科研产出
恩诺沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性
《河南农业科学 》 2008 北大核心
摘要：将恩诺沙星(ENR)偶联于载体蛋白BSA,形成完全抗原(BSA-ENR)并免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术制备分泌抗恩诺沙星的杂交瘤细胞株,用体内诱生腹水法生产ENR单克隆抗体。结果筛选出4G1-B3,4G1-G1和4G1-B9 3株敏感特异的杂交瘤。3株单抗对ENR的半数抑制浓度(IC50)分别为1.04 ng/mL,2.44 ng/mL,4.24 ng/mL。4G1-B3与环丙沙星有0.02%的交叉反应,与其他竞争物的交叉反应率均小于0.01%;4G1-G1和4G1-B9与其他竞争物的交叉反应率均小于0.01%。
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猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h蛋白原核表达条件的优化
《黑龙江畜牧兽医 》 2008 北大核心
摘要：为了提高猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)M13h蛋白基因在大肠杆菌中的表达量,试验研究了培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对pET32a-M13h融合蛋白表达量的影响。结果:使用TB培养基于37℃培养3 h后,采用终浓度为0.4 mmol/L的IPTG在37℃、100 r/min诱导培养4小时时,pET32a-M13h融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-M13h融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为30 ku;Western-blot检测结果表明pET32a-M13h融合蛋白能与猪囊尾蚴多克隆抗体发生特异性反应。
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磺胺二甲氧嘧啶单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定
《核农学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：用重氮化法将SDM(磺胺二甲氧嘧啶)偶联于载体蛋白BSA和OVA,合成免疫原BSA-SDM和包被原OVA-SDM,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE进行鉴定;用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌SDM mAb细胞株,用体内诱生腹水法制备SDM mAb;对SDM mAb的效价、亲和性、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果表明,BSA-SDM人工抗原制备成功,分子结合比约为1∶12.1;筛选出1B43、D9、4E1共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1∶3.2×102、1∶5.12×102、1∶8.1×102,腹水分别为1∶2.56×105、1∶2.56×1051、∶5.12×105,4E1亲和常数(Ka)为1.25×1010L/mol;4E1株对SDM的IC50为16.64ng/ml,与磺胺-6-甲氧嘧啶交叉反应率为5%,与其他磺胺类药物无交叉反应性。本试验获得了抗SDM高价、敏感、特异的mAb,可用于SDM残留检测的免疫学试验。
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硅对盐胁迫下黄瓜生长及矿质营养的影响
《河南农业大学学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：采用水培法,研究了硅(Si)对盐胁迫下耐盐性不同的2个黄瓜品种(津绿4号和津研4号)地上部及根系中N,P,Ca~(2+),K~+,Na~+,Mg~(2+),Mn~(2+),Zn~(2+),Si,Cl~-等矿质元素含量的影响.结果表明,津绿4号和津研4号经50 mmol.L~(-1)NaCl处理5,10 d后,地上部和根系中Ca~(2+),K~+,Zn~(2+)含量明显下降,Na~-,Cl~-,Mn~(2+)含量显著高于CK.Si可显著提高盐胁迫下黄瓜地上部和根系中Ca~(2+),K~+,Zn~(2+)含量,并降低Na~+,Cl~-,Mn~(2+)含量,Si可提高盐胁迫下黄瓜植株的干物质量和相对含水量,显著改善了盐胁迫下黄瓜植株的养分平衡状况.耐盐性不同的2个黄瓜品种,地上部和根系中元素含量变化无明显差异.
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猪轮状病毒VP6基因的原核表达载体构建和表达
《河南农业科学 》 2008 北大核心
摘要：根据已报道的猪轮状病毒VP6基因序列设计了2对引物,利用pGEM-T-Easy-VP6重组质粒为模板,经PCR扩增获得了1 194 bp的产物。将扩增片段分别插入到pET5α和pGEX-4T-2构建表达载体,并分别在大肠杆菌BL21(DE3)Plyss和ER2566中表达。结果表明:成功构建了重组质粒,而且该片段在大肠杆菌中也成功表达,获得了大小为44 kD的蛋白。
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农田土壤养分精准管理与郑麦366目标产量推荐施肥标准
《河南农业科学 》 2008 北大核心
摘要：应用地理信息系统(3S)技术,结合土壤养分状况系统研究法,对新乡市延津县高寨乡平陵村面积约230 hm2的粮田耕层(0~20 cm)土壤养分进行了空间变异特征与分区管理技术研究。结果表明,粮田耕层土壤中N,P,K,S,Mn,Cu,Fe,Zn等营养元素普遍缺乏。K低于临界值的土壤样品数占68.9%,P低于临界值的土壤样品数占11.1%,S低于临界值的土壤样品数占15.6%,Zn低于临界值的土壤样品数占91.1%,Fe低于临界值的土壤样品数占33.3%,Cu低于临界值的土壤样品数占24.4%,Mn低于临界值的土壤样品数占53.3%。同时针对郑麦366优质强筋小麦目标产量进行推荐施肥,小麦产量达到7 500~9 000 kg/hm2时,推荐施肥标准为:N为225 kg/hm2,P为90~135 kg/hm2,K为135~180 kg/hm2,S为60~90 kg/hm2,Zn为15~30 kg/hm2,Cu为15~30 kg/hm2,Mn为15~30 kg/hm2,Fe为15~30 kg/hm2。
关键词： 农田 土壤养分 精准养分管理 3S技术 空间变异 推荐施肥 小麦
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强光高温同时作用下不同小麦品种的光合特性
《作物学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：以小麦品种藁城8901、豫麦49、郑麦9405、周18为试材,用强光(1900μmolm～2s～1)、高温(35℃)同时处理材料3h,研究了高光强和高温共同合胁迫对小麦旗叶光合作用和叶绿素荧光特性的影响。结果表明,正常生长条件下,郑麦9405和周18的光饱和速率、饱和光强均高于藁城8901和豫麦49,郑麦9405的表观量子效率也最高。强光高温处理使藁城8901、豫麦49和周18的光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci)较对照大幅下降;郑麦9405的Pn、Gs也出现了下降,但降幅最小,Pn仍保持11.6μmolCO2m～2s～1,Tr较对照略有上升;4种基因型小麦的Ci未较对照明显变化;与对照相比,4个材料的最大光量子效率(Fv/Fm)、开放的光系统II反应中心的激发能捕获效率(Fv′/Fm′)、作用光下光系统II的实际量子效率(ФPSII)、光化学猝灭系数(qP)均下降,而非光化学猝灭系数(NPQ)大幅上升;其中郑麦9405的各项荧光参数均较高。研究表明,小麦旗叶对强光高温的适应性存在品种间差异,郑麦9405的耐强光高温特性优于其他3个品种;强光高温下较高的蒸腾速率和较大的NPQ可能是郑麦9405维持光合机构功能的重要原因。
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H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化
《华北农学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：参考GenBank上发表的H5亚型禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)基因序列设计引物,PCR扩增NA基因,再将其克隆到原核表达载体pET-32a中,用E.coliBL21(DE3)原核表达,SDS-PAGE和Western-blot对表达蛋白进行鉴定。Western-blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为61 kDa,位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性。ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性。
关键词： 禽流感病毒 H5亚型 神经氨酸酶(NA) 原核表达
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