科研产出
猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用
《中国兽医科学 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)聚合酶部分片段,反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,用脂质体法将重组质粒plxas-pol转染PA317细胞,经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆,分别扩大培养后,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,细胞克隆产生的重组病毒效价达9.0×105CFU/mL。用高效价假病毒感染IBRS2细胞,再经抗生素G418筛选,提取细胞克隆总RNA,经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞。以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IBRS2细胞所产生的细胞病变为指标,证明该反义RNA对病毒有明显抑制作用,抑制率约为80%。用2×103和4×102TCID50/mL剂量的TGEV感染时,引起细胞死亡的时间分别为21 h和27 h,与对照组相比,抗性细胞系可明显延迟因病毒感染引起细胞死亡的时间。
关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 反义RNA 逆转录病毒表达载体
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重组犬IL-2在原核细胞中的高效表达
《中国兽医杂志 》 2006 北大核心
摘要:应用RT-PCR技术克隆犬IL-2基因,并插入到原核表达载体P JLA 605中,构建pRL-C aIL-2表达质粒;采用M 9培养基摇瓶发酵,确定诱导时机和诱导表达时间。结果表明:工程菌pRL-C aIL-2在30℃培养至对数生长后期(OD600为1.5)42℃诱导4 h时,菌体收得量湿重达17.8 g/L,目标蛋白表达量约占菌体总蛋白的29.7%。外源基因在该基因工程菌中得到了高效表达。
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大豆连作对土体和根际微生物群落功能的影响
《生态学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:试验采用Biolog方法在大田试验条件下研究了不同连作年限大豆在结荚期和收获期根际和土体微生物群落功能多样性的变化。试验结果表明,在结荚期和收获期根际微生物群落功能多样性、均匀度指数和AWCD均显著高于土体。在结荚期迎茬和连作8a的土体微生物多样性、AWCD均高于正茬和连作4a土体;在收获期正茬和迎茬处理的土体微生物多样性、AWCD高于连作4a和8a。结荚期迎茬、连作4a和8a处理的根际微生物群落AWCD均显著高于收获期,说明在大豆植株生长旺盛的结荚期微生物群落的根际效应比收获期更明显。在这两个生长期降解氨基酸,糖类和羧酸类碳源的微生物可能是连作影响的主要土体微生物类群。
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