科研产出
香蕉分化芽BBTVDAS-ELISA检测方法的建立和应用
《植物保护 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了解海南海口香蕉分化芽携带香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)的情况,本研究建立了双抗夹心酶联免疫反应(DAS-ELISA)检测法,对来自海南地区组培厂的香蕉分化芽进行检测。检测结果表明,6个品种1 852个香蕉分化芽平均带毒率为2.1%,其中‘皇帝蕉’为1.98%,‘粤科1号’为2.07%,‘广粉蕉’为1.98%,‘大蕉’为6.25%,‘218’为1.89%,‘巴西蕉’为2.25%。为了进一步验证ELISA结果的可靠性,随机选取12个阳性样品提取总DNA进行PCR鉴定。鉴定结果显示,12个样品中11个检测出有BBTV,表明DAS-ELISA方法的准确率较高,与分子检测结果基本一致,可以胜任日常香蕉组培苗BBTV的检测。
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富硒益生菌对罗非鱼幼鱼生长和抗氧化水平的影响
《动物营养学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究富硒益生菌对罗非鱼幼鱼生长及抗氧化水平的影响。试验选取600尾罗非鱼幼鱼,随机分为5组,每组设3个重复,每个重复随机放养初始体重为(12.40±0.13)g的罗非鱼幼鱼40尾。其中,对照组饲喂硒含量为0.257 mg/kg的基础饲料,其他4组分别饲喂在基础饲料中添加由富硒酵母菌、酵母菌、乳酸菌组成的富硒益生菌的试验饲料。4种试验饲料中富硒酵母菌的添加量折算为硒添加量分别为0(A组)、0.4(B组)、0.6(C组)、0.8 mg/kg(D组),乳酸菌的添加量均为3.04×105CFU/g,并通过调节酵母菌添加量使4种试验饲料中添加的总活菌数相同。试验期为70 d。结果表明:D组和C组分别在第50~60天和第60~70天阶段表现出最高的特定生长率,并均显著高于对照组(P<0.05)。C组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性在第30天和第50天均显著高于A组(P<0.05);对照组血清GPx活性在第60天显著低于其他各组(P<0.05)。在第30天,血清过氧化氢酶(CAT)活性以C组最高、A组最低,各组间均差异显著(P<0.05);对照组血清CAT活性在第60天显著低于A组、B组和C组(P<0.05)。C组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性在第30天和第50天显著高于其他各组(P<0.05)。各组罗非鱼的肝脏谷胱甘肽过氧化物酶1(G Px1)mRNA相对表达量均随饲养天数的延长呈现出上升态势,至第50天达到最高值后开始呈下降的趋势。在第50天,A组和C组的肝脏GPx1 mRNA的相对表达量显著高于其他各组(P<0.05),且以C组的值最高。由上述结果可知,在含硒0.257 mg/kg的基础饲料中添加0.6 mg/kg的富硒益生菌(以硒计)可促进罗非鱼幼鱼(体重12~55 g/尾)的生长,提高其抗氧化水平。
关键词： 富硒益生菌 罗非鱼 生长 GPx1 mRNA相对表达量 抗氧化水平
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PCR快速鉴定毕赤酵母重组子几种模板制备方法的比较
《黑龙江畜牧兽医 》 2014 北大核心
摘要：为了筛选出简单、快速、准确、稳定的毕赤酵母重组子鉴定技术,试验采用直接法、微波炉煮菌液法、煮-冻-煮法、端粒酶(TE)/0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液处理菌体法、Lysis Buffer处理菌液法和蜗牛酶处理菌液法6种方法制备毕赤酵母重组子DNA模板,进行PCR扩增效果的比较研究。结果表明:TE/0.1%SDS溶液处理菌液法和Lysis Buffer处理菌液法制备的酵母重组子DNA模板进行PCR可取得理想的结果;其他4种方法制备的酵母重组子DNA模板PCR结果不稳定。说明TE/0.1%SDS溶液处理菌液法耗时短、试剂简易、操作过程简便,且鉴定结果稳定,可以作为PCR鉴定毕赤酵母重组子DNA模板的首选快速制备方法。
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四种肉类保鲜新技术的研究现状与展望
《食品安全质量检测学报 》 2014
摘要：肉类作为机体摄取蛋白质的主要来源之一,其安全性和新鲜性一直深受食品生产者和广大消费者的密切关注。传统的保鲜技术在延长肉类保质期方面存在一定的局限性,单靠传统技术已经难以满足消费者获得高品质新鲜肉品的要求,因此亟待提出新型的保鲜技术进一步改进传统的保鲜技术。本文从保鲜机制、保鲜应用、研究现状与展望等方面出发,对国内应用较少的冰温保鲜、活性包装保鲜、超高压保鲜、生物保鲜剂保鲜等四种保鲜技术进行了阐述,期望为进一步研究新型保鲜剂技术和扩大它们在食品工业中的应用提供重要的理论基础。
