科研产出
绿盲蝽磷脂酶C(AlPLC)的表达、纯化及酶学性质
《昆虫学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：【目的】本文在前期获得绿盲蝽Apolygus lucorum磷脂酶C基因(Al PLC)的基础上,明晰Al PLC基因在绿盲蝽不同日龄若虫中的表达特征,阐明Al PLC重组蛋白的酶学性质。【方法】qRTPCR法分析1-13日龄绿盲蝽若虫Al PLC的表达量;构建含有Al PLC基因的原核表达载体p Czn1-Al PLC;进一步将该表达载体经IPTG诱导表达和蛋白纯化,获得具有磷脂酶活性的重组蛋白;以pNPPC(P-硝基苯基磷酸胆碱)为底物测定不同温度和不同p H下的重组Al PLC蛋白酶活性,最终确定了其酶活性的最佳p H和最适温度。【结果】Al PLC mRNA在绿盲蝽测定的若虫期持续表达,在4,8,12以及13日龄若虫中表达量相对较高。重组蛋白Al PLC可在大肠杆菌Escherichia coli中表达一个约79 k D的蛋白,12%SDS-PAGE显示该蛋白主要以包涵体形式存在;经过变性,复性获得具有磷脂酶活性的纯化蛋白。在蛋白浓度为0.25 mg/m L条件下,该酶最适温度为57℃(179.54±3.96 nmol/μg·min),最适p H为8.5(374.99±2.84 nmol/μg·min)。【结论】结果表明Al PLC在绿盲蝽若虫中表达具有特异的发育历期特性,获得的重组蛋白在较高温度和碱性环境下有较高磷脂酶活性。本研究结果为后续在蛋白水平上解析Al PLC的功能奠定基础。
关键词： 绿盲蝽 磷脂酶C 原核表达 蛋白纯化 酶学特性 酶活性
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凤梨草莓与绿色草莓种间杂种一代的形态学观察及SSR分析
《果树学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：【目的】利用形态学特征与分子标记分析相结合的方法,有效地对绿色草莓与凤梨草莓杂交后代进行种间杂种真实性鉴定和遗传多样性分析。【方法】以八倍体栽培草莓品种‘宁玉’为母本、二倍体野生绿色草莓为父本进行种间杂交,获得了30个F1代株系,从40对SSR标记引物中筛选出父母本有差异条带的引物进行后代杂种真实性鉴定。采用UPGAM聚类法进行亲本与子代的聚类分析,结合形态学特征比较,评价子代遗传特征。【结果】对父母本、F1代主要形态学特征的调查分析结果表明,F1代所有植株的长势强于父本,偏母本;对数量性状中亲优势值的数据统计结果表明,后代具有一定的杂种优势。用筛选出的20对引物鉴别父母本,二者有差异,利用其进行后代分析,其中12对引物鉴定出30个后代均具有父本扩增片段,结果表明,30个杂交后代均为绿色草莓与栽培草莓的真杂种。同时,从杂种扩增的谱带来看,某些后代出现了变异,主要表现为新谱带的出现或某些谱带的消失。进一步对亲本与子代之间遗传关系进行分析,结合形态学特征与UPGMA聚类分析结果,可将子代分为3个大类。【结论】通过形态学与SSR标记技术鉴定出所有杂交后代均为种间真杂种,聚类分析表明了后代具有遗传多样性,筛选出的12对SSR引物为二倍体野生绿色草莓资源杂交后代鉴定与遗传多样性分析提供了丰富的筛选标记。
关键词： 绿色草莓 凤梨草莓 SSR标记 形态性状 杂种鉴定
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改进CERES-Rice模型模拟覆膜旱作水稻生长
《农业工程学报 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：覆膜旱作是节水稻作生产体系的重要措施之一,采用CERES-Rice模型模拟覆膜旱作水稻生长需另外考虑覆膜的增温效应和根系层土壤水分布差异及由此所带来的影响。该文借鉴部分旱地作物的相关研究成果,对原CERES-Rice模型中的积温和土壤温度、蒸发和土壤水分胁迫等模拟计算过程进行了改进,并进一步通过2个水稻生长季的田间试验予以验证。试验于2013、2014年在湖北房县进行,共涉及淹水(对照)、覆膜湿润栽培和覆膜旱作共3个水分处理,采用原模型和改进模型分别对2个生长季、2个覆膜处理的生育期、叶面积指数与地上部干物质质量的变化过程及产量进行模拟。结果表明:原CERES-Rice模型难以准确刻画覆膜旱作水稻的生长发育过程,经改进后,模拟效果大大改善,可有效反映环境变化(水分、温度)对覆膜水稻生育进程的影响和产量形成,维持生育期与产量模拟的相对误差在15%以内;覆膜水稻叶面积指数的动态模拟基本满足要求,其均方根差≤1.54 m~2/m~2、相对均方根差≤27%、建模效率≥0.85;对覆膜水稻地上部干物质质量变化过程的模拟也呈现出较好的效果,均方根差和相对均方根差分别小于1 490 kg/hm~2、16%,建模效率则高于0.95。总体而言,经改进后的CERES-Rice模型基本可满足要求,较好地用于模拟覆膜旱作水稻的生长发育规律。
关键词： 土壤 模型 数值方法 覆膜旱作水稻 CERES-Rice模型 水稻生长发育
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发酵床网养在肉鹅完全舍内饲养的应用研究
《中国家禽 》 2017 北大核心
