科研产出
水稻磷脂酶D基因家族鉴定及表达分析
《广东农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】磷脂酶D(Phospholipase D,PLD)在植物生长发育、逆境胁迫响应等过程中起着至关重要的作用。挖掘参与水稻(Oryza sativa L.)生物和非生物胁迫的PLD基因家族成员，并探究其生物学功能。【方法】基于水稻基因组数据库鉴定水稻 PLD 家族成员，利用生物信息学方法系统分析其基因家族成员的蛋白理化性质、系统发育、保守基序、顺式作用元件，通过 RNA-seq 数据分析该家族成员在不同生物和非生物逆境胁迫条件下的表达谱，同时检测逆境处理条件下总磷脂酶D蛋白活性的变化。【结果】水稻PLD基因家族有17个成员，氨基酸数目在512～1 115，相对分子质量在57.19～123.82 kD；蛋白等电点在5.60～11.23。根据系统进化树将水稻PLD基因家族分为4个亚家族，不同亚家族成员在外显子数量上存在显著差异；染色体定位分析发现，17个PLD基因定位在 9 条染色体上。顺式作用元件分析发现 PLD 基因家族成员启动子区域含有大量与生长素(IAA)、脱落酸(ABA)和茉莉酸(JA)等激素响应及低温响应、压力防御、厌氧诱导响应元件；生物和非生物逆境胁迫条件下RNA-seq 数据分析发现，PLD基因家族成员受到低氮﹑ABA和赤霉素(GA)的强烈诱导；总磷脂酶D酶活分析显示高盐胁迫和黑条矮缩病侵染后的磷脂酶D总酶活显著升高。【结论】共鉴定出 17 个水稻 PLD 基因，同亚家族成员具有类似的保守基序。水稻 PLD 基因家族成员在不同组织及生物和非生物逆境条件下表达存在差异，这些结果将为解析磷脂酶D家族在水稻生长发育﹑生物和非生物逆境胁迫响应中的作用及其机制提供帮助。
关键词： 水稻 磷脂酶D 基因家族 生物信息学 系统发育分析 表达分析
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新时期我国主销区粮食安全的认识维度、矛盾诊断和破解路径
《广东农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为提升重大突发公共安全事件下主销区粮食安全保障能力，厘清产销区省域粮食生产能力与空间变迁情况，进一步提升新时期全国统一大市场背景下国家粮食安全治理能力和长效机制。利用ArcGIS技术结合统计分析方法，以全国粮食主产区、主销区、产销平衡区为研究对象，对新中国成立以来粮食产量和面积进行空间演化分析，并对2011—2023年主产区粮食调出率进行计算。结果发现，全国粮食净调出地更加集中于黑龙江、河南、山东、安徽四省，而作为传统粮食调出大省的四川、江苏、湖北、湖南粮食调出率却不断下降，甚至出现“销区化”倾向。我国粮食安全局面存在“区域非均衡加强”“产销错配”“粮饲错配”等结构性问题，产销跨省域运距过长及常态化成本较高，物流通道之间基本相互独立、互通性和连接性较差。鉴于此，提出应在大食物观下，进一步压实主销区保障一定自给率要求，重点提高主销区粮食生产和应急储备能力，建立粮食“产销”跨区域协作长效保障机制；提升主销区粮食主体内生积极性，规避“运动式”的生产方式。
关键词： 粮食安全 空间非均衡 粮食主销区 产需平衡 粮食流通 粮食储备
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饲料中不同来源的黑水虻幼虫对红罗非鱼鱼苗生长性能、体色及抗低温胁迫能力的影响
《饲料工业 》 2024 北大核心
摘要：为评价不同来源的黑水虻幼虫对红罗非鱼的饲用价值,分别用转化菠萝渣、麦麸及餐厨垃圾所得的黑水虻幼虫粉,以4%的比例替代基础饲料中的鱼粉,另在基础饲料中添加商业叶黄素,配制5组等氮等能的饲料,饲喂红罗非鱼鱼苗[初重(0.35±0.01)g]9周,记录鱼苗的体色变化,检测其生长性能、体表色度及组织类胡萝卜素含量;并在养殖试验结束后8 h内将水温从26℃降至10℃,统计各组鱼苗的死亡率.结果表明,鱼苗的增重率从高到低依次是麦麸转化-黑水虻组、菠萝渣转化-黑水虻组、对照组、叶黄素组和餐厨垃圾转化-黑水虻组.其中,麦麸转化-黑水虻组的增重率显著高于餐厨垃圾转化-黑水虻组,肝体比和脏体比则显著低于餐厨垃圾转化-黑水虻组和菠萝渣转化-黑水虻组(P<0.05).鱼苗头部及背部的黄度(b*)最高值均出现在菠萝转化-黑水虻组,背部鳞片和皮肤、背鳍中的类胡萝卜素含量分别在菠萝渣转化-黑水虻组、麦麸转化-黑水虻组和叶黄素组达到最高,均显著高于对照组和餐厨垃圾转化-黑水虻组(P<0.05).低温胁迫后,麦麸转化-黑水虻组、菠萝渣转化-黑水虻组的存活率达到了92.5%和85.0%,高于对照组(76.7%),并显著高于餐厨垃圾转化-黑水虻组(69.2%)和叶黄素组(72.5%)(P<0.05).综上,研究结果表明,转化菠萝渣及麦麸的黑水虻幼虫粉可部分替代鱼粉,改善红罗非鱼鱼苗的生长性能和形体指标,并提高其抗低温胁迫的能力.同时,转化菠萝渣的黑水虻幼虫粉能通过增加类胡萝卜素在组织中的积累,增强鱼体着色,达到和添加叶黄素添加剂类似的效果.
