科研产出
iTRAQ蛋白质组学分析揭示西瓜响应CGMMV胁迫的蛋白质
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：黄瓜绿斑驳花叶病毒病（CGMMV）是一种危害西瓜生产的检疫性病害。为了在蛋白质水平研究西瓜对CGMMV的胁迫应答,本研究采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术对CGMMV接种前后的西瓜叶片进行蛋白质组学分析,获得参与CGMMV胁迫应答的差异表达蛋白质（DEPs）,并对DEPs进行KEGG功能分析;利用Cytoscape构建蛋白质-蛋白质互作（PPI）网络;应用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）验证蛋白质在CGMMV胁迫下的表达。结果共获得61个在CGMMV胁迫下的DEPs,包括核糖体蛋白、光系统PSⅠ和PSⅡ蛋白、ATP合成酶、NADH脱氢酶、热激蛋白HSP22.8、真核细胞翻译起始因子、蔗糖合成酶和乙烯响应因子等;KEGG功能分析表明DEPs参与光合作用、次生代谢物质生物合成和植物激素信号转导等代谢途径;PPI分析显示,48 h0 h、25 d0 h和25 d48 h分别有13、32和43个DEPs在CGMMV胁迫下参与已知的蛋白互作网络;RT-qPCR获得了SUS4、RPL22、NAD7、PSBH、Defensin-like protein 5、ATPF、LSP1和HSP22.8在CGMMV不同侵染阶段的表达模式。本研究结果获得了西瓜响应CGMMV胁迫应答的蛋白质,为后续明确西瓜响应CGMMV的分子机理奠定了一定基础。
关键词： 西瓜 CGMMV iTRAQ 蛋白质互作 RT-qPCR
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基因组DNA快速提取及在转基因大豆检测中的应用
《中国油料作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节。为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法。选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification, RPA）对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增。结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法。不过两种方法提取的DNA都能满足PCR和RPA的需要。利用DNA快速提取方法结合普通PCR、荧光RPA和荧光定量PCR对转基因大豆SHZD32-1进行实际检测,3种方法的检测结果一致,均能准确检出大豆SHZD32-1的转基因成分。
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含膳食纤维的儿童成长型营养肉松研制
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以猪后腿肉、柑橘纤维、胡萝卜粉为原料开发含膳食纤维的儿童成长型营养肉松。以感官评价得分为指标,通过单因素试验,考查煮制压力、煮制时间、炒松时间对肉松品质的影响,并通过正交试验对工艺参数进行优化。在此基础上,基于脂肪含量、膳食纤维含量和感官评价得分,确定柑橘纤维和胡萝卜粉的添加量。结果显示:基于感官评价得分,优化的工艺参数为:煮制压力40 kPa,煮制时间40 min,炒松时间50 min。炒松结束后,每100 g物料可添加柑橘纤维4 g和胡萝卜粉10 g。按此工艺参数制得的肉松呈金黄色,絮状,肉质松软,甜咸适中,有浓郁肉香,脂肪含量为13.1%,膳食纤维含量为3.54%。
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基于FTIR技术快速测定食用油中叔丁基对苯醌含量的研究
《中国粮油学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：研究傅里叶红外光谱技术(FTIR)快速测定食用油中叔丁基对苯醌(TBBQ)含量的分析方法,系统地比较了 FTIR结合朗伯比尔定律法及FTIR结合偏最小二乘法(PLS)的建模效果.结果表明,原始波谱经差谱和二阶导数预处理后在1 656 cm-1处采用朗伯比尔定律法建模,所得的线性回归方程为TBBQ(μg/mL)=1 089.5Abs-11.35,相关系数R2为0.998 1,15组煎炸油和10组市售食用油的外部验证实验的平均相对偏差分别仅为4.89%和6.80%.采用FTIR结合PLS法对原始波谱建模,建模区间为1 675-1 645 cm-1,模型相关系数R2为0.995 6,校正均方差为0.57,预测均方差为3.32,15组煎炸油和10组市售食用油的外部验证实验的平均相对偏差分别为8.53%和8.40%,说明基于FTIR的朗伯比尔定律法和PLS法均能有效测定食用油中TBBQ含量,其中朗伯比尔定律法预测准确度较高、模型稳定性更好.
