科研产出
鳗鲡疱疹病毒ORF8基因的克隆表达及转录时相分析
《大连海洋大学学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为研究鳗鲡疱疹病毒（Anguillid herpesvirus,AngHV）ORF8基因的特性,根据GenBank中AngHV参考株（NC013668）的ORF8序列设计引物,采取PCR方法从分离的AngHV福建病毒株（AngHV-FJ）基因组中扩增出特异性片段,克隆至pMD19-T载体,经酶切和测序验证,获得了ORF8的基因序列。结果表明:经生物信息学分析,ORF8编码的蛋白稳定性较好,存在跨膜结构且抗原表位多,符合病毒囊膜蛋白的特征;经转录时相分析,ORF8是病毒的早期基因（early gene, E）,可能在病毒感染的早期阶段就发挥作用;将ORF8克隆至表达载体pET-32a,转化入大肠杆菌E.coli BL21中,以IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE及Western blot检验,实现了ORF8在大肠杆菌中的高效表达,进一步通过割胶的方法获得了相对分子质量约为44 000的高纯度融合表达蛋白。本研究为下一步评价该表达蛋白的免疫效果和制备抗体,以及开发免疫诊断试剂和疫苗提供了研究基础。
关键词： 鳗鲡疱疹病毒 ORF8基因 转录时相 克隆 原核表达
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金花茶组叶片生化成分评价及其最佳采收期研究
《热带作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本研究以26份来源于6种金花茶组植物、不同表型防城金花茶和不同月份采收的防城金花茶的成熟叶片为材料,建立同时测定芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚4种黄酮成分的HPLC法,以及优化了测定茶多酚、总黄酮、总多糖和总皂苷成分含量的紫外分光光度法,基于以上8种成分含量,结合主成分综合评分和聚类分析的化学计量学方法,对不同来源金花茶叶片生化成分进行综合评价。结果表明:8种成分含量在不同来源金花茶叶片中存在差异,其中无名金花茶8种成分含量均较高,四季金花茶、防城金花茶次之;8年生1—12月份采收的防城金花茶叶片中,总皂苷、总黄酮和总多糖含量均表现为升-降-升-降的变化规律,并在10月含量达到最高;5年生不同种（S1～S14）主成分综合评分顺序为:无名金花茶>四季金花茶>防城金花茶（花蕾大、花多、不抗寒、花黄且大、尖果）>显脉金花茶>凹脉金花茶>小果金花茶;8年生不同月份（S15～S26）主成分综合评分顺序为:10月采>2月采>3月采>4月采>5月采>7月采>6月采>1月采>8月采>12月采>11月采>9月采,其中无名金花茶、四季金花茶及防城金花茶中花蕾大、花多、花黄且大等表型的金花茶叶片与2—4月份和10月份采集的8年生金花茶叶片的多指标综合评分排序位列前10;聚类分析结果将供试26份样品分为5类。综上所述,金花茶叶片的生化成分与金花茶植物种类和采收期有关,无名金花茶、四季金花茶和防城金花茶中花蕾大、花多、不抗寒、花黄且大的表现型的综合生化成分较高,初步确定防城金花茶叶片的适宜采收期为2—4月份和10月份,所建立的多指标定量结合化学计量学分析方法为金花茶组植物叶片的生化成分评价提供依据。
关键词： 金花茶组 多成分测定 化学计量学 品质评价 采收期
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沙门氏菌LAMP检测方法的建立及其在蔬菜栽培土壤中的应用
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】建立沙门氏菌可视化环介导恒温扩增体系（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）,并在快速检测蔬菜栽培土壤中应用,为蔬菜栽培土壤中沙门氏菌的防控提供技术支撑。【方法】根据沙门氏菌特有侵袭蛋白A （invA）基因序列设计可视化LAMP检测引物,并优化LAMP反应体系和反应条件,通过特异性试验、灵敏度试验和人工污染试验对LAMP检测方法进行验证,最后与国标检测方法对比检测蔬菜栽培土壤中沙门氏菌来验证该方法的准确性。【结果】优化后可视化LAMP检测方法,特异性试验结果显示除沙门氏菌的LAMP反应为阳性外,其余6个非沙门氏菌菌株的LAMP反应均为阴性,表明本LAMP检测方法具有良好的特异性;灵敏度试验结果显示本LAMP检测方法最低可以检测到7 CFU/25μL的沙门氏菌DNA;人工污染试验结果显示本LAMP检测方法灵敏度达4×102 CFU·g-1,与国标检测方法对比检测蔬菜栽培土壤中沙门氏菌具有相同的准确性,但检测时间从5～7 d缩短至8 h内。【结论】本研究建立了快速、准确、灵敏的可视化恒温扩增体系,可以应用于蔬菜栽培土壤中沙门氏菌的快速检测。
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一例鸡细小病毒、鸡传染性贫血病毒及鸡传染性支气管炎病毒共感染病例的检测