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广东地区草地贪夜蛾春夏季迁出种群的降落区域分布
《环境昆虫学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为明确广东省草地贪夜蛾Spodopterafrugiperda春夏季迁出种群的降落区域,根据2020-2021年广东省草地贪夜蛾虫情监测数据,利用基于WRF 4.0模式的迁飞昆虫三维轨迹分析程序,模拟了广东不同生态区草地贪夜蛾春夏季迁出虫源的迁飞轨迹及降落地.结果表明,广东省草地贪夜蛾春夏季虫源主要向东北方向迁飞,80%以上的虫源主要降落在华南和江南地区,少量可波及江淮、黄淮、台湾、东南亚及日韩等地.3-4月迁出虫源主要降落在华南地区,5-6月逐渐向北偏移,福建、江西等地的轨迹落点明显增多,7月迁出虫源主要降落在江南地区.此外,利用江西定南、福建周宁及浙江桐乡的个例分析,反向验证了迁飞轨迹模拟的准确性.本研究明确了广东省是江南及华南地区草地贪夜蛾重要的北迁虫源地之一.
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流行性乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、黄热病毒和寨卡病毒四重Luminex xTAG检测方法的建立与应用
《广东农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】黄病毒科虫媒病毒引起的人畜共患传染病对我国畜牧业及公共卫生造成严重影响。虫媒病毒种类多且感染症状相似，临床监测工作繁重，建立4种危害严重的黄病毒科虫媒病毒快速、高通量检测技术为其诊断和流行病学监测提供技术支撑。【方法】利用Luminex xTAG技术，针对流行性乙型脑炎病毒（JEV）5'UTR、西尼罗病毒（WNV）5'UTR及部分C基因、黄热病毒（YFV）5'UTR和寨卡病毒（ZIKV）NS5基因保守区，设计4对特异性引物并对引物进行TAG和Biotin修饰，以标准毒株为模板，进行多重PCR扩增；将扩增产物与带有反向TAG序列的不同编号荧光MagTAG磁珠、链霉亲和素R-藻红蛋白进行核酸杂交反应，利用Luminex 200系统检测磁珠荧光信号和藻红蛋白荧光信号，对病原进行分类和定量检测。【结果】建立了能特异性检测JEV、WNV、YFV和ZIKV的四重Luminex xTAG方法，其最优引物工作浓度为0.5、0.5、0.75、0.5 μmol/L；杂交工作体系为磁珠工作液20 μL、PCR扩增产物5 μL、SAPE报告缓冲液75 μL；杂交温度为37℃，杂交时间为30 min，pH值为8.0；该检测方法特异性好且不与登革病毒等其他虫媒病毒发生交叉反应。重复性试验结果表明，Luminex xTAG方法的批内变异系数为2.50%～5.63%，批间变异系数为3.61%～12.50%。四重Luminex xTAG方法对JEV和ZIKV的检测限为1×10～4 copies/μL，对WNV和YFV的检测限为1×103 copies/μL，其检测WNV、YFV和ZIKV的灵敏度较常规PCR高10～100倍。用Luminex xTAG方法和RT-qPCR方法检测209份临床样品和模拟样品，JEV、WNV、YFV、ZIKV符合率为100%。【结论】建立的四重Luminex xTAG方法具有高通量、高特异性和灵敏度、成本效益高的优点，可为虫媒病毒临床诊断和流行病学监测提供一种高通量技术手段。
