-0．47，在40℃下r分别为-0．76和-0．77），与轻度热应激（32和35℃）下的BT，△BT，LBT和BW相关均不显著。在高温（32，35，38，40℃）下，耐热鸡群的BT和△BT均比不耐热鸡群低，但只有在38℃下两指标才达显著水平（P＜0．05），40℃下则均达极显著水平（P＜0．01）。
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农用溴甲烷的淘汰和代用品的发展前景
《上海农业学报 》 1999 CSCD
摘要：溴甲烷（ Ｍ Ｂｒ）是一种被广泛用来杀灭线虫、杂草、昆虫、细菌、真菌和啮齿动物的广谱熏蒸剂，但其对大气臭氧层有显著破坏作用。为了保护地球臭氧层，“蒙特利尔议定书”规定２０１０年内全球将禁产、禁用 Ｍ Ｂｒ。本文对取代 Ｍ Ｂｒ 的产品和技术作了概述。提出多学科合作研制出新的广谱、经济、实用，且对环境安全的 Ｍ Ｂｒ 代用品将对农业的可持续发展十分重要。
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慈姑蛋白酶抑制剂基因转化小白菜获抗虫转基因植株
《上海农业学报 》 1999 CSCD
摘要：通过根癌农杆菌的介导将慈姑蛋白酶抑制剂基因（ＡＰＩ）导入小白菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍ ｐｅｓｔｒｉｓｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＬ．）。Ｋａｎａｍ ｙｃｉｎ 筛选浓度为１０～１５ ｍ ｇ·Ｌ－ １，抑制农杆菌生长的抗生素选用Ｃａｒｂｅｎｉｃｉｌｌｉｎ，浓度为３００～５００ ｍ ｇ·Ｌ－ １。小白菜带柄子叶被农杆菌感染后，抗性芽的诱导频率为０．２％ ～２．０％ 。加入适量的ＡｇＮＯ３ 不仅可以抑制过度生长的农杆菌，还可以使抗性芽的诱导频率约提高到５％ 。试验获得转基因植株９７ 株。其中８１ 株ＰＣＲ 检测为阳性。部分转基因植株经ＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ 及ＲＴＰＣＲ 的进一步分子检测分析，证明ＡＰＩ基因已被整合进小白菜植株的基因组中。转基因小白菜的叶片离体饲虫初步试验结果表明：对鳞翅目害虫菜青虫的生长发育有一定的抑制作用，其幼虫摄食转基因植株叶片后，平均体重、体长均分别比对照（摄食非转基因植株叶片）减轻和短小，且约有２７．８％ 的幼虫不能正常羽化，而对照全部正常羽化。
关键词： 小白菜 带柄子叶 农杆菌介导转化 慈姑蛋白酶抑制剂(API) 抗虫性 转基因植株
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筛选假单胞菌株 M18 防治大棚黄瓜枯萎病害
《上海交通大学学报 》 1999 EI CSCD
摘要：设计了一种新的高效筛选程序，从植物根际土壤中分离出一株具有ＡＣＣ脱氨酶活性的促生拮抗双功能假单胞菌株Ｍ１８．在培养皿中，Ｍ１８能有效地抑制黄瓜枯萎病菌以及多种其他枯萎病原菌和植物病原菌的生长．Ｍ１８活菌浸种处理春黄瓜种子以及在大棚定植后根际土壤浇灌的试验中，与对照组相比，黄瓜枯萎病的株发病率降低７０％～８０％，霜霉病的发病率和病情指数都同时平均下降７０％左右，黄瓜产量提高２０％以上，每公顷可增加产值０．９万元以上，Ｍ１８的生物防治效果达到极显著程度．
关键词： 生物防治；假单胞菌株M18；ACC脱氨酶；黄瓜枯萎病
