科研产出
体细胞核移植技术生产猪植酸酶转基因胚胎的研究
《中国畜牧兽医 》 2014 北大核心
摘要：为获得具有植酸酶腮腺特异性表达的猪转基因克隆胚胎,本研究使用植酸酶腮腺特异性表达的DNA质粒(包含腮腺分泌蛋白(parotid secretary protein,PSP)启动子与终止子序列、Neo筛选基因、绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因和高比活的植酸酶appA基因),采用脂质体转染和基因素418(G418)药物抗性筛选的方法获取稳转细胞系,并利用体细胞核移植技术获得植酸酶转基因胚胎。结果表明,本研究构建的DNA质粒可用于细胞筛选,且质粒越小,细胞的转染效率越高,14.89kb的YM6552仅获得了7.1%的转染率,EGFP质粒则获得了43.4%的转染效率。在单克隆形成上,较小的pYN3600也获得了更高的单克隆形成数(25个),其中表达EGFP的单克隆有14个,植酸酶PCR阳性集落有11个,高于YM6552的单克隆数(19、8和6)。转基因细胞构建重构胚胎后,所有的胚胎均能表达绿色荧光蛋白,虽其体外发育能力有所下降,但差异不显著(P>0.05)。综上所述,本研究所采用的植酸酶质粒、细胞筛选方法和核移植技术可生产植酸酶重构胚。
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猴头菌不同发育阶段鲜品中非挥发性呈味物质的研究
《天然产物研究与开发 》 2014 CSCD
摘要：本文对猴头菌(Hericium erinaceus)H5菌株不同发育阶段子实体鲜品中的非挥发性呈味物质(可溶性糖及糖醇、游离氨基酸、核苷酸)进行了研究。结果表明:H5菌株栽培得到的子实体在不同发育阶段各种非挥发性呈味物质的含量不同。阿糖醇是猴头菌中含量最高的可溶性糖醇,H5菌株子实体鲜品中的阿糖醇含量在6.87~13.98 mg/g之间。H5菌株5'-核苷酸的含量则在30.04~87.98μg/g之间波动,在发育的第三、第四时期较高,而后显著降低。游离氨基酸的含量甚微;在生长发育过程中天冬氨酸和谷氨酸的含量变化没有规律性。H5菌株在不同生长发育期的等鲜浓度(Equivalent umami concentration,EUC)值在931.84.40~1798.06μg MSG/100 g之间变化,且第4发育期的EUC值最高。
关键词： 猴头菌 发育阶段 可溶性糖及糖醇 5'-核苷酸 游离氨基酸
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不同生态区籼粳稻杂交后代碾磨和外观品质分析
《沈阳农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用粳稻秋光(程氏指数22)和籼稻七山占(程氏指数7)正反交,分别在华南籼稻区广东(N23°08',E113°14')、西南籼稻区四川(N31°07',E104°22')、长江中下游籼粳交错区上海(N31°14',E121°29')和东北粳稻区辽宁(N41°48',E123°25')同时构建重组自交系(RIL),测定不同生态区RIL程氏指数、碾磨品质和外观品质性状,分析籼粳稻杂交后代碾磨品质和外观品质差异及其与生态条件、籼粳属性及稻谷粒形的关系。结果表明:4个生态区RIL大部分株系为中间类型(偏籼型或偏粳型),四川、广东、辽宁、上海中间类型比例依次为86.84%、81.45%、82.82%和72.45%。不同生态区间绝大多数品质性状差异达到显著水平,籼粳类型间仅部分地区糙米率和白度值差异达显著水平。千粒重与稻谷粒长、粒宽大多呈显著正相关,而与长宽比呈显著负相关,除上海外糙米率与稻谷粒长极显著负相关,四川和广东地区糙米率与稻谷长宽比显著负相关;整精米率与稻谷粒长负相关(广东没有达到显著水平),与稻谷长宽比相关不显著(除上海外)。垩白粒率与稻谷粒宽显著正相关,与稻谷粒长和长宽比有负相关趋势,但是相关程度低于粒宽。总体上籼粳稻杂交后代品质性状有辽宁和上海优于四川和广东,生态区间差异大于籼粳类型间差异的趋势。整精米率主要受稻谷粒长影响,垩白粒率更偏向由稻谷粒宽决定,长宽比对二者的作用有所降低,粒形与品质性状的关系较育成品种变得更为复杂,生产上粳稻品质性状优于籼稻的遗传、生态机制还有待深入研究。
关键词： 水稻 籼粳稻杂交 重组自交系 生态环境 粒形 碾磨品质 外观品质
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新发猪流行性腹泻病毒ORF3基因的遗传进化分析
《华中农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：从浙江地区分离的2株代表性样品与全国范围内流行的参考毒株进行比对和遗传进化分析,结果分为4个组,代表性样品与大部分国内的毒株落入G4-2组,与国内早期CH-S毒株核苷酸(氨基酸)同源性为98.4%~98.5%(99.1%~99.6%);以华南地区为主的2011-2012年分离的毒株自成一组,与中国其他地区的毒株的同源性为95.0%~97.2%,与其余3组比较有9个核苷酸的变异。遗传进化分析表明所分离毒株与大部分中国的流行毒株属于一个基因型;以2011-2012年中国华南地区为主的毒株成为PEDV的一个新的基因型;提示2011-2012年中国流行着2种PEDV的基因型。
