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江苏省3个番茄种植基地枯萎病菌种群数量监测及生防菌B1619的控病效果

西南农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为明确生防细菌B1619对番茄枯萎病的田间防治效果,分离鉴定了江苏省铜山、溱潼和沭阳3个番茄种植基地枯萎病菌的种类,检测了番茄全生育期土壤中枯萎病菌的种群数量变化。结果表明,分离获得的枯萎病菌分别属于镰刀菌属的3个种,它们出现的平均频率分别为:尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum为74.5%;茄病镰刀菌F.solani为21.3;轮枝镰刀菌F.verticillioides为4.2%。尖孢镰刀菌是引起番茄枯萎病的优势种群。3个番茄种植基地番茄全生育期枯萎病菌种群数量消长规律基本一致,番茄枯萎病菌数量在番茄定殖后迅速繁殖,盛果期达到最大值,采收后数量开始下降。在番茄定植时用生防菌B1619处理土壤后,枯萎病菌的数量明显比未处理过的对照低,在盛果期枯萎病菌的种群数量平均下降了43%,说明生防菌B1619对番茄枯萎病菌的生长繁殖具有较好的抑制作用。在3个番茄种植基地开展了生防菌B1619防控番茄枯萎病田间试验示范,结果显示,用生防菌B1619处理土壤后,铜山基地的番茄枯萎病发病率为1.5%(对照17.8%);溱潼基地没有发病;沭阳基地的发病率为0.1%(对照52.3%)。生防菌B1619具有开发成防治设施茄科蔬菜枯萎病生物杀菌剂的潜力。

关键词: 番茄枯萎病菌 尖孢镰刀菌,种群数量变化 生防菌B1619 控病效果

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江苏省养猪业科技需求现状分析与对策研究

江苏农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为了分析江苏省不同规模养猪场的科技需求特征,为养猪业科技供给与需求有效对接提供科学参考,采用问卷方式调研了江苏省苏北、苏中和苏南地区不同规模养猪场,统计分析了不同规模养猪场的养殖现状和科技需求特征。结果表明:养猪场规模越大对优良品种的需求越强烈;中小规模养猪场对饲料营养技术需求相对较弱,但对新型饲料配制技术需求迫切;不同规模养猪场对饲养管理与疫病防治技术都十分重视,但对废弃物处理技术需求意愿较低,且表现出明显的规模差异;中等规模及以下养殖场更倾向于不定期的科技人员入场指导,而大规模养殖场更期望通过产学研联合的方式获得科技扶持,可见科技扶持应当兼顾不同规模养猪场的需求差异。根据研究结果,对提升科技助推江苏省养猪业发展水平提出了相关对策建议。

关键词: 养猪业 规模养殖 科技需求

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亚致死浓度甲维盐胁迫对甜菜夜蛾幼虫解毒酶系活力及其相关基因表达量的影响

棉花学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为明晰几种重要解毒酶在甜菜夜蛾针对甲维盐抗性形成过程中的可能作用,本文研究分析了甲维盐处理后甜菜夜蛾幼虫体内主要解毒酶活力及其对应基因表达量的变化趋势。结果表明,在甲维盐(剂量为:LC5、LC20、LC50)胁迫72 h后,甜菜夜蛾体内多功能氧化酶(MFO)比活力及Se CYP450表达量均较对照极显著上升(P<0.01),且二者均随着处理浓度的增大而先上升后下降。同时,谷胱甘肽S-转移酶(GST)的比活力也呈现出相同的变化趋势。而Se GSTs与Se GSTs1在胁迫后的表达趋势与GST比活力的并不一致,Se GSTs表达量随着处理浓度的上升而极显著升高(P<0.01),而Se GSTs1则随着处理浓度的上升而下降。在3个亚致死浓度甲维盐处理下,酯酶(EST)比活力均被显著抑制(P<0.05),同样的趋势也反映在Se Car E表达量的显著变化上(P<0.05)。此外,MFO、EST的比活力变化趋势与其对应基因Se CYP450、Se Car E表达谱之间存在极显著相关性(P<0.01);而GST活力只与Se GSTs表达量具有极显著相关性(P<0.01),与Se GSTs1表达量之间则不存在显著相关性。因此,MFO、GST及其相关基因Se CYP450、Se GSTs、Se GSTs1有可能参与到甜菜夜蛾对甲维盐抗药性的演化过程中。