摘要：为研发肉鹅舍内养殖新技术,避免传统水禽生产造成的公共水体污染问题,研究开展了肉鹅的发酵床网上养殖试验,并与地面发酵床平养在舍内环境因子、生产性能和经济效益方面进行了对比。试验期为70 d。结果显示:随着肉鹅生长,舍内空气质量逐渐下降;同一采样时间点,气载活菌数、空气脂多糖浓度以及粉尘含量,发酵床网养均显著或极显著低于地面发酵床平养(P<0.05或P<0.01)。出栏时,发酵床网上养殖鹅群死亡率为4.13%、体重变异系数为10.67%,分别低于地面发酵床平养的6.16%和13.57%,且前者净利润率高出发酵床平养9.47个百分点。研究表明:在较低的饲养密度下,发酵床网上养殖模式能提供更好的养殖环境,可成为肉鹅旱养的一种新模式。
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化肥施用量对基质栽培樱桃番茄产量品质的影响及基质重茬利用效果
《江苏农业科学 》 2017 北大核心
摘要：通过2批次田间试验,研究不同化肥施用量对猪发酵床垫料基质栽培樱桃番茄当季及重茬栽培番茄果实品质、器官氮、磷、钾元素含量的影响。结果表明,适量施肥可提高产量,增加番茄可溶性固形物、可溶性蛋白和维生素C含量,促进各器官尤其是根系对N、P、K元素的吸收。过量施肥增产效果不显著,可溶性固形物和维生素C含量显著降低,且硝酸盐含量随施肥量增多不断积累。与新基质相比,连续2季重茬栽培对番茄产量与植株生物量影响不显著;但前茬栽培施肥量对重茬栽培有较大影响,前茬高肥并不能对番茄产量产生持续促进作用。综合考虑试验结果,以15 L/株基质栽培樱桃番茄推荐N、P_2O_5、K_2O追肥量为20、10、30 g;在合理的施肥条件下,连续2茬基质栽培樱桃番茄无需消毒处理过程。
关键词： 化肥施用量 发酵床 垫料基质 重茬栽培 樱桃番茄 产量品质
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响应面试验优化红花籽油水酶法提取工艺
《食品科学 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：通过二水平因子分析设计和响应面试验,优化水酶法提取红花籽油工艺。以红花籽油提取率为指标,对酶的种类及添加比例、料液比、总加酶量、酶解时间、酶解温度、酶解p H值进行研究。结果表明:在木聚糖酶UTC-X50、果胶酶NCB3/ZG-040和碱性蛋白酶NCB3/ZG-002比例1∶2∶3(酶活比),总加酶量197.36 U/g,料液比1∶4(g/mL)条件下,先用细胞壁多糖酶(木聚糖酶、果胶酶)在p H 4.2、50℃酶解131 min,再用碱性蛋白酶在p H 9.8、40℃酶解60 min,此工艺条件下红花籽油提取率最高,为84.68%;采用气相色谱法分析脂肪酸组分,发现红花籽油中不饱和脂肪酸相对含量高达91.18%,其中亚油酸相对含量为78.27%,油酸相对含量为12.61%,亚麻酸相对含量为0.10%。
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日粮添加地衣芽孢杆菌对仔猪发酵床垫料理化性质及微生物群落的影响
《农业环境科学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：试验旨在研究发酵床饲养模式下,猪日粮中添加地衣芽孢杆菌对发酵床的理化性质和微生物群落的影响。分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+杆菌肽锌+硫酸黏杆菌素(抗生素组)和基础日粮+地衣芽孢杆菌(益生菌组)的试验日粮。结果表明:饲粮中添加地衣芽孢杆菌能显著提高发酵床垫料蛋白酶活性(P<0.05),对垫料脲酶活性和铵态氮含量无显著影响(P>0.05);试验第15 d时,抗生素组的垫料放线菌数量显著低于对照组(P<0.05);第35 d时,益生菌组的芽孢杆菌数量显著高于其他组(P<0.05);第49 d时,益生菌组的芽孢杆菌数量显著高于抗生素组(P<0.05),抗生素组的葡萄球菌数量比对照组显著降低(P<0.05);益生菌组、抗生素组的大肠杆菌低于对照组,抗生素组的细菌总数、芽孢杆菌数量低于对照组,但差异均不显著(P>0.05),饲粮抗生素一定程度上减少了垫料益生菌,但能有效减少垫料病原菌;各处理组间,垫料微生物DGGE的香农-威纳指数、均匀度均无显著差异(P>0.05)。饲用地衣芽孢杆菌显著增加垫料中芽孢杆菌分布数量,提高垫料中垫料蛋白酶活,没有显著影响垫料细菌多样性指数,一定程度上提高粪便原位降解效率。
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乡村旅游发展的演化机理与案例研究
《江苏农业学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：本研究通过理论和实践构建了乡村旅游概念体系,探讨其演化机理,对南京市六合区竹镇镇进行案例实证研究。认为乡村旅游概念体系由观光农业、休闲农业、创意农业3个由低到高的概念组成,其演化机理是以经济发展为基础,市场需求为导向,创意为核心,产业融合为特征,驱动乡村旅游发展逐步升级、演化。结合中国乡村旅游的演化历程、发展模式和层次间关系及南京市六合区竹镇镇乡村旅游发展,认为目前乡村旅游发展存在着不平衡性,各地在构建乡村旅游模式时,应按照其内在发展规律,根据当地的经济发展水平和市场需求,因地制宜,利用当地特色,融合传统文化、科技等创意元素,建设乡村旅游项目。同时建议该镇在发展乡村旅游的过程中,加强创意人才的引进和培训,利用创意,统一策划和包装乡村旅游项目,凝炼各项目点主题,通过创意,增加项目的吸引力,驱动乡村旅游的持续发展。
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