关键词： 猪流行性腹泻病毒 分子流行病学 ORF3基因 遗传变异
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植物对土壤重金属镉抗性的研究进展
《生态环境学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：各种人类活动,如采矿、制革、冶炼、污水灌溉等引起土壤和水体重金属污染,严重威胁着植物生长和人类健康。重金属镉污染是其中最常见的一种。该文描述了受重金属镉胁迫时植物的生理机制及各种抑制表现,如线粒体的裂解,细胞的生长分裂、水分的吸收、光合作用受到抑制等;同时也从微生物和细胞分子生物学方面分析了植物对重金属胁迫的应对策略,它依赖于植物本身和周围生存微环境的通力合作,主要包括降低对重金属的利用、控制重金属的吸收、螯合重金属、促进重金属的排出、区室化重金属和对重金属诱导的活性氧基团进行解毒等几条途径。另外,植物体对土壤环境中重金属镉的吸收、转运和解毒是一个精密的调控过程,参与重金属吸收和排出的转运蛋白在整个调控过程中发挥关键作用,参与了吸收、螯合、区室化和代谢利用等关键步骤。非必需重金属转运蛋白分重金属吸收蛋白和重金属排出蛋白2大类,吸收蛋白主要有AtNRAMP、ZNT和OsIRT等,能够通过某一种或几种阳离子转运载体蛋白运输至植物体内;排除蛋白主要包括P1B型ATP酶、阳离子转运促进蛋白家族(CDF)和三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter,ABC转运蛋白)3大蛋白家族,主要将重金属转运出细胞质或者将重金属转运进入植物体内的细胞器,转运蛋白在植物耐受重金属胁迫中起着积极的防御作用。该文探讨了植物对重金属镉胁迫的各种抗性机制,可为土壤重金属镉污染的修复如微生物修复、植物修复等提供一定的理论依据和应用指导。
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新型脱氧核酶ASON-Bulge-DNAzyme靶向M蛋白抑制PRRSV在MARC-145细胞中的复制
《畜牧兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：在细胞水平探讨新型脱氧核酶(ASON-Bulge-DNAzyme)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抑制效果。针对PRRSV JX株M基因设计了2个新型的脱氧核酶,经RT-PCR、TCID50、CPE、间接免疫荧光试验(IFA)对新型脱氧核酶抑制PRRSV复制效果进行评价。结果针对M基因M-1新型脱氧核酶表现良好的抑制效果,其抑制效果高达82.7%,M-2新型脱氧核酶抑制效率最高可达到83.9%,研究表明M基因的这2个位点可能是PRRSV复制所必需的。本研究对今后PRRSV复制及基因组功能研究、抗病毒药物开发和PRRSV的致病机制及防制研究有重要意义。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 新型脱氧核酶 M基因
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灰盖鬼伞漆酶在毕赤酵母中表达及条件优化
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：根据灰盖鬼伞漆酶基因LCC1的蛋白序列和毕赤酵母的密码子偏爱性设计并合成CCLCC1I基因片段,将其连接到经过改造的pPIC9K质粒上构建分泌表达载体pYN2395;构建好的载体经BglⅡ酶切线性化后电激转化到毕赤酵母GS115中,通过ABTS底物显色反应筛选获得阳性转化子。从培养基、发酵温度、铜离子浓度和甲醇添加量等方面对重组酵母的发酵条件进行了研究。结果显示:添加0.6%的丙氨酸能极大地提高灰盖鬼伞漆酶的表达量,并确定最终优化组合为:培养基使用MMA,发酵温度为20℃,铜离子体积浓度为0.5mmol/L,甲醇添加量为1.0%/24 h。
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民国时期白木耳试验研究和生产贸易状况述评(一)
《食药用菌 》 2014
摘要：白木耳是中国近代历史上最有名的食用菌,与参、茸、燕、桂齐名,又可药用,备受国人重视。民国时期对其进行过一些试验研究和生产调查,在食用菌文献中以其的数量为最多。对近年来收集到的民国时期期刊上和食用菌图书中的白木耳文献所作的梳理结果,我国的白木耳,以通江银耳最为著名,在其产地四川通江县涪阳乡,至今还保存有晚清末年记述银耳的"碑记",1986年四川省地方志编委会还专门编写出版了《通江银耳志》,2010年又有新版志书再版。"历史有碑,现代有志",在我国食用菌中独树一帜。
关键词： 民国时期 白木耳(银耳) 试验研究 生产调查 贸易 技术改良
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