关键词: 甜菜夜蛾 甲维盐 酶活 表达量分析 杀虫剂胁迫

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鸭坦布苏病毒囊膜蛋白抗原表位的串联表达与抗原性分析

江苏农业学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:在对鸭坦布苏病毒囊膜蛋白抗原表位分析的基础上,将已经筛选出的8条抗原性良好的多肽采用柔性肽拼接,转入T载体中。将酶切回收的串联基因(命名为TEM)克隆于表达载体p ET32a中,获得重组表达质粒p ET32a-TEM,将该质粒转化于感受态细胞BL21(DE3)中,经IPTG诱导后进行超声裂解,对融合蛋白进行可溶性分析、Western blotting分析和免疫原性分析。重组质粒p ET32a-TEM的酶切和测序结果表明,TEM串联基因已成功插入到p ET32a原核表达载体中;表达的p ET32a-TEM融合蛋白分子质量约为38 000,以包涵体形式存在。Western blotting和小鼠免疫试验结果显示,p ET32a-TEM融合蛋白与鸭坦布苏病毒阳性血清能发生特异性反应,具有良好的抗原性。串联多肽的成功表达,将为鸭坦布苏病血清学检测方法建立、新型工程疫苗的研发奠定基础。

关键词: 坦布苏病毒 合成多肽 表达 抗原性

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苏南地区家庭农场发展的实例分析与对策建议

江苏农业科学 2015 北大核心

摘要:梳理了家庭农场的概念,分析了江苏省苏南地区联合型、设施租赁型、雇工型、循环型和粮油型5种类型的家庭农场在科技和政策方面的发展需求,并根据分析结果提出相应的对策建议:家庭农场的扶持政策必须先界定范围和规模,建立工商资本下乡从事农业生产的准入制度,防止工商资本下乡圈地从事其他行业或以家庭农场的名义骗取农业补贴,让国家有关的优惠政策真正惠及真正需要补贴的经营主体;同时,发展家庭农场必须建立土地规范流转的新机制,建立家庭农场发展的保障体系,完善社会化服务体系,推广政府建设生产设施移交给农民经营的新模式。

关键词: 苏南地区 家庭农场 实例分析 发展对策

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小麦种子高分子量谷蛋白亚基的高通量检测方法

分子植物育种 2015 北大核心 CSCD

摘要:为建立小麦种子高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)高通量检测方法,本研究改进了传统聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)中的样品制备和电泳分析方法,提高了检测效率。具体方法为:在小麦种子无胚端切取其体积的1/4~1/5,置于单孔容积为200μL的96孔PCR扩增板中,并在每个微孔中放入1粒直径2 mm的钢珠,并加入浸泡缓冲液静置1~2 h,再加入提取缓冲液,经高通量研磨器(Retsch Tissue Lyser)研磨后,在60℃的烘箱静置30 min。对微孔板离心和上清液预处理后在DYCZ-30C高通量垂直版电泳槽进行电泳分离,获得清晰的HMW-GS分离图谱。该方法简易、快速、成本低,适用于小麦标记辅助选择和资源评价中的大规模HMW-GS组成的检测。

关键词: 小麦 高分子量谷蛋白亚基 高通量检测

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不同日龄猪伪狂犬抗体的检测与分析

江苏农业科学 2015 北大核心

摘要:应用猪伪狂犬病毒gp I抗体检测试剂盒和猪伪狂犬病毒g B抗体检测试剂盒对某规模猪场的2~22周龄11个阶段的110份血清同时进行上述2种抗体检测,以掌握不同日龄猪伪狂犬野毒的感染情况并制定适合本场的猪伪狂犬的免疫程序。结果显示:该场不同日龄猪伪狂犬gp I抗体全部为阴性,仔猪伪狂犬的母源抗体可以维持到10周以上,说明目前场内采用10周龄进行猪伪狂犬疫苗的免疫接种方法是科学的。

