不同养殖密度对中国明对虾生长和能量代谢的影响

张海恩; 何玉英; 李健; 韩旭; 谢拥军; 《渔业科学进展 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：本研究采用网箱养殖的方法,通过室内28 d的养殖实验,在4个养殖密度G1(100尾/m3)、G2(200尾/m3)、G3(300尾/m3)、G4(400尾/m3)组中,研究不同养殖密度对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)生长、能量代谢和代谢酶活力的影响.结果显示,G2组的增重率(WGR)、相对增长率(AGR)和特定生长率(SGR)均最高,与G1组相比差异不显著(P>0.05);G3和G4组的体重差异系数(CVW)显著升高(P<0.05),其他生长指标和成活率(SR)均显著低于G1组(P<0.05);G4与G1组相比差异极显著(P<0.01).随着养殖密度的增加,G3和G4组显著提高了血淋巴葡萄糖(Glc)、乳酸(LA)、丙酮酸(PA)的含量(P<0.05),显著降低了甘油三酯(TG)的含量(P<0.05);G2组4种指标含量与G1组相比差异不显著(P>0.05),而氨基酸含量在不同养殖密度之间变化不显著(P>0.05),表明在密度胁迫下,高密度对能源的需求增加,中国明对虾倾向性利用糖类脂类作为能源.另外,G3和G4组的己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)、6-磷酸果糖激酶(6-PEK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性均显著升高(P<0.05),说明机体氧化代谢途径发生变化,分解代谢增强.琥珀酸脱氢酶(SDH)活性显著降低(P<0.05),表明三羧酸循环活性的降低,进一步表明密度胁迫抑制了组织的有氧代谢.研究表明,G3和G4组养殖密度显著影响了中国明对虾的生长,增加了碳水化合物和脂类利用,抑制了组织的有氧代谢.当中国明对虾为4.5 g时,其养殖密度100~200尾/m3为宜.

关键词： 中国明对虾;密度;生长;能量代谢

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稳定表达草鱼LamR鱼类细胞的建立及对基因Ⅱ型GCRV增殖的影响

黄志深; 王庆; 吴斯宇; 周文礼; 王英英; 尹纪元; 李莹莹; 《淡水渔业 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：通过构建草鱼LamR（Ctenopharyngodon idella LamR,CiLamR）真核表达质粒,转染GCRV非敏感细胞系鲤鱼上皮细胞（EPC）和敏感细胞系草鱼肾细胞（CIK）,利用G418筛选获得稳定表达CiLamR的细胞,经Western Blot验证CiLamR稳定表达细胞系的构建。采用Ⅱ型GCRV分别接毒CiLamR稳定表达EPC和CIK,检测接毒后Ⅱ型GCRV拷贝数差异,研究草鱼37 kDa/67 kDa层粘连蛋白受体（37 kDa/67 kDa laminin receptor, LamR）对Ⅱ型GCRV增殖的影响。结果显示:经PCR扩增获得927 bp CiLamR完整开放阅读框（ORF）,并成功克隆进入真核表达质粒pEYFP-Mem,获得pEYFP-Mem-CiLamR重组质粒,转染并经过G418筛选后获得约80%阳性荧光的细胞。Western Blot证实稳定表达CiLamR的EPC和CIK细胞系构建成功。以不同初始浓度接种EPC-pEYFP-Mem、EPC-pEYFP-Mem-CiLamR细胞均未检测到Ⅱ型GCRV增殖,CIK-pEYFP-Mem、CIK-pEYFP-Mem-CiLamR可检测到病毒增殖,但是增殖量无明显差异。结果表明:CiLamR蛋白对基因Ⅱ型GCRV增殖无明显影响。

关键词： 草鱼（Ctenopharyngodon idella） 层粘连蛋白受体 稳定表达细胞系 基因Ⅱ型 GCRV

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高效液相色谱-串联质谱法测定稻渔土壤中氟虫腈及其代谢物残留

马丽莎; 谢文平; 尹怡; 单奇; 刘书贵; 李丽春; 赵成; 戴晓欣; 魏林婷; 郑光明; 《质谱学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：建立了高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定稻渔土壤中氟虫腈及其代谢物残留。样品经乙腈恒温振荡提取,ENVI-18固相萃取柱和10 mg GCB净化,ZORBAX Extend-C18色谱柱（2.1 mm×100 mm×1.8μm）分离,电喷雾负离子模式检测,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,稻渔土壤中氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜和氟虫腈亚砜的平均回收率在83.5%～110.3%之间,相对标准偏差在1.9%～11.5%之间,氟虫腈及其代谢物在0.5～100μg/L浓度范围内的线性关系良好,相关系数均大于0.998,检出限和定量限分别为1.0、3.0μg/kg。该方法操作简单、结果准确、可靠,可实现样品的批量化处理,能够满足稻田水产品中氟虫腈及其代谢物检测的需求。

关键词： 高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS） 恒温振荡 稻渔土壤 氟虫腈 氟甲腈 氟虫腈砜 氟虫腈亚砜

