科研产出
一步法SYBR Green实时定量RT-PCR检测坦布苏病毒方法的建立
《江苏农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为建立快速检测坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)的一步法SYBR Green实时定量RT-PCR方法,本研究根据TMUV NS2A基因的保守序列,设计并合成了1对特异性引物,以体外转录的NS2A基因作为标准品,采用一步法实时定量RT-PCR方法检测TMUV。结果显示该方法标准曲线的决定系数为0.997,具有良好的线性关系;灵敏度为1μl 10拷贝,是常规RT-PCR方法的100倍;并且与其他病毒无交叉反应,批内和批间变异系数分别为0.11%~0.30%和0.88%~1.31%,具有良好的特异性和稳定性。该方法对于TMUV人工感染鸭泄殖腔棉拭子的检测阳性率为100%,而常规RT-PCR检测的阳性率只有71%。因此,本研究所建立的一步法实时定量RT-PCR方法灵敏度高、重复性、特异性好,可以用于TMUV的临床检测。
关键词： 坦布苏病毒 实时定量RT-PCR NS2A基因
全文链接
请求原文
甘薯卷叶病毒复制相关蛋白部分基因克隆及分析
《江苏农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为明确甘薯卷叶病毒基因的分子特性及其变异,从江苏省徐州市表现卷叶、黄化等症状的甘薯上获得5个分离物(SPLCV1-1、SPLCV2-2、SPLCV3-1、SPLCV3-2、SPLCV4-1),利用PCR方法扩增克隆了这5个分离物的AC1部分基因序列,进行分析。结果表明,扩增到的5个分离物基因序列均为452个碱基,核苷酸序列一致率较高,为91.8%~99.8%,氨基酸序列一致率为94.0%~100.0%,且氨基酸序列的变异集中在143~166位点。在构建的系统进化树上,SPLCV分离物分为2个组,其中组Ⅰ包括日本、韩国、印度、巴西、美国及中国的部分分离物,本研究所得到的4个分离物也位于该组中,其中SPLCV2-2、SPLCV3-1和本研究室2012年得到的江苏省邳州港上分离物SPLCV5-1聚为一簇;组Ⅱ分离物均为中国分离物,且本研究得到的分离物SPLCV3-2也位于该组中。
全文链接
请求原文
小麦纹枯病菌中的dsRNA及其与菌株生物学特性的相关性
《植物保护 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：对采集自我国山东、河南、江苏、安徽4省的21株小麦纹枯病菌菌丝中的dsRNA进行了检测,研究了dsRNA条带与菌株菌落形态、生长速度、对小麦的致病力等生物学特性之间的相关性。结果表明,从16个菌株中检测到dsRNA条带,dsRNA的大小和数量存在丰富的多样性。致病力测定结果表明这21个小麦纹枯病菌菌株的致病力差异显著。目前暂未发现小麦纹枯病菌中dsRNA的类型和数量与菌株的菌落形态、生长速度及致病力等性状存在明显的相关性,但是致病力较弱的菌株中dsRNA条带的多样性更丰富。本研究为今后发掘小麦纹枯病菌中的低毒真菌病毒作了初步的探索。
全文链接
请求原文
一种室内大量饲养灰飞虱的方法
《中国农学通报 》 2015 CSCD
摘要：灰飞虱是重要的农业害虫和病毒传播介体,为给相关研究提供足够的活体材料,建立了一种室内灰飞虱规模化饲养的方法,笔者经一系列生物学试验,对温度、光强、饲养密度等条件进行了优化,并对产卵和换苗时间进行了规定。试验表明饲养温度24~28℃,光照强度5000~7000 lx,不同龄期虫的饲养密度分别为300~400头/杯(若虫)、200~300头/杯(3~4龄虫)、100~200头/杯(成虫)适合各自饲养时水稻苗的生长、灰飞虱的发育繁殖、卵的孵化等。为保证同批次虫龄的一致性,规定产卵时间和换苗时间分别为48 h和8~10天。此方法条件因素明确,可操作性强,不受场地、时间、环境等自然条件限制;可随时提供足量试验用龄次标准试虫。
关键词： 灰飞虱 水稻条纹叶枯病 水稻黑条矮缩病 玉米粗缩病 饲养方法