关键词： 傅里叶红外光谱(FTIR);建模;预测;食用油;叔丁基对苯醌(TBBQ)
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山核桃仁碱法脱涩工艺研究
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探索一种利用NaHCO3对山核桃仁脱涩的碱法脱涩工艺,基于综合了脱涩率与感官评分的响应值,通过单因素试验和响应面试验优化其工艺参数,并对比碱法脱涩与传统的沸水脱涩对山核桃仁游离酚、结合酚含量,以及过氧化值、碘值、酸价等指标的影响。结果显示:优化后的碱法脱涩工艺参数为脱涩温度65℃,脱涩时间100 min, NaHCO3质量分数5%,固液比(g·mL-1)1∶15。在此条件下,山核桃仁的脱涩率为92.04%,感官评分为9.2分,响应值为75.47。与沸水脱涩相比,碱法脱涩既能去除苦涩味,又能更大限度地保留山核桃仁中的结合酚,减少油脂、脂肪酸和不饱和脂肪酸的氧化,从而更好地保持山核桃仁的品质。
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青海高原油菜蜜稳定同位素产地特征与环境响应机制研究
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探究青海油菜蜜稳定同位素特征及影响因素,本研究利用元素分析-稳定同位素比率质谱（EA-IRMS）建立了油菜蜜总δ13C值及其内源蛋白质δ13C、δ15N、δ2H、δ18O值的检测方法,分析了青海不同产地、不同年份油菜蜜及其内源蛋白质同位素特征差异,探讨了油菜蜜内源蛋白质稳定同位素与产地环境之间的关系。结果表明,青海省区域内油菜蜜内源蛋白质的δ13C值和δ15N值较稳定,不同产地、不同年份间无显著差异;不同年份油菜蜜内源蛋白质的δ18O值差异极显著（P<0.01）,不同产地油菜蜜内源蛋白质的δ18O值及δ2H值均存在极显著差异（P<0.01）。在环境影响因素中,油菜蜜内源蛋白质δ18O值与生产季节降水量呈显著负相关（r=-0.822,P<0.05）。本研究结果为青海高原油菜蜜真实性鉴别与产地溯源研究提供了理论依据与技术支撑。
关键词： 油菜蜜 内源蛋白质 稳定同位素分析 产地环境因子 分馏响应机制
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8个杂交柑橘品种的糖酸组分含量及特征研究
《果树学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确8个新兴杂柑品种的糖酸组分及甜酸风味特征,为柑橘的品质评价及品种选育提供理论依据。【方法】分别采用离子色谱法和高效液相色谱法测定果实的糖、酸组成及含量,并以甜度值、甜酸比、糖酸比指标进行评价。【结果】可溶性总糖质量分数83.78～127.66 mg·g-1,蔗糖占总糖的41.54%～64.60%,葡萄糖与果糖含量接近。总酸质量分数6.28～10.70 mg·g-1,其中柠檬酸、苹果酸、莽草酸含量分别占总酸含量的45.58%～88.06%、7.84%～53.22%和1.14%～9.59%’;春香’’091沃柑’的苹果酸含量较高’,黄美人’的莽草酸含量最高’,红美人’的总甜度、甜酸比和糖酸比均为最高。以甜酸比、糖酸比对各品种品质评价排序较一致,固酸比偏差较大。【结论】’黄美人’’明日见’’甘平’的糖以己糖与蔗糖的形式共同积累,其余以蔗糖为主’;春香’和’091沃柑’的苹果酸和柠檬酸比例相近,其余以柠檬酸为主。建议以甜酸比或糖酸比为杂柑类品质评价指标。
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103个mcr质粒的结构与特征
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：黏菌素是治疗碳青霉烯类耐药菌感染的最后一线药物.然而,近年来在许多致病菌中发现质粒介导的黏菌素耐药基因mcr传播,降低了黏菌素的有效性,对公众健康构成了威胁.为探讨可能影响黏菌素耐药性传播的质粒特征,基于mcr质粒的完成图,共分析了2015—2018年GenBank收录的103个携带mcr的完整质粒序列.结果表明:质粒主要来源于中国,大肠埃希菌为主要携带者;IncI2和IncX4是最主要的复制子类型,IncHI2是携带有多个耐药基因质粒的优势复制子类型;sul3、aadA1与mcr基因在质粒中共存的概率最高.另外还发现,95.14%的质粒含有抗消毒剂或重金属抗性基因.除ISApl1外,IS26插入序列出现频率最高.18.45%的质粒具有接合转移元件,包括oriT、松弛酶(relaxase)、T4CP和T4SS.本文重点指出了耐药基因交叉抗性和重金属的共选择作用,为更好地控制黏菌素耐药性提供了思路.
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基于图像识别技术的金针菇表型高通量采集与分析
《菌物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：金针菇Flammulina filiformis作为国内产销量大、工厂化生产程度高的食用菌种类之一,其育种工作因表型信息采集效率低下而受到限制。本研究以金针菇子实体可见光图像为信息来源,基于育种工作对表型信息的需求,利用图像识别技术和深度学习模型,提出了金针菇高通量表型信息采集分析方法,并开发了相应分析系统软件。利用该套方法结合金针菇子实体的可见光扫描图像,可以自动化大批量计算金针菇子实体的菌盖形状、面积、着生位置、颜色和菌柄长度、宽度、颜色等表型信息。本研究提出的金针菇表型采集与分析方法操作便捷,能大幅减少观测误差,提高表型信息可靠性,提升育种工作效率,可一定程度上应用于其他外形相近的食用菌或作物育种工作;同时获得的数据有助于金针菇表型信息的定量化分析和标准化表型数据集的建立。
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神经肽FF在小黄鱼(Larimichthys polyactis)性腺发育早期的表达与定位分析
《海洋与湖沼 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：神经肽FF是属于RFamide相关肽家族中的一种八肽,在多种生物过程中具有调节功能。本文开展了小黄鱼（Larimichthys polyactis）神经肽FF相关基因（LpNPFF:AccessionNo.MT012894）的组织表达与定位分析研究。实时荧光定量PCR结果显示,小黄鱼神经肽FF基因在性未成熟期（第Ⅱ期）的小黄鱼的脑和性腺中表达较高,其次是肌肉和脾脏,在胃和肠中表达相对较少;原位杂交结果显示,在小黄鱼中脑的视顶盖（OTec）、圆环体（TL）、结节前核（NAT）、外侧结节核（NLT）、下丘脑弥散核（NDLI）以及延脑（MO）中检测到大量LpNPFF mRNA阳性的细胞,而端脑和小脑部分的表达较少。同时,在小黄鱼第Ⅱ期卵巢细胞的细胞质和核仁中也能观察到明显的阳性信号;免疫组织化学结果显示,在小黄鱼脑部表层细胞和卵巢壁周围的结缔组织中可见明显的RFamide免疫阳性纤维。上述研究结果有助于神经肽进化的深入研究,也为进一步探索NPFF相关基因在生殖调控方面的潜在功能提供了新的思路。
关键词： 小黄鱼（Larimichthys polyactis） 神经肽FF（neuropeptide FF） 组织表达与定位
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