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牛乳β-酪蛋自检测的ELISA方法
《山东农业大学学报 》 1999 北大核心 CSCD
摘要：体外乳腺细胞培养是整体泌乳研究的有效补充，也在乳腺生物反应器的研究中发挥着重要作用。但乳腺细胞分离培养成功的标志不仅仅是细胞的形态特征及增殖特性，更重要的是细胞的生理功能及分化状态。卜酪蛋白为乳中所特有的蛋白质，其在乳中的含量仅次于ａ一马酪蛋白居第二位，故可用这种蛋白做为乳腺细胞分化功能的指标。（①闷ｐ出ｌｉｎｋａｌ;;ｍｌｎ～ｍｐ）方法是以胡作为标记物或指示剂，进行抗原或抗体的检测。与放射免疫法比较。具有所需仪器设备简单、试剂价廉、无放射性危害等优点。９－＄蛋白的ＥＩＪＳＡ检测国内未见文献报道，国外多用Ｗ一印迹法［’，‘］，但Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交更适于少量样品的定性检测，用于大量检测细胞培养物则显得很不方便，而Ｅ［ＪＳＡ方法一次可以方便地检测几十甚至几百个样品。ＥＬＩＳＡ方法中所用的酶有辣根过氧化物物酶（ＨＨＰ）、碱性磷酸酶、卜半乳糖茶酶等。由于ＩＩＲＰ活性强，价廉且性质稳定，故在ＥＩＪＳＡ中使用最广。本实验采用过碘酸盐改良法以ＨＲＰ标记抗体，建立了用ＥＩＪＳＡ夹心法检测牛卜酪蛋白的方法。豆材料与方法１．ｌ动物３只２月龄２．５－３ｋｇ雄性健康新西兰种兔。１．２试剂牛ｐ一酪蛋白（含量ｏｐ％以上），邻苯二胺（ＯＰＤ）为Ｓｉｐｏ公司产品，ＨＲＰ为处山仰ｐＭａｎｎｈａｉｎ公司产品，福氏佐剂购自中国农业科学院兽药研究所。中范围蛋白分子量标准为ｋ瓜湖公司产品。１．３兔抗个卜酷蛋白血清的制备及效价检取２你一ｍｌ的牛卜酪蛋白６ａｌｌ与６ｍｌ完全福氏佐剂混合，用两注射器相对反复抽送直至混合液完全乳化。给３只兔进行免疫注射，初次免疫选Ｍ后肢脚掌部各注射０．ｓｎｄ，背部４点每点０．ＳＩｎｌ。以后每隔１０ｄ加强免疫１次，加强免疫利用福氏不完全性剂和抗原的乳化物，每只兔每次注射的抗原量大约有４ｍｐ，第一次加强免疫经两后肢大腿肌肉内注射，第二次为皮下多点注射，第三次采用静脉及腹腔注射，第四次以后均采用耳缘静脉注射。在加强免疫期间用琼脂双扩散法检测抗血清效价。当达满意效价时，经兔颈动脉放血，分离血清，分装保存于一２０℃冰箱。１．４兔抗个ｐ一酸蛋白抗体的提取和鉴定采用饱和硫酸按沉淀粗提以．之后利用ＳｅＰｈａｄｅｘＧ－２５脱盐，ＤＥＡＥ纤维素纯化Ｄ］。１．５＄标兔抗牛ｐ一酷蛋白抗体的制备及纯抗体的ＨＲＰ标记采用过碘酸盐改良法［‘］。１．６ＥＩＪＳＡ夹心法检测井ｐ一酪蛋白（１）包被抗体：将兔抗牛ｐ一酪蛋白抗体用包被液稀释后，包被％孔酶标板，ＩＱ：）ｔ’Ｊ．孔，４℃过夜。（２）加标准产一酪蛋白（或样品），１００Ｗ孔，刃℃温育Ｉ．５一地。（３）加酶标抗体，１００ＷｆＬ，Ｐｔ温育互．５、Ｚｈ。（４）加显色液５０ｎｄＬ，室温进光显色２０ｏｈ。（５）加终止液那部Ｌ。（ｓｏ）用酶联免疫检测仪测ｏｎ值（４ｓｏ＿）。２结果与讨论２．ｌ兔抗牛卜酯蛋自抗血清的制备３只兔经免疫注射。均产生了抗月一田蛋白抗体。但其中２号免在加强免疫过程中死亡，可能是由于免疫应急或免疫注射液中微粒阻塞血管引起。１号兔经８次加强免疫产生了效价较高的抗血清，琼脂双扩散法测定效价达ｌ：３２。２．２免抗个具一酪蛋白抗体的制备纯化兔抗牛卜酪蛋白经脱盐和去除杂蛋白得以纯化，提纯Ｉｇｈ的分子量大约为１５（）ＫＩ）图１），抗体在最后稀释液中的浓度为２．１６ｍｇ／ｇｈ。２．３ＢｌｌＳＡｋ心法检测牛ｐ一酪蛋白的条件通过实验确定包被抗体浓度为１０ｎｄａｌｌ，ＨＲＰ标记抗体可采用ｇｕ倍稀释。