全文链接
请求原文
草莓花瓣脱落对果实灰霉病的影响
《中国农业科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确衰老花瓣在草莓果实灰霉病中的作用以及草莓花瓣脱落早晚与果实灰霉病发病的关系,为果实灰霉病的防控和抗(耐)灰霉病品种选育提供理论依据。【方法】试验1:以草莓品种‘甜查理’为材料,进行田间试验,摘除至少2 000个果实表面的衰老花瓣,以不摘除花瓣的处理为对照。保持塑料棚内高湿度8 d后,调查不同处理草莓果实灰霉病发病率。试验2:分别在2013、2014和2015年3月草莓盛花期,对11个草莓品种的田间花瓣脱落动态进行调查,每个品种选择20朵刚现蕾的花,记录现蕾后第7、14、21和28天果实上残留的花瓣数量,计算花瓣脱落率;于果实灰霉病发病高峰期,调查不同草莓品种果实灰霉病的发病率,分析现蕾后第7天花瓣脱落率与果实灰霉病发病率的相关性。试验3:对33个草莓品种现蕾后不同天数的花瓣脱落率与果实上残留花瓣数量进行调查,并分析两者的相关性。【结果】试验开始前棚内的草莓果实灰霉病发病率为4.2%;利用自然雨雪天气保持塑料棚内高湿度8 d后,摘除果实上残留衰败花瓣的处理,果实灰霉病的平均发病率为7.3%,对照小区果实灰霉病的平均发病率为25.3%,大部分果实均从与花瓣接触的地方开始感染。在不同试验年份,草莓品种之间的花瓣脱落趋势始终一致。所有草莓品种在花朵现蕾后,随时间延长,花瓣脱落率不断提高,但是不同草莓品种的花瓣脱落速度却有显著差异。不同年份草莓品种‘晶瑶’在现蕾后7 d的花瓣脱落率分别为99.0%、79.8%和94.4%,显著高于‘晶玉’(61.0%、24.0%和62.5%)和‘甜查理’(26.0%、3.8%和31.9%)。2013年调查的5个草莓品种的果实灰霉病发病率与花朵现蕾后第7天花瓣脱落率显著负相关(P<0.05);2014年调查的6个草莓品种,2015年调查的11个草莓品种的果实灰霉病发病率与花朵现蕾后第7天花瓣脱落率都显著负相关(P<0.01)。对33个草莓品种的调查发现,不同草莓品种现蕾后第7天花瓣脱落率与果实上残留花瓣数量显著负相关(P<0.01)。【结论】衰老花瓣是灰葡萄孢(Botrytis cinerea)侵染果实的主要途径,摘除草莓果实上衰老花瓣可显著降低果实灰霉病的发病率。现蕾后第7天的草莓花瓣脱落率与果实灰霉病的发生具有显著负相关性,利用这种避病性,在选育抗灰霉病草莓品种时可优先考虑花瓣脱落早的材料。
全文链接
请求原文
果园风送式喷雾机防治效果试验
《农业机械学报 》 2015 EI 北大核心 CSCD
摘要：为明确风送条件下不同农药制剂浓度对病虫害防治效果的影响,以虫口减退率和病情指数为指标,测试2种农药对梨蚜虫、梨黑斑病的田间防治效果;同时利用荧光试剂研究雾滴在冠层内的沉积分布,提出适应风送式施药的药液质量浓度范围。结果表明:果园风送喷雾机行驶速度1 m/s、风机转速1 200 r/min、单侧流量7.2 L/min工作条件下,喷施药液量为0.24 L/棵,比人工喷施减少药量33.3%。风送式喷施0.4 g/L的10%吡虫啉防治梨蚜虫,14 d后防效可以达到人工喷施0.8 g/L农药防治效果,药剂质量为0.096 g/棵,为人工施药的1/3。风送式喷雾防治效果随药液质量浓度增加而提高。风送式喷施0.75 g/L、1.0 g/L、1.5 g/L 3种质量浓度的75%百菌清防治梨黑斑病,第14天防效为46.52%、44.46%、55.63%,防效均显著优于人工喷施1.0 g/L质量浓度的农药。喷施0.75 g/L农药的药剂用量为0.18 g/棵,为人工施药时的1/2。风送式施药雾滴空间分布情况更好,可以参考人工作业减少1/3药液喷施量,同时适当增加药液质量浓度以求达到更好防效,实际喷施药剂量建议为人工作业的1/3~1/2。
全文链接
请求原文
遗传标志性基因Z0372 PCR检测肠出血大肠杆菌O157:H7