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】对福建省南平市某肉鸡场不明病因造成肉鸡死亡的病原进行确诊。【方法】通过对鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus, IBV）、腺病毒（Fowl adenovirus, FadV）、鸡细小病毒（Chicken parvovirus,ChPV）、新城疫病毒（Newcastlediseasevirus, NDV）、鸡传染性贫血病毒（Chickeninfectiousanemiavirus,CIAV）、传染性法氏囊病毒（InfectiousbursalDiseasevirus, IBDV）、喉气管炎病毒（Laryngotracheitisvirus,LTV）、禽肾炎病毒（Avian nephritis virus,ANV）等病原进行PCR检测,并对扩增片段进行克隆测序,利用生物信息学软件对测序结果进行分析。【结果】PCR检测结果及测序结果显示:鸡细小病毒ChPV、鸡传染性支气管炎病毒IBV、鸡传染性贫血病病毒CIAV为阳性,其余病原检测结果均为阴性。同源性分析结果显示分离株与ChPV的同源性为92.17%～100%,与IBV的同源性为76.9%～84.3%,与CIAV的同源性为91.19%～92.14%;遗传进化树分析结果显示分离到的IBV毒株及CIAV毒株均独处于一个单独的分支,分离到的ChPV毒株与广西参考株亲缘关系较近。【结论】从南平市某鸡场检测到ChPV、IBV、CIAV等3种病原的共感染病例,分离到的IBV毒株的S1基因及CIAV毒株的VP1基因可能已经发生变异。
关键词： 鸡传染性贫血病毒 传染性支气管炎病毒 鸡细小病毒 共感染
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百香果低温胁迫转录组及茉莉酸代谢基因分析
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为研究百香果低温胁迫响应机制,以紫果百香果（Passiflora edulia Sims）为试验材料在0℃下低温胁迫处理,以常温处理为对照组（CK）,采用Illumina HiSeq测序平台进行转录组测序,并对茉莉酸代谢相关基因进行挖掘。结果显示,共获得百香果转录组数据45.30 Gb,组装得到39 521条Unigene和5 311个差异基因;GO分类显示注释的Unigene分为细胞组件、分子功能及生物过程三大类,其中差异基因数量最多为生物过程大类的代谢过程,包括甾醇生物合成、类黄酮糖脂化、酪氨酸代谢、L-苯丙氨酸生物合成、软木脂生物合成、芥子油苷代谢及长链脂肪-酰基辅酶A代谢等。KEGG途径富集分析结果显示,核糖体途径、淀粉与蔗糖代谢途径、植物激素信号转导途径及植物与病原体互作途径为百香果响应低温胁迫的重要代谢途径。实时定量PCR（qRT-PCR）分析表明,百香果低温胁迫后其茉莉酸代谢途径相关基因AOC、AOS、JAR1、MYC2、PYL和JAZ均上调表达,该结果与测序获得FPKM值变化趋势较为相似,说明测序结果较为准确。但低温胁迫后,COI1的表达水平呈下调趋势。研究发现,在百香果中茉莉酸对低温胁迫的响应机制大体上与模式植物一致,关于COI1和MYC2等基因的调控方式还有待进一步功能验证。本研究结果为进一步明确百香果抗寒机制提供了科学参考。
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福建省规模化鸡场禽偏肺病毒感染情况的血清学调查
《动物医学进展 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：禽偏肺病毒（aMPV）是一种危害火鸡和鸡的新病原,为调查福建省规模化鸡场aMPV的感染情况,从福州市、莆田市、泉州市、漳州市、龙岩市和南平市18个规模化鸡场采集1 020份血样,用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行aMPV抗体检测。结果表明,所调查地区的鸡群均已感染aMPV,抗体平均阳性率为62.2%（634/1 020）,最高100%,最低为32.0%;蛋鸡和肉鸡均可感染aMPV,蛋鸡的抗体阳性率略低于肉鸡;商品代鸡群的抗体阳性率高于父母代;京红、海兰蛋鸡和本地鸡均可感染aMPV,其中本地鸡1的抗体滴度最高;aMPV抗体的log10滴度和抗体阳性率随着鸡群周龄的增长而逐渐升高。研究表明,所调查的福建规模化鸡场鸡群已经普遍感染aMPV,且感染较严重。
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HPLC法同时测定鼠尾草酸、鼠尾草酚和迷迭香酸的含量
《中国农业科技导报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨鼠尾草酸、鼠尾草酚和迷迭香酸同时测定的优化流程,对HPLC测定方法中的检测波长、精密度、稳定性、回收率等条件进行了筛选与优化。结果表明:迷迭香酸、鼠尾草酚、鼠尾草酸在5～100 mg·L-1的浓度范围内具有良好的线性,相关系数达到0.999以上,回收率分别为86.4%、85.6%和88.8%。针叶迷迭香（Rosmarinus officinalis"Pine"）叶片中鼠尾草酸(25 585 mg·kg-1)和鼠尾草酚(11 823 mg·kg-1)含量最高,大叶迷迭香叶片中迷迭香酸含量最高(7 572.67 mg·kg-1)。小叶迷迭香（Rosmarinus officinalis L.）茎中鼠尾草酸含量(1 570.00 mg·kg-1)、鼠尾草酚含量(1 603.33 mg·kg-1)和迷迭香酸含量(1 304.67 mg·kg-1)在4个迷迭香品种中最高。HPLC测定方法稳定、可靠且高效,可为迷迭香非挥发性成分的开发与利用提供理论依据。