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海州湾大竹蛏种质资源保护区生态环境质量分析与评价

尚聪聪; 肖慧; 朱琳; 夏斌; 陈碧鹃; 崔正国; 唐学玺; 曲克明; 《渔业科学进展 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：本研究根据2018年5、8月对海州湾大竹蛏(Solen grandis)国家级水产种质资源保护区表层海水营养盐、重金属、石油类及相关环境因子的调查数据,运用综合质量指数法对该保护区海水生态环境质量进行综合评价,并采用富营养化指数和有机污染指数从不同角度分析该保护区的海水环境质量.结果 显示,除部分站位无机氮(DIN)含量略超标外,海州湾保护区其他监测因子均符合国家I类海水水质标准.2018年海州湾保护区海水综合质量指数范围为0.31~0.39,属于尚清洁等级.N/P值均大于Redfield系数,且磷酸盐(PO4-P)含量较低,表明该海域营养盐结构为磷限制.富营养化指数范围为0.05~0.27,海水为贫营养状况.有机污染指数范围为-0.24~0.81,该水域有机污染程度较轻.与2008~2013年历史调查数据相比,近年来,海州湾保护区海水生态环境质量保持较好.

关键词： 海州湾 水产种质资源保护区 综合质量 富营养化 有机污染

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草鱼肾中性粒细胞的分离鉴定与活性检测

常藕琴; 霍礼霞; 罗满林; 石存斌; 张德峰; 潘厚军; 任燕; 《中国水产科学 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：分离纯化草鱼（Ctenopharyngodon idellus）肾中性粒细胞、鉴定和检测其活性,目的在于为研究中性粒细胞的功能和免疫防御机制提供细胞材料。本研究使用鱼类脏器组织中性粒细胞分离试剂盒和差异贴壁法分离获得草鱼肾中性粒细胞;应用迪夫氏染色、碘化钾-吡啰红G （KI-Py G）染色、电镜技术鉴定细胞形态,使用多功能酶标仪检测经MPA刺激的细胞活性,台盼蓝染色法和CCK-8检测细胞存活率。结果显示,获得的细胞大小均一,细胞核圆形或肾形,胞质有A、B型颗粒,表面有皱褶,具有中性粒细胞的形态特征;细胞纯度达（99.3±0.53）%,细胞活力达（97.70±0.76）%,在体外培养24h内细胞存活率可保持在（89.91±3.56）%;在PMA刺激下检测到细胞表达MPO、ROS、NO和NETs的量显著提高（P<0.05）,与刺激时间呈正相关。结果证实,分离的细胞具有很好的活力,具有中性粒细胞的功能特征。本研究成功建立草鱼中性粒细胞的分离方法,细胞具有很好的活力,可为深入研究鱼类中性粒细胞的功能和免疫机制提供基础。

关键词： 草鱼 中性粒细胞 分离 鉴定 活性检测

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哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴定标记的筛选

佟广香; 杨笑星; 董乐; 张永泉; 尹家胜; 匡友谊; 《水产学杂志 》 2021

摘要：在稚鱼和幼鱼阶段,哲罗鲑Hucho taimen和细鳞鲑Brachymystax lenok外形相似,很难区分,易导致种质混杂,有必要开发简单、易行的方法鉴定二者的种质。本研究从its1（internal transcribed spacer 1）基因序列中筛选出能够用于区分哲罗鲑和细鳞鲑的DNA分子标记,建立了双重PCR鉴定方法。结果表明:1-its1引物在哲罗鲑中能扩增出334 bp的条带,而在细鳞鲑中无扩增条带。为消除样本DNA降解、实验过程的人为失误等原因造成的结果偏差,本研究添加12S r RNA参照引物,扩增片段为251 bp,并进行了引物比例优化。当1-its1引物和12S r RNA引物体积分别为1μL（10 pmol）和0.25μL（2.5 pmol）时,PCR扩增效果较好。哲罗鲑有2条扩增条带分别为334 bp和251 bp,细鳞鲑有1条扩增条带为251 bp。用筛选的1-its1引物和12S r RNA引物比例进行群体分析表明:1-its1引物在哲罗鲑和细鳞鲑的种质鉴定中准确率达100%。本研究结果可为哲罗鲑和细鳞鲑幼鱼鉴定、加工品鉴定、种质资源管理和保护提供有效的方法。

