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感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价

植物研究 2013 北大核心 CSCD

摘要:为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your Own"Mate&PlateTM"Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。

关键词: 香蕉束顶病毒 香蕉叶片 酵母双杂交cDNA文库

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不同培养基成分对铁皮石斛组织培养的影响

中国农学通报 2013 北大核心 CSCD

摘要:以铁皮石斛无菌苗的茎段作为外植体,讨论MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛的诱导、增殖、分化以及生根的影响。结果表明:最适合铁皮石斛原球茎诱导的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA1.5mg/L,原球茎诱导率为95%;最适合原球茎增殖的培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA1mg/L;最适合原球茎分化的培养基为MS+6-BA5mg/L+NAA1mg/L,其分化率达80%;最适合铁皮石斛根诱导的培养基为MS+IBA1.5mg/L+香蕉泥100g/L,其生根率为100%。

关键词: 铁皮石斛 组织培养 植物激素

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螺旋粉虱感染蜡蚧轮枝菌对其保护酶和解毒酶活性的影响

植物保护 2013 北大核心 CSCD

摘要:测定了螺旋粉虱3龄若虫在感染蜡蚧轮枝菌后几种保护酶和解毒酶的活性变化情况。结果表明,螺旋粉虱在感染蜡蚧轮枝菌后不同时间其体内保护酶和解毒酶的活性会产生一定程度的变化。螺旋粉虱的SOD、GST和EST比活力在感染36h后达到最大值,显著高于同期对照组的比活力,分别为对照组的1.21、1.27倍和1.47倍;感染后36h和48h,CAT的比活力显著高于对照组的比活力;而感染后不同时间的POD及MFO比活力差异不显著,与对照组的比活力也无显著性差异。初步判断,螺旋粉虱感染蜡蚧轮枝菌后,其体内的防御机制与SOD、CAT、GST及EST活性有一定的相关性,与POD和MFO活性关联不大。

关键词: 螺旋粉虱 蜡蚧轮枝菌 免疫系统 过氧化氢酶 酯酶

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菠萝粉蚧种类调查及发生规律研究

热带作物学报 2013 CSCD

摘要:菠萝粉蚧是为害菠萝的粉蚧的统称,是菠萝凋萎病的主要传播媒介,本文对我国菠萝粉蚧的种类和发生规律进行了研究。结果表明:在我国,为害菠萝的粉蚧主要是菠萝洁粉蚧,仅在海南乐东菠萝园发现有新菠萝灰粉蚧危害;菠萝洁粉蚧目前仅限在菠萝上为害;新菠萝灰粉蚧主要为害剑麻,也为害菠萝和粉蕉;我国暂未发现2种粉蚧混合发生的现象。秋季是雷州半岛地区菠萝洁粉蚧自然种群快速增长期,12月下旬菠萝洁粉蚧自然种群数量进入高峰期;气温和降雨量是影响菠萝洁粉蚧自然种群增长的重要因子,高温、低温均不利于菠萝洁粉蚧生长和繁殖,降雨量对菠萝洁粉蚧的自然种群数量具有明显的抑制作用。

关键词: 菠萝粉蚧 菠萝洁粉蚧 气温 降雨量 种群动态

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应用EST-SSR分析国外种质作为亲本在中国橡胶树杂交育种中的贡献

热带作物学报 2013 CSCD

摘要:利用57对EST-SSR引物分析了21份国外引进品种和67份中国自育品种的遗传多样性,旨在从基因组水平阐明国外种质与中国自育橡胶树品种的遗传关系,揭示国外优异种质对我国橡胶树育种的遗传贡献。结果表明,57个EST-SSR位点共检测到265个等位基因,国外引进品种和中国自育品种的平均等位基因数分别为3.701 8和4.350 9。国外品种中检测到16个特有等位基因,而中国自育品种中检测到53个。综合系谱分析、聚类分析和PCO分析发现,PR107、RRIM600、GT1和PB86等作为杂交亲本,在中国橡胶树杂交育种中发挥着重要作用,但同时遗传基础狭窄也是制约我国橡胶树育种的重要因素。

关键词: 橡胶树 引进品种 选育品种 EST-SSR标记

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施用拮抗菌饼肥发酵液和土壤消毒剂对香蕉枯萎病病区土壤细菌群落的影响