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马铃薯叶片光合效率遗传变异分析及高光效种质筛选
《园艺学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以24份不同地理来源的马铃薯种质为试材,测定其叶片气体交换参数、瞬时羧化效率（CE）、气孔限制值（Ls）、内禀水分利用率（i WUE）和叶绿素含量（SPAD值）等8个光合性状,结合相关性分析、主成分分析和聚类分析方法,对参试材料进行了遗传变异分析与高光效种质筛选。结果显示,24份马铃薯种质间光合性状的差异显著,变异系数介于8.42%～25.21%,其中气孔导度（Gs）、蒸腾速率（Tr）、Ls和i WUE的变异程度较大,说明从马铃薯种质资源中筛选出高光效种质具有较大的可能性。广义遗传力（h2）分析表明,光合性状的h2变化范围为11.95%～83.69%,6个性状的h2超过60%,具有高水平的遗传力,其中SPAD值的h2最高,为83.69%。主成分分析和聚类分析表明,24份马铃薯种质资源根据光合效率强弱可分为3个等级,筛选到‘闽薯4号’‘闽薯7号’‘云薯108’‘云薯109’‘天薯10号’‘陇薯7号’‘N210’和‘龙薯9号’共8份高光效种质,这些种质可作为光合作用机制研究及高光效育种的材料。通过相关性分析发现,SPAD值与光合效率综合评价指数存在显著正相关（R=0.801**）,其可作为马铃薯高光效种质的初筛指标。
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基于Luenberger-Hicks-Moorsteen指标的福建省农业全要素生产率测度及收敛性分析
《南方农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】测算福建省农业全要素生产率（Total factor productivity,TFP）并判断其变动趋势,为促进区域协调发展及实现农业高质量发展提供科学决策。【方法】利用Luenberger-Hicks-Moorsteen（LHM）指标具备加性完备条件,基于自由处置壳（Free disposal hull,FDH）模型构造LHM TFP指标,将县域划分为一般县（市）、贫困县和发达市（区）,测度2003—2018年福建省全省及县域的农业TFP,并分解为技术效率变化、规模效率变化和技术进步,分析其收敛性特征。【结果】2003—2018年福建省农业TFP整体上呈增长趋势,2018年达0.840,年均增长率为5.731%;技术效率变化、规模效率变化和技术进步年均增长率分别为-1.231%、2.032%和4.930%,表明技术进步是TFP增长的主要驱动力,技术效率变化拉低TFP增长。从福建省一般县（市）、贫困县、发达市（区）的划分来看,各区域农业TFP及其分解指标与全省层面表现基本一致。福建省全省及一般县（市）、贫困县农业TFP存在σ收敛、绝对β收敛及条件β收敛,发达市（区）农业TFP不存在收敛趋势。TFP低的县（市）有追赶效应,城镇化、工业化对福建省全省及一般县（市）农业TFP收敛过程有促进作用,但工业化对贫困县农业TFP收敛具有抑制作用。【建议】积极发展适度规模经营,加快先进生产要素向农业园区集聚,提升农业科技创新能力;各县域应因地制宜,发达市（区）发挥技术引领与辐射作用,一般县（市）着重提升技术效率级规模效率,贫困县则要优化要素资源配置;加快形成功能互补的发展格局,推动先进生产要素向农业优势,实现农业劳均产出均衡发展。
关键词： Luenberger-Hicks-Moorsteen（LHM）指标 FDH模型 农业全要素生产率 收敛分析 福建省
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番石榴4个品种叶和幼果的生物活性和酚类成分研究
《热带亚热带植物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为提高番石榴（Psidium guajava）副产物的综合利用率,测定了‘珍珠’、‘水蜜’、‘红宝石’和‘西瓜’4个品种叶和幼果提取物中的酚类与黄酮含量,并分析了其与清除DPPH·、ABTS+、HO·自由基能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性的相关性,并用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）分析了提取物的酚类成分。结果表明,4个番石榴品种叶的酚类和黄酮含量、清除自由基能力、α-葡萄糖苷酶抑制活性均显著高于幼果,‘珍珠’叶的酚类含量最高,生物活性最强。酚类、黄酮含量与清除自由基能力呈极显著正相关（P<0.01）,与α-葡萄糖苷酶抑制活性呈显著正相关（P<0.05）。UPLC-MS/MS鉴定结果表明,4个品种叶酚类含量较高的均为槲皮素-3-O-葡萄糖苷、金丝桃苷、鞣花酸和杨梅苷,除鞣花酸外大部分存在于叶的酚类成分也存在于幼果中,且含量显著高于幼果。因此,4个品种中,‘珍珠’叶是开发天然抗氧化剂和α-葡萄糖苷酶抑制剂的优良资源。
关键词： 番石榴 叶 幼果 清除自由基 α-葡萄糖苷酶抑制 酚类
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