科研产出
菠萝蜜炭疽病病原菌的形态学与多基因分子系统学鉴定
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为鉴定引起菠萝蜜炭疽病的病原,本研究按照常规方法对菠萝蜜炭疽病进行病原菌的分离、纯化,并用柯赫氏法则验证其致病性,结果表明分离后的病原菌可在菠萝蜜健康叶片上引起与田间炭疽病相同的症状。对病原菌进行分子生物学鉴定,基于ITS基因片段构建的系统发育树结果显示,病原菌HNYF1与Colletotrichum gloeosporioides (ID:KT007120.1)聚为一个分支,支持率为98%;分别基于MnSOD、CHS、Cal等基因片段构建的系统发育树结果显示,病原菌HNYF1与暹罗刺盘孢(Colletorichum siamense)聚为一个分支,支持率均为100%;基于ACT基因片段构建的系统发育树结果显示,病原菌HNYF1与Colletotrichum siamense (ID:MG324082.1)聚为一个分支,支持率为96%。因此,通过形态学观察和多基因分子系统学方法,将菠萝蜜炭疽病的病原菌鉴定为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)类群中的暹罗刺盘孢(Colletorichum siamense)。
关键词： 菠萝蜜(Artocarpus heterophyllus Lam.) 炭疽病 分子鉴定 系统发育树
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近30年海南岛土壤有机质时空变异特征及成因分析
《中国农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】土壤有机质(SOM)是评价土壤肥力和土壤碳库的重要指标。由于复杂的成土过程及人类活动的影响,SOM通常存在较强的时空变异性。研究SOM的时空变异特征可为农业种植结构调整、应对全球气候变化提供重要参考依据。【方法】以海南岛为研究区域,通过资料收集、野外调查、采样与分析获取全国第二次土壤普查(1980s)和2012年0—20 cm土层SOM含量数据,首先采用随机森林模型分别对两个时期训练集410个、128个样点SOM空间分布规律进行预测,并通过验证集103个、32个验证点对模型精度进行验证;采用统计学方法,结合农业统计数据,研究时隔30年海南岛不同土地利用类型SOM时空变异特征,并对驱动因素进行探讨。【结果】1980s SOM含量均值为20.57 g·kg~(-1),呈现出从西南向东北降低的空间分布趋势,全岛SOM含量主要集中在15—20和20—30 g·kg~(-1)两个等级,共占全岛面积的75.29%;2012年SOM含量均值为15.89g·kg~(-1),呈现出西南和东北高,西部、南部沿海低的空间分布趋势,SOM含量主要集中在10—15和15—20 g·kg~(-1)两个等级,共占全岛面积的78.28%,而15—20和20—30 g·kg~(-1)两个等级占全岛面积66.04%,同1980s相比减少了9.25个百分点。【结论】(1)时隔近30年,海南岛SOM含量整体呈减少趋势。2012年SOM平均含量较1980s减少了4.68 g·kg~(-1),减少率为22.75%。其中水田的SOM含量减少最为明显,减少了6.42 g·kg~(-1),减少率为27.34%;其次为园地,减少了2.65 g·kg~(-1),减少率为14.25%;而旱地减少量最小,为1.28 g·kg~(-1),减少率为8.84%;(2)水稻连作改为稻菜轮作(水田连作改为水旱轮作)、林地开垦为园地、土地利用强度加大是造成海南岛SOM含量下降的主要原因。
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酱用型灯笼椒新品种“坛坛香3号”的选育
《北方园艺 》 2019 北大核心
摘要：灯笼椒新品种"坛坛香3号"是以自交系‘9705’为母本,自交系‘9719’为父本配制而成的辣椒一代杂交种,果实灯笼形,果面光亮且褶皱,果实纵径5.0 cm,横径4.0 cm,单果质量15 g,果实呈橙色,果皮薄质脆。干物质含量为14.5%,维生素C含量141.8 mg·(100g)~(-1),辣椒素含量35.2 mg·(100g)~(-1),平均667 m~2产量2 538.4 kg。坐果力强,果实转色快,颜色黄艳持久。其病毒病、炭疽病、疫病田间抗性强于对照。适宜海南冬春季露地栽培,也可在长江流域避雨栽培。