微生物学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:【目的】探明施用拮抗菌饼肥发酵液与土壤消毒剂对香蕉枯萎病的防控效果及对土壤微生物的影响。【方法】在大田栽培条件下,采用Biolog和T-RFLP的方法研究了各处理在不同时期土壤微生物细菌的功能多样性及群落特征。【结果】结果表明,施用拮抗菌饼肥发酵液和土壤消毒剂均显著降低了香蕉枯萎病的病情指数,以两者配合施用防病效果最高,达60.82%。Biolog Eco微平板研究发现,施用拮抗菌饼肥发酵液可提高土壤微生物的AWCD及种群均匀度,施用土壤消毒剂显著降低了土壤微生物种群的丰富度和均匀度;主成分分析表明,土壤微生物利用碳源的种类在香蕉整个生长季呈增加的趋势,其前期主要利用碳源为氨基酸类、羧酸类、双亲化合物、糖类,后期主要增加了羧酸类和双亲化合物类碳源。T-RFLP分析土壤细菌多样性发现,施用拮抗菌饼肥发酵液处理的细菌TRFs片段最高,分析优势种群发现,增加的种类主要有黄秆菌属(Flavobacterium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、乳酸秆菌(Lactobacillus)等。【结论】拮抗菌饼肥发酵液配合土壤消毒剂施用,可在降低土壤中病原菌的基础上,增加土壤拮抗微生物的种类,提高土壤微生物细菌的多样性,改善土壤微生物生态结构,最终达到提高香蕉枯萎病防病效果的目的。

关键词: 香蕉枯萎病 发酵液 土壤消毒剂 土壤微生物群落 Biolog T-RFLP

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中国方颜叶蜂属黑体种团两新种(膜翅目,叶蜂科)

动物分类学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:记述中国方颜叶蜂属黑体种团Pachyprotasis melanosoma group 2新种,马氏方颜叶蜂Pachyprotasis mai sp.nov.和西北方颜叶蜂Pachyprotasis xibei sp.nov.,并编制了黑体种团已知种分种检索表。

关键词: 方颜叶蜂属 黑体种团 新种 中国

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木薯小孢子母细胞减数分裂观察及花粉加倍技术研究

热带作物学报 2013 CSCD

摘要:利用2n配子途径实现有性多倍化是植物遗传改良的一种有效途径,人工诱导植物2n配子是克服天然2n配子比率低及难于利用的有效方法。本研究对木薯花序发育过程的小孢子母细胞减数分裂进行观察,以掌握木薯小孢子母细胞分裂过程中加倍的有效时期与花序发育及花蕾的外部形态特征的相关性,采用秋水仙素溶液棉浸法对木薯花序进行诱导,获得了加倍2n花粉。结果表明:当幼嫩花序长度约1.5~2.5 cm时,侧生小花梗开始出现,雄花蕾直径约1.0~1.5 mm时,木薯小孢子母细胞进入减数分裂前期Ⅰ至中期Ⅰ;该期采用0.3%秋水仙素+1%二甲基亚砜(DMSO)处理花序4~5 d,可获得2n雄配子,最高诱导率可达12.56%。

关键词: 木薯 2n配子 减数分裂 秋水仙素

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基于物候特征参数的橡胶树种植信息遥感提取研究

中国农学通报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为了更好地监测橡胶树的生长状态,客观准确地获取橡胶树的种植的地理位置信息,采用非对称高斯函数对海南岛内MODIS EVI时间序列数据进行滤波处理,定义作物物候特征参数并计算海南岛每个像元的特征参数值;统计分析基于MODIS EVI数据的海南岛橡胶树样区作物关键物候特征参数值变化规律;根据橡胶树样区特征参数值变化规律建立海南岛橡胶树种植信息提取算法,提取结果采用不同比例的橡胶树混合像元分类法表示。根据提取算法对海南岛2011年橡胶树种植信息进行提取,用验证数据对该提取算法进行精度检验与实用性评价,检验结果显示该算法的平均分类精度达85.97%,可以用来提取橡胶树种植信息。

关键词: 高斯函数 橡胶树 信息提取 海南岛

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香蕉内生拮抗细菌KKWB-5的几丁质酶在大肠杆菌中的表达纯化与复性研究

中国农学通报 2013 北大核心 CSCD

摘要:将香蕉内生拮抗细菌KKWB-5的几丁质酶在大肠杆菌中的表达,旨在检测该酶对香蕉枯萎病病原菌4号小种的抗性。PCR扩增该基因连入大肠杆菌表达载体pET22b,导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组菌株,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达,对目的蛋白进行纯化,并将纯化后的目的蛋白复性,对复性产物进行水解几丁质活性和拮抗香蕉枯萎病活性的分析。SDS-PAGE分析表明目的蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式大量表达,经变性Ni2+柱纯化得到了高纯度的重组蛋白,表达量达293 mg/L;稀释和透析2种复性方法中,透析复性法的目的蛋白得率较高,为84.6%。复性后的目的蛋白具有水解几丁质的活性,同时对香蕉枯萎病病原菌也具有一定的抗性,但抗性较弱。该几丁质酶在大肠杆菌中得到高效表达,且复性后的几丁质酶对香蕉枯萎病病原菌4号小种有一定的抑制作用,该酶对KKWB-5菌株拮抗香蕉枯萎病菌的能力有一定的贡献。

关键词: 拮抗细菌 几丁质酶 表达纯化 复性 活性分析

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