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鹅细小病毒NS1蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立
《中国动物传染病学报 》 2014
摘要：本研究克隆了鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)佛山株(Foshan-2009)的NS1基因,并将其克隆至原核表达载体p ET32a(+),构建重组质粒p ET32a-NS1。经转化,IPTG诱导表达及SDS-PAGE和Western blot分析表明,NS1蛋白得到了表达,并且能与抗GPV的番鸭血清发生特异性反应。通过棋盘法确定NS1蛋白包被量为0.5μg/孔,待检血清1:50稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1:10 000倍稀释时ELISA反应条件最佳,并确定阴阳性临界值为0.399。该ELISA方法特异性强,与番鸭细小病毒、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、新城疫病毒和鸭疫里默氏杆菌的阳性血清均无交叉反应;重复性好,批内和批间重复试验的变异系数分别小于5%和10%;检出率高,GPV阳性番鸭血清的检出率为92%。本研究所建立的间接ELISA方法为鹅细小病毒的血清学诊断和流行病学监测奠定了基础。
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菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用
《植物保护 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：菠萝凋萎相关病毒-1(Pineapple mealybug wilt associated virus-1,PMWaV-1)是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物,建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为y=-3.307×log x+38.18,相关系数r2为0.998。试验结果表明,该方法能特异性地检测PMWaV-1,对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应;最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1.98%,是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。
关键词： 菠萝凋萎相关病毒-1 TaqMan探针 实时荧光定量RT-PCR 检测
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一株感染家蚕的高致病性白僵菌的鉴定及在僵蚕生产中的应用
《蚕业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：僵蚕是传统中药材,筛选对家蚕具有高致病性的球孢白僵菌用于提高规模化生产僵蚕的产量和品质。从蚕区采集的僵蚕虫体分离纯化到一株高致病力的白僵菌,通过形态学鉴定和rRNA ITS序列系统发育分析,确定该菌株为球孢白僵菌(Beauveria bassiana),命名为Beauveria bassiana JC-1。优化该菌株应用于僵蚕生产中的接种菌液浓度为1×106~5×106mL-1,用此浓度的菌液喷洒接种5龄起蚕后5~6 d,幼虫大量死亡,僵化率达90%以上,万头蚕可生产僵蚕约5 kg。利用该菌株感染家蚕收获所得僵蚕的各项质量指标均符合《中国药典》中的有关标准,且僵蚕的总灰分和酸不溶性灰分含量较市售僵蚕更低。初步认为该菌株在僵蚕的标准化、规模化生产中具有应用价值。
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关于广东“谁来种地、怎么种地”的问题探讨
《南方农村 》 2014
摘要：近年来,随着大量农村剩余劳动力转移,广东农业种地兼业化、人口老龄化趋势加剧,集中表现为:农业生产布局缺乏统筹规划、供需对接不足;种地主体以兼业农户为主、专业化程度不高;生产单位以小规模农户经营为主、规模效益有限;农业生产条件落后、农业劳动强度大等。亟待通过"生产精准化"提高农业效益,通过"农民职业化"培育现代农业经营主体,通过"农田高标准、规模化"提高农业生产效率,以及通过"装备现代化"改造传统农业生产方式等多举并下,破解种地难题。
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