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鸡HSP90AA1基因SNP检测及启动子区CpG岛的甲基化研究
《中国畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：试验旨在获得鸡热休克蛋白90α(HSP90AA1)基因序列并分析其基因结构和相关遗传变异,检测HSP90AA1基因启动子区CpG岛的甲基化状态,初步探索HSP90AA1基因在肌肉组织生长发育中的作用。以文昌鸡和北京油鸡为试验材料,利用PCR扩增鸡HSP90AA1基因组序列;通过基因测序寻找该基因中的单核苷酸多态性(SNP)位点;使用在线软件MethPrimer预测鸡HSP90AA1基因中CpG岛的位置;应用MassArray质谱法检测鸡胸肌中HSP90AA1基因启动子区CpG岛的甲基化水平,比较分析文昌鸡和北京油鸡HSP90AA1基因的甲基化差异。结果显示,在鸡HSP90AA1基因组中共发现7个SNPs位点,分别位于启动子区(A-189G,C-109T)、第1外显子(A+6G)、第2外显子(C+343T)、第2内含子(A+634G、A+836G)和第7内含子(A+3449G);鸡HSP90AA1基因包含10个外显子和9个内含子,其启动子区存在1个CpG岛,位于-1 802～-469bp处;在HSP90AA1基因启动子区共检测了42个CpG位点的甲基化水平,文昌鸡和北京油鸡中分别有9个(CpG_16.17.18、CpG_21.22.23、CpG_32.33和CpG_57)和4个CpG位点(CpG_1、CpG_5.6和CpG_57)在胸肌生长发育过程中发生甲基化改变。结果表明,文昌鸡与北京油鸡HSP90AA1基因序列信息和启动子区CpG岛的甲基化水平不同,这可能导致两种鸡对于应激反应具有不同的耐受程度。以上试验结果将为文昌鸡和北京油鸡生长发育规律、系统选育等方面的研究提供表观遗传学依据。
关键词： 文昌鸡 北京油鸡 HSP90AA1基因 启动子 甲基化
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水芹HSP90基因的原核表达及条件优化
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：植物热激蛋白90 (HSP90)在响应高温胁迫中起到重要作用.本研究从水芹中克隆到HSP90基因(基因登录号:MF961800),将其连接到原核表达载体pET30a上,构建重组质粒pET30a-OjHSP90.对大肠杆菌菌株BL21表达重组蛋白的起始菌液浓度、IPTG浓度、诱导温度和诱导时间进行了优化.结果显示,OjHSP90基因在大肠杆菌中可实现诱导表达,目的蛋白分子质量约为80 kD,与预期结果相符.当重组菌的起始OD600值达到0.8时表达量最高,pET30a-OjHSP90的最佳IPTG诱导浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导温度为37℃,最适诱导时间为4 h.本研究通过诱导条件的优化可以使目的蛋白的表达量显著增加,以期为研究OjHSP90的耐热功能提供理论依据.
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基于测序技术的海南地方猪TLR2基因多态性分析
《畜牧与兽医 》 2019 北大核心
摘要：为了解海南地方猪TLR2基因的多态性,本研究采用PCR法从五指山猪、临高猪和屯昌猪3种海南地方猪的血液中克隆Toll样受体2(TLR2)基因,并进行测序及序列分析.结果显示,3种海南地方猪TLR2基因的扩增长度均为2 649 bp,编码区长2 358 bp.3种猪TLR2基因序列的种内比对结果显示,五指山猪种内有7个核苷酸位点存在多态性,2处位于编码区;屯昌猪种内有5个核苷酸位点存在多态性,均在编码区外;临高猪种内有4个核苷酸位点存在多态性,1处位于编码区.种间比对结果显示3种猪有12个核苷酸位点存在多态性,其中3处为错义突变,导致氨基酸改变.同源性分析结果显示,3种猪的TLR2基因序列高度保守,同源性在99.6%~99.9%之间.蛋白质结构预测分析显示,海南猪TLR2基因在876、1454位点呈现的AG突变均引起了其蛋白质二级结构和三级结构的改变,提示可能存在TLR2功能的变化.本研究填补了海南地方猪TLR2基因多态性空白,为深入研究TLR2基因多态性与猪疫病易感性的关系提供基础研究资料.