关键词: 伪狂犬 gpI抗体 gB抗体 免疫接种

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潍坊某猪场一起伪狂犬病的诊治

畜牧与兽医 2015 北大核心

摘要:2014年9月山东潍坊某猪场发生疑似猪伪狂犬病疫情,采集病死仔猪的脑组织等,利用Vero细胞做病毒分离,并设计一对伪狂犬病病毒(PRV)g E基因片段的特异性引物对分离病毒进行PCR鉴定及家兔接种试验。结果表明:脑组织上清液接种Vero细胞后有典型的细胞病变;PCR扩增产物电泳后显示出990bp长的目的片段,目的片段基因序列与6株PRV毒株的g E基因序列核苷酸同源性在97.7%~100%之间,证实该病毒为PRV;分离病毒接种家兔出现典型的伪狂犬病症状。临床诊断结合实验室鉴定以及动物接种试验,确诊该病例为猪伪狂犬病。

关键词: 伪狂犬病病毒 分离 鉴定 诊治

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传染性法氏囊病病毒感染对鸡细胞模式识别受体及抗病毒基因转录的影响

中国预防兽医学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染对鸡细胞模式识别受体(PRRs)及天然免疫抗病毒基因转录的影响,本实验分别采用IBDV弱毒感染DT40细胞和强毒感染SPF鸡,以荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)检测感染细胞和法氏囊组织中PRRs(TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、MDA5和LGP2)及天然免疫抗病毒基因(IPS-1、IRF3、PKR、OAS、Mx)的m RNA转录变化。在IBDV感染DT40细胞的2 h到24 h内,ch MDA5、ch TLR3、ch LGP2、IRF3、PKR、OAS、Mx的转录水平显著上升,分别为324、22、61、29、16、225 000和18 700倍。当采用si RNA分别敲除DT40细胞中ch MDA5、ch TLR3和ch LGP2时,IPS-1、IRF3、PKR、OAS和Mx在IBDV感染后的2 h到24 h差异变化不显著。在IBDV感染SPF鸡法氏囊组织细胞中,ch MDA5和ch TLR3的表达显著降低,而ch LGP2表达无显著差异,IRF3、PKR、OAS和Mx的转录水平显著上升。TLR4和TLR7在IBDV的体外和体内感染试验中均未检测到,而IPS-1在IBDV的体外和体内感染试验中均变化不显著。本实验结果表明,ch MDA5、ch TLR3和ch LGP2在识别IBDV的感染中起着关键作用,IBDV感染严重抑制了PRRS ch MDA5和ch TLR3的转录,并且提示其抑制作用在体内与体外可能存在不同的分子机制。

关键词: 传染性法氏囊病病毒 模式识别受体 天然免疫

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大豆GmNAC011基因的分离及对异黄酮合酶基因GmIFS2的调控分析

华北农学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:通过对不同异黄酮含量品种大豆的转录组测序分析,发现GmNAC011基因在不同品种间的表达量存在显著差异。为了研究该基因的功能,根据大豆基因组序列设计引物,从大豆根系中克隆到GmNAC011基因完整的开放性阅读框(ORF)(Opening reading frame)序列,通过生物信息学对该序列进行分析,结果显示:该基因编码268个氨基酸,蛋白质分子量为31 k Da,理论等电点为8.3。进化树分析发现该蛋白与GmNAC2亲缘关系较近,属于NAC转录因子ATAF1亚家族。通过RT-PCR的方法分析了GmNAC011基因与异黄酮合酶基因GmIFS2在不同组织中的表达模式,结果显示GmNAC011与GmIFS2呈现相似的表达趋势,均为在花中表达量相对较低,而在根、茎、叶和荚中的表达量较高;通过酵母单杂交实验发现GmNAC011可以与GmIFS2基因启动子中的"CGTG"基序结合,这些结果说明了GmNAC011基因参与调控GmIFS2基因的表达,进而可以调控异黄酮的合成。

关键词: 大豆 转录因子 GmNAC011 异黄酮合酶基因

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