对产一酪蛋白检测的灵敏度为Ｉ０ｎｐｅ，图２为检测ｐ一酪蛋白的标准曲线。实验发现，检测液中的血清成份对测定的结果影响很大，这可能与免疫家兔时抗原中含其他蛋白成分有关，这些微量的蛋白成分极有可能来自牛血清，在卜酪蛋白提纯过程中不易将这些杂蛋白完全去除。所以在乳腺细胞的诱导液中不易添加胎牛血清，以免影响测定结果。个乳腺细胞培养液中的酪蛋白浓度一般是在图２的测定范围之内的。如牛乳腺细胞系ＭＡＣ－Ｔ表达卜酪蛋白的量可达０．ｌ－０．３ｎｄｌ’ｌｌｒｍ沪］，原代培养乳腺细胞（ｌｏ－ｌ炉细胞）酪蛋白的表达量在０－２５（）ｎｄｌｎ培养液／ｄ［’ｊ。牛乳β-酪蛋自检测的ELISA方法@李震$上海农科院畜牧兽医研究所@陈永福$中国农业大学农业生物技术国家重点实验室!北京１０００９４牛乳β－酪蛋白;;ＥＬＩＳＡ1 Zavizion . B et al Subcloning the MAC-T bovine mammary 3epithclial cell line: morphology, growht properties, and cytogeneticanalysis of clonal cells .J. Dairy Sci, 1995, 78: 515-527 2 Wuynh, H.T, Robitaille, G and Tumer J. D Establishment of bovine mammary pithelial cells (MAC-T): An in vitro model forbovine lactation. Exp. Cell Res,1991, 187: 191-199 3周顺伍等.生物化学实验技术.北京农业大学出版社.1991 4免疫组织化学讲习班讲义.北京农业大学兽医学解剖组胚教研组,1984(未发表材料) 5 Talhouk, R. S, Neiswander, R. L.Schanbacher, F. L, In vitro culture of cryopreserved bovine mamary cells on collagengels, synthesis and lactoferrin. Tissue and cell ,1990, 22(5):583-599
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特种稻杂种优势利用
《上海农业学报 》 1999 CSCD
摘要：对“香型 Ａ／香型恢”配组成的杂交粳稻的香味鉴定表明，双亲均为香型的 Ｆ１ 代稻米具香味，不分离；双亲中仅一方为香型的 Ｆ１ 籽粒中香与非香呈１∶３ 分离，此种自然分离的微香型组合更适于平时食用。８ 个香型杂交粳稻组合平均比对照“９１１７”增产２０．５５％ ，其中“寒丰 Ａ／香恢１ 号”增幅达到２６．４０％ ，证明杂交香粳稻的产量优势明显。
关键词： 香粳稻;微香型组合;杂种优势利用
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Hsp菌剂在牛粪堆肥中的试验应用
《农业环境保护 》 1999 北大核心 CSCD
摘要：报道了Ｈｓｐ菌剂对牛粪堆肥发酵影响的初步试验效果。结果表明，Ｈｓｐ菌剂能迅速提高发酵温度，加快熟化进程，有效杀灭粪中所含的杂草种子和虫卵病菌，具有快速堆肥熟化和无害化的功效。
关键词： Hsp菌剂,牛粪,高温堆肥
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