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不同钾水平下厚皮甜瓜生育后期氮磷钾吸收及利用特征
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：以'翠甜'厚皮甜瓜为试材,采用盆栽砂培试验,设6个钾水平,即K1~K6(0、3、6、9、12、15mmol/L),研究其对厚皮甜瓜生育后期氮、磷、钾养分吸收与利用的影响.结果表明:施钾能够降低厚皮甜瓜各器官氮含量及成熟期根、茎叶氮累积量,显著增加果实氮累积量;增加根、果实磷含量及各器官磷累积量,显著增加果实、单株磷累积量;增加各器官钾含量及钾累积量,显著增加茎叶、果实以及单株钾累积量;显著增加氮生理利用效率和磷收获指数,增加氮收获指数,显著降低钾收获指数和磷、钾生理利用效率;单果鲜重以K2、K3和K4处理较高,且处理间差异不显著.钾处理与其厚皮甜瓜各器官氮、磷、钾含量存在的显著相关关系与器官部位及生育期有关,但与氮含量均呈显著负相关,与钾含量均呈显著正相关;各器官氮磷钾含量与氮收获指数没有显著相关性,但茎叶氮累积量与氮收获指数呈显著负相关;茎叶氮累积量与磷收获指数呈极显著负相关,果实磷、钾含量及累积量均与磷收获指数呈显著或极显著正相关;根、果实氮含量与钾收获指数呈极显著正相关,根磷含量与钾收获指数呈显著负相关,茎叶及果实钾含量和累积量均与钾收获指数呈极显著负相关.通过比较拟合优度(决定系数R2),发现钾水平与成熟期茎叶磷含量采用二次多项式拟合最佳,钾水平与成熟期根钾含量采用线性拟合最佳,钾水平与其他各器官养分含量采用三参数指数或者五参数双指数拟合最佳.比较三者养分吸收及利用情况可知,钾水平为9 mmol/L(K4)时,氮磷钾生理利用效率较好,较有利于氮磷钾养分吸收利用,实现经济效益最大化.
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海南黑山羊与努比亚黑山羊杂交后代血液生理生化及免疫指标测定
《黑龙江畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：为了建立海南地区海南黑山羊与努比亚黑山羊杂交后代血液生理生化指标的正常参考值范围,试验选择8月龄海南黑山羊、海南黑山羊与努比亚黑山羊杂交1代和杂交2代各8头,测定其血液生化指标6项、血糖血脂指标5项、抗氧化指标3项和免疫指标3项.结果表明:海南黑山羊血清中的天门冬氨酸氨基转移酶水平显著高于杂交1代(P<0.05);海南黑山羊血清中的葡萄糖、高密度脂蛋白和丙二醛含量显著低于杂交1代及杂交2代(P<0.05);其他指标均差异不显著(P>0.05).说明与海南黑山羊比较,海南黑山羊与努比亚黑山羊杂交1代及杂交2代的血液生理生化指标存在差异,今后还要加强对其血液生理生化指标的检测.
关键词： 海南黑山羊 努比亚黑山羊 杂交后代 血液生化指标 血糖血脂指标 抗氧化指标 免疫指标
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超高效液相色谱法测定啶酰菌胺和咯菌腈在番茄与土壤中的残留
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：应用超高效液相色谱仪建立一种同时检测番茄和土壤中啶酰菌胺和咯菌腈残留的分析方法。样品经乙腈提取,乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)吸附净化,以乙腈和水为流动相等度洗脱,采用可变波长紫外检测器检测,外标法定量分析。结果表明,啶酰菌胺和咯菌腈在0.05～1μg/mL范围内呈现良好的线性关系,相关系数R2均为0.999,方法的检出限均为0.01 mg/kg,定量限为0.1 mg/kg;在0.1～1 mg/kg范围内,添加回收率在82.8%～102.8%和86.5%～115.3%之间,相对标准偏差(RSD)在4.1%～8.7%和4.9%～9.1%之间。该方法简单可靠、重现性好,适用于番茄和土壤中啶酰菌胺和咯菌腈的残留检测。
关键词： 番茄 土壤 啶酰菌胺 咯菌腈 超高效液相色谱 残留
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巴西橡胶树HbSIP2互作蛋白的筛选和鉴定
《基因组学与应用生物学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：可溶性无机焦磷酸酶在天然橡胶生物合成中具有重要的调控作用,HbSIP2是胶乳中关键的可溶性无机焦磷酸酶基因。为了深入了解HbSIP2调控橡胶生物合成的机理,本研究对HbSIP2互作蛋白进行了筛选和鉴定。结果表明:诱饵载体p GBKT7-Hb SIP2无自激活活性,且对酵母无毒性作用,可以用于酵母文库筛选。将诱饵载体与橡胶树胶乳cDNA文库进行杂交,初步筛选获得20个与HbSIP2互作的蛋白。进一步通过双分子荧光互补实验证实,Hb SIP2能够与橡胶延伸因子发生蛋白互作。本研究结果为HbSIP2调控橡胶生物合成的机理研究提供了重要的理论依据。
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