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7是重要的食源性病原菌,导致严重的人兽共患病。本文旨在建立以Z0372基因为靶基因的PCR检测技术,特异性检测EHEC O157:H7。以Z0372基因为靶序列,设计引物,建立Z0372-PCR,分析敏感性、特异性,并检测模拟阳性污染样品。结果表明,Z0372-PCR对纯培养物检测限103~104CFU/m L,模拟阳性污水样和肉样,增菌后检测限10~102CFU/m L(g)。非大肠杆菌O157和其他肠道病原全部为阴性扩增,只有肠出血性大肠杆菌O157:H7扩增出清晰而特异的条带。模拟阳性样品检测,条带特异,无任何杂带,测序与Gen Bank序列高度同源。因此,Z0372-PCR是特异性检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的技术,操作简便,成本低廉,适合实验室肠道内容物、刮取物、污水和食品等的快速检测。
关键词： 大肠杆菌O157:H7 Z0372 聚合酶链反应 食品 排泄物
全文链接
请求原文
不同果肉质地桃果实乙烯生成规律及其对乙烯的反应
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为鉴定耐贮运桃品种霞脆的肉质类型,以八成熟软溶质品种银花露、硬溶质品种湖景蜜露、不溶质品种金童6号、Stonyhard品种有名白桃和霞脆果实为试验材料,通过气相色谱法测定并比较采后贮藏过程中的乙烯释放规律。结果表明:采后贮藏过程中,银花露、湖景蜜露、金童6号桃果实乙烯释放均呈先升后降的趋势,并有显著的乙烯峰出现,果实硬度随贮藏时间推移而下降,银花露和湖景蜜露果实在贮藏末期硬度均低于1.0 kg·cm-2。有名白桃和霞脆桃采后成熟过程中释放极少量乙烯,经外源乙烯处理后,霞脆果实硬度未出现快速下降现象,贮藏末期果实硬度仍可达到3.5 kg·cm-2以上。研究认为,霞脆桃肉质为Stonyhard类型。
全文链接
请求原文
不同粗饲料来源的饲粮对山羊屠宰性能及肉品质的影响
《动物营养学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：本试验选用波杂羊(波尔山羊×徐淮山羊)为研究对象,研究不同粗饲料来源的饲粮对山羊屠宰性能以及肉品质的影响。试验选用28只体重为(15.69±1.32)kg的波杂羊,随机分成4组,每组7个重复,每个重复1只羊。分别饲喂以小麦秸秆、梨渣、大豆皮和二者混合(小麦秸秆+梨渣)为纤维源的饲粮,各组饲粮纤维物质水平均相同[即中性洗涤纤维(NDF)含量为40%]。试验期60 d。结果表明:1)与其他3组相比,大豆皮组能提高山羊的屠宰率,分别比小麦秸秆组、梨渣组、混合组提高了15.82%(P<0.01)、8.64%(P>0.05)、3.36%(P>0.05);2)与其他3组相比,大豆皮组山羊肉品质有明显的改善,降低了肌肉的剪切力、蒸煮损失以及滴水损失,并且肌肉中粗蛋白质、粗脂肪和干物质的含量最高。由此可见,不同粗饲料来源的饲粮对山羊的屠宰性能以及肉品质产生不同程度的影响,其中,以大豆皮为主要纤维源的饲粮对提高山羊的屠宰性能以及改善肉品质具有较好的效果。
全文链接
请求原文
黄秋葵汁乳酸菌混菌发酵条件优化
《食品科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为制备风味优良的乳酸发酵黄秋葵汁,研究了肠膜明串珠菌和植物乳杆菌以不同组合在发酵黄秋葵汁中的生长、产酸、感官品质以及挥发性风味成分。结果表明:植物乳杆菌单菌发酵黄秋葵汁可以在24h内将pH值降到4.5以下,活菌数可达10~7CFU/mL。肠膜明串珠菌单菌发酵黄秋葵汁无法顺利产酸。肠膜明串珠菌和植物乳杆菌以其菌液体积比2:1混合发酵黄秋葵汁,可迅速将pH值降到4.5以下,活菌数可达10~8CFU/mL,且感官品质优于植物乳杆菌单菌发酵。气相色谱-质谱联用方法分析可知,混菌发酵生成的挥发性成分比植物乳杆菌单菌发酵种类更多、含量更高。黄秋葵汁乳酸发酵最佳工艺条件为:肠膜明串珠菌和植物乳杆菌菌液以2:1比例混合、接种量5%、发酵温度35℃、发酵时间72h。
全文链接
请求原文