关键词： 哲罗鲑 细鳞鲑 分子标记 种类鉴定

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中华鲟ASDIGIRR与ASTRAF6基因的克隆与表达

张利凤; 汤东东; 郑楚文; 邓丹; 郭慧芝; 张书环; 张文兵; 许巧情; 李宁求; 《水产学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：中华鲟是处在硬骨鱼类与软骨鱼类之间的中国古老的珍稀鱼类之一,但在人工繁殖和养殖过程中,容易受到不同疾病的危害,因此,需要深入研究其免疫调控,为其疾病预防提供理论依据。单个免疫球蛋白白细胞介素-1受体相关分子（SIGIRR）和肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）是toll样受体（TLR）信号通路的2个重要的信号转导元件。本研究鉴定了中华鲟的SIGIRR和TRAF6的同源物,分别命名为ASDIGIRR （Acipenser sinensis DIGIRR）和ASTRAF6 （A. sinensis TRAF6）,并研究它们在正常组织中的表达和Poly（I:C）诱导后的表达模式。结果显示,ASDIGIRR和ASTRAF6在健康鲟的10个组织中均有表达,且分别在肠道和头肾组织中表达量最高;用Poly （I:C）孵育中华鲟脾脏细胞后,ASDIGIRR在3 h时的表达量显著下调,在6 h时恢复至正常水平,后在24 h显著上调达到最高值,随后开始下调,至48 h时仍显著高于对照组,而ASTRAF6在6 h达到最高表达量,维持到24 h后再下调,48 h时下降至最低水平。研究表明,ASDIGIRR和ASTRAF6在中华鲟抵御病原入侵的免疫防御过程中起着重要作用。

关键词： 中华鲟 ASDIGIRR ASTRAF6 Poly （I:C） 基因克隆 基因表达

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高温期大宗淡水鱼病害的防与治

陈倩; 赵永锋; 刘乐丹; 《科学养鱼 》 2021 北大核心

摘要：科学养鱼:近年来大宗淡水鱼总体的发病情况如何?袁圣:近年来大宗淡水鱼发病总体呈上升趋势,主要表现在发病期有所延长、新发疾病不断出现、危害程度越来越大、引起的损失越来越高。发病时间:原本几乎不发病的越冬期及春季成了发病的高峰期,从2019年起,春季开始暴发大宗淡水鱼越冬综合征,并在全国广泛流行,造成了很大损失（图1）。

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DNA条形码技术鉴定青岛市售三文鱼水产品

赵新宁; 牟铭; 李昂; 柳淑芳; 庄志猛; 《渔业科学进展 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：仅凭感官甄别市售三文鱼（鲑鳟鱼类的统称）是大西洋鲑（Salmo salar）或虹鳟（Oncorhynchus mykiss）难度很大,而广泛应用于物种分类学研究的DNA条形码为物种快速准确鉴定提供了强有力的技术支撑。本研究采用DNA条形码技术,对山东省青岛市6个城区大型商超和农贸市场的三文鱼商品标识与实际物种信息进行了调查。在采集的74份三文鱼样品中,成分为大西洋鲑的样品有61份,占比为82.43%;成分为虹鳟的样品有11份,占比为14.86%;另外,青岛市售三文鱼商品中还含有一定比例的大麻哈鱼（Oncorhynchus keta）和银大麻哈鱼（Oncorhynchus kisutch）,各占比为1.35%。调查数据显示,青岛市场流通的三文鱼商品以大西洋鲑为主,但核对商品标识与实际物种信息发现,14.86%的三文鱼外包装标识商品名称与检测结果不一致,且有多于40%的三文鱼商品未标注产地信息。可见,三文鱼水产品仍存在一定的掺假风险和食品安全风险,这一国际公认的高端水产品的市场监管还有待于加强,建议相关部门应尽快制定产品标准和检测标准,确保三文鱼水产品质量安全可溯源。

关键词： 三文鱼 DNA条形码 大西洋鲑 虹鳟

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裂壶藻蛋白肽美拉德反应产物的制备及其抗氧化特性

胡晓; 刘晶; 高颖; 李瑞杰; 李来好; 杨贤庆; 陈胜军; 吴燕燕; 戚勃; 荣辉; 《南方水产科学 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：该研究以裂壶藻（Schizochytrium limacinum）渣为原料,采用酶解法制备得裂壶藻酶解物（S. limacinum hydrolysate, SLH）,分析其美拉德反应条件,同时探究其不同超滤组分和葡聚糖凝胶柱层析组分美拉德反应产物（Maillard reaction products, MRPs）的抗氧化能力。结果表明,当还原糖为核糖、糖肽质量比为1∶1、反应pH为9、反应温度为100℃、反应时间为6 h时,SLH的MRPs还原力(5 mg·mL^-1)为1.24,DPPH自由基清除率(12.5 mg·mL^-1)为88.62%。将SLH经超滤后分别得到SLH-1 （<5 kD）、SLH-2 （<10 kD）和SLH-3 （<50 kD）组,发现SLH-1组在美拉德反应前后的抗氧化能力最强。将SLH-1组经Sephadex G-25凝胶柱分离后分别得到SLH-1-Ⅰ、SLH-1-Ⅱ、SLH-1-Ⅲ和SLH-1-Ⅳ组,发现分子量较大的SLH-1-Ⅰ组经美拉德反应修饰后的抗氧化活性最好,其还原力(2 mg·mL^-1)为0.741,DPPH自由基的清除率(5 mg·mL^-1)为79.41%。此外,氨基酸组成分析表明美拉德反应可导致酪氨酸（Tyr）、赖氨酸（Lys）、组氨酸（His）、精氨酸（Arg）、色氨酸（Trp）等氨基酸含量明显降低,但对必需氨基酸总含量影响不大。

关键词： 裂壶藻 酶解物 美拉德反应 抗氧化活性 分离纯化

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