关键词： 虫媒病毒 流行性乙型脑炎病毒 西尼罗病毒 黄热病毒 寨卡病毒 液相芯片 Luminex xTAG技术
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红火蚁回避虫生真菌的化学生态学机制分析
《植物保护学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探讨红火蚁Solenopsis invicta对虫生真菌的回避性，解析影响其选择自然生境土壤的信息化学物质，于室内采用双向选择装置观察红火蚁工蚁对含球孢白僵菌Beauveria bassiana、金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae和爪哇虫草菌Cordyceps javanica蚁巢土壤（土堆型、分散型和隐巢型）的群体选择行为，通过培养皿选择性试验测定红火蚁单头工蚁对含菌土壤的回避性及运动响应行为，并运用动态顶空吸附法和气相色谱-质谱联用技术分析影响红火蚁在不同含菌土壤中运动的土壤挥发物成分。结果显示：红火蚁个体和群体对含球孢白僵菌和金龟子绿僵菌土壤均表现出显著排斥和回避行为，而对含爪哇虫草菌土壤无明显回避行为。3种含菌土壤的挥发物种类和释放量存在一定差异，含球孢白僵菌和金龟子绿僵菌土壤的挥发物组分较相似，均含较高比例的烃类（分别为44.86%和35.10%）和酮类（分别为35.76%和51.33%）物质，醛类化合物是含球孢白僵菌土壤的特有挥发物组分，吡嗪类是含金龟子绿僵菌土壤的特有挥发物组分；含爪哇虫草菌土壤的挥发物种类和释放量都较少，仅检测到3种挥发物。表明土壤中不同种类虫生真菌的挥发物组分差异可能会引起红火蚁的选择行为差异，爪哇虫草菌对红火蚁无明显的驱避作用，可能与其挥发物种类和含量较少有关，在红火蚁菌剂的研发中具有良好的应用前景。
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广东省雷州市捕获鼠的物种鉴定及抗性水平评估
《植物保护 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：抗凝血灭鼠剂在广东已使用40多年,评估不同鼠类种群的抗药性对于科学合理使用抗凝剂具有重要的指导意义.维生素K环氧化物还原酶亚基1(vitamin K epoxide reductase complex subunit 1,Vkorc 1)上的错义突变可以导致鼠类对抗凝剂的抗性.本研究首先根据鼠类的外部形态特征和线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cyto-chrome c oxydase subunit Ⅰ,CO Ⅰ)基因对广东省雷州市乌石镇捕获的91只鼠进行物种鉴定,然后根据不同鼠类种群内的Vkorc1错义突变频率,评估当地种群对抗凝剂是否产生抗性.结果表明,COⅠ基因支持形态分类的结果,捕获的鼠种包括黑缘齿鼠Rattus andamanensis、黄毛鼠R.losea、黄胸鼠R.tanezumi和褐家鼠R.norvegicus.Vkorc1多态性分析显示,22只黑缘齿鼠中检测到1种沉默突变Ala18Ala,52只黄胸鼠中检测到2种沉默突变Ala18Ala和Ala41Ala,16只褐家鼠中检测到2种沉默突变His68His和Ile82Ile.目前乌石镇的鼠类种群没有产生与抗性相关的Vkorc1错义突变,表明当地种群对抗凝血剂的抗性水平较低,第一代抗凝剂仍可用于当地鼠害防治.
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米糠耐热脂肪酶的提取及粗酶特性初探
《现代食品科技 》 2024 北大核心
摘要：米糠脂肪酶使米糠发生酸败，常规热处理方法难以完全灭活米糠内源脂肪酶。为评价米糠中耐热脂肪酶的存在，该研究以湿热稳定化处理的米糠为原料，考察表面活性剂类型及浓度对米糠粗酶液脂肪酶活性影响，进一步比较两种脂肪酶特性，曲拉通-磷酸盐米糠脂肪酶（TRBL）和磷酸盐米糠脂肪酶（PRBL）。采用10 mmol/L表面活性剂提取粗酶液脂肪酶活性显著升高，其中曲拉通组效果最优。对比TRBL和PRBL性质发现，PRBL最适反应温度和pH值分别为30℃和7.0；而TRBL最适反应温度超过100℃，且具有较好耐热性，其最适反应pH值为3.0和7.0；两种粗酶液脂肪酶水解不同碳链的底物无显著特异性；Ba2+和Zn2+都能激活粗酶液脂肪酶活性，但Ba2+对TRBL脂肪酶活性激活作用远高于PRBL组；K+和Fe3+分别对PRBL和TRBL脂肪酶活性具有最大抑制作用；相比于PRBL,TRBL具有更好的有机溶剂耐受性，且甲醇对TRBL脂肪酶活性具有激活作用。研究证明了稳定化米糠中存在能耐受温度和有机溶剂的脂肪酶，为深入挖掘新型米糠脂肪酶提供了理论依据。
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黑水虻虫粉替代鱼粉对杂交鳢血清免疫抗氧化、肠道功能和抗病力的影响
《水产学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了研究饲料中黑水虻虫粉替代鱼粉对杂交鳢[斑鳢(Channa maculate，♀)×乌鳢(C. argus，♂)]免疫抗氧化、肠道菌群和抗病力的影响。实验采用黑水虻虫粉(black soldier fly larvae meal, BSFLM)分别替代基础配方中鱼粉的7.5%(BSFLM7.5)、15.0%(BSFLM15)、22.5%(BSFLM22.5)和30.0%(BSFLM30)(对应添加48.8、 97.6、 146.4和195.2g/kg的BSFLM干物质)配制5种等氮等脂的饲料。选取525尾均重为(10.84±0.01) g的杂交鳢，随机分成5组，每组3个重复，每个重复35尾，养殖周期为56d。结果显示，BSFLM22.5和BSFLM30组血清碱性磷酸酶(AKP)显著高于BSFLM7.5和FM组，BSFLM22.5组丙二醛(MDA)含量显著低于FM组，各组血清中、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、溶菌酶(LZM)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性无显著差异。肠道内容物菌群BSFLM15～BSFLM30实验组Sobs、Chao、Ace、Shannon、Simpson指数显著低于FM和BSFLM7.5组，物种多样性减少；衣原体门、变形菌门、螺旋体门、假单胞菌属和罗尔斯通菌属相对丰度实验组低于FM组。BSFLM30组后肠菌群Sobs指数、Chao指数和Ace指数显著高于FM组和其他实验组，厚壁菌门、拟杆菌门、沉积菌属和紫单孢菌属相对丰度增加，各实验组后肠螺旋体门、假单胞菌属和罗尔斯通菌属相对丰度降低。用舒氏气单胞菌感染，BSFLM7.5、BSFLM7.5和BSFLM22.5组的杂交鳢7 d累计死亡率显著低于FM组的。综上所述，黑水虻虫粉部分替代鱼粉可以改善杂交鳢免疫抗氧化能力，调节肠道内容物菌群结构，增强抗舒氏气单胞菌感染的能力，替代量以不超过22.5%(146.4 g/kg)为宜。
关键词： 杂交鳢 黑水虻虫粉 免疫抗氧化 肠道微生物 舒氏气单胞菌 抗病力
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3株柔嫩艾美耳球虫广东地区临床分离株的耐药性分析
《畜牧与兽医 》 2024 北大核心
摘要：为了解广东地区鸡球虫耐药性情况,分别从惠州、肇庆和韶关地区采集鸡场样品,利用球虫单卵囊分离纯化技术得到优势虫株柔嫩艾美耳球虫纯种卵囊,通过鸡体试验对各地区优势虫株进行复方磺胺氯吡唪钠、尼卡巴嗪、地克珠利等11种常用抗球虫药物的耐药性评估.以抗球虫指数(ACI)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和最适抗球虫百分率(POAA)4项指标,综合评估不同地区虫株对不同抗球虫药物的耐药性及耐药程度.结果:柔嫩艾美耳球虫惠州株(ETHZ-Y)对氯羟吡啶耐药性最强,对马度米星铵呈中度耐药;肇庆株(ETZQ-Y)对氯羟吡啶、盐酸氯苯胍、癸氧喹酯、甲基盐霉素和地克珠利等药物完全耐药,对拉沙洛西钠耐药性最弱;韶关株(ETSG-Y)对氯羟吡啶和地克珠利等药物耐药性最为严重,而尼卡巴嗪的抗球虫效果相对较好;3个地方虫株普遍对复方磺胺氯吡嗪钠、地克利珠、癸氧喹酯、二硝托胺、氯羟吡啶、甲基盐霉素、莫能菌素和盐酸氯苯胍均产生完全或重度耐药.综上,惠州、肇庆和韶关地区的鸡球虫耐药情况较为严重,应及时针对性地改变用药策略,加强防控、改善环境,避免鸡球虫病暴发的风险.
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