科研产出
利用番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆转化烟草获得抗病突变体
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了获得烟草抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)突变体材料,以含有番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆PTYj01的农杆菌EHA105侵染转化烟草叶片,用50 mg/L卡那霉素对愈伤组织进行筛选,愈伤组织继代培养120 d左右后进行植株再生。挑取表型正常、无TYLCV病症的再生烟草45株,经PCR鉴定均整合有TYLCV DNA序列。将表型正常的再生植株移栽,温室接种烟粉虱传毒鉴定再生烟草在整个生育期对TYLCV的抗性,共获得8株表型正常、无TYLCV病症的烟草。对这8个抗性植株T2代烟草进行农杆菌注射法和接种烟粉虱鉴定,发现T2-2、T2-7的T2代分离群体中有约75%的植株没有发病症状;对这2个株系的抗性植株进一步进行卡那霉素抗性鉴定,发现其卡那霉素的抗性也符合3︰1的分离比例,说明株系T2-2、T2-7可能发生了抗TYLCV突变。可见,通过对侵染性克隆转化的烟草进行体细胞离体筛选,获得抗TYLCV突变体的方法是可行的。
关键词： 番茄黄化曲叶病毒 侵染性克隆 烟草 体细胞无性系 再生植株
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N-苯基-2-萘胺对青菜种子萌发及幼苗生理参数变化的影响
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以青菜为材料,研究了不同浓度N-苯基-2-萘胺对青菜种子进行浸种后对种子发芽、生长、叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响。结果表明,N-苯基-2-萘胺浸种可以提高种子的发芽势和发芽率,但与对照相比差异不显著;发芽指数和活力指数的变化趋势与发芽势和发芽率的变化趋势相似,在低浓度N-苯基-2萘胺处理下,发芽指数和活力指数增加,但与对照相比差异不显著;当N-苯基-2萘胺浓度小于1 mg/L时,随着N-苯基-2萘胺浓度的增加,青菜的株高不同程度增加,在0.50 mg/L处理下,株高增加最多,显著大于对照;根长和鲜质量的变化趋势相似,随着N-苯基-2-萘胺使用量的增加呈现先增加而后降低。在低浓度N-苯基-2-萘胺处理下,青菜体内的叶绿素含量和抗氧化酶活性与对照相比显著增加,当使用高浓度N-苯基-2-萘胺处理后,叶绿素含量与抗氧化酶活性和对照相比显著降低。
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糯性和半糯性水稻品种成熟胚组织培养力的比较
《核农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为建立江苏优质糯性水稻品种的成熟胚再生技术体系,以非糯粳稻南粳44为对照,选择糯稻品种苏御糯和半糯性品种南粳5055为研究材料,以其成熟胚为外植体,分别从愈伤组织的诱导、继代、分化和植株再生进行了比较,研究糯性水稻的成熟胚再生技术。结果表明,以M8为基本培养基,添加同样的激素组合(蔗糖3%,琼脂0.8%,2,4-D 3mg/L,KT 0.1mg/L,ABA 0.2mg/L),诱导20d,苏御糯出愈率为98.81%,南粳5055为81.00%,均比对照南粳44的99.32%略低,而且3品种的出愈快慢有差异,与对照南粳44相比,苏御糯的和对照相当,表现出愈较快,而南粳5055则比较慢。在分化过程中,以MS为基本培养基,添加不同浓度的激素组合(蔗糖3%,琼脂1%,山梨醇1.5%,2,4-D 0.1～0.4mg/L,6-BA 1～2mg/L),苏御糯和南粳5055在0.1mg/L 2,4-D和2mg/L 6-BA组合中分化率达到最高,分别是86.54%和56.5%,而对照南粳44只有21.42%,但南粳44在0.2mg/L 2,4-D和3mg/L 6-BA组合中的分化率最高,达到了66.67%。不同基因型的最高再生率分别为:苏御糯87.5%,南粳44 78.38%,南粳5055 65.3%。
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不同环境下水稻稻曲病抗性位点检测
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：利用157个家系组成的大关稻/IR28重组自交系(Recombinant inbred lines,RIL)群体,采用高效引发稻曲病人工接种方法,以病情指数作为稻曲病的表型值,2009年在南京、扬州分别鉴定了亲本及RILs对水稻稻曲病的抗性,利用QTL Cartographer软件,对水稻稻曲病抗性基因进行检测分析。两个环境下共检测到qFsr1、qFsr2、qFsr4、qFsr8、qFsr10a、qFsr10b、qFsr11、qFsr12等8个QTL,分别位于第1、2、4、8、10、11和12染色体上,贡献率在8.6%～22.5%。其中,南京检测到qFsr1、qFsr4、qFsr10a、qFsr11、qFsr12等5个位点,扬州检测到qFsr2、qFsr8、qF-sr10a、qFsr10b、qFsr11等5个位点,qFsr10a、qFsr11在两个环境下均被检测到,对性状的解释率在18.0%～18.9%,使病情指数下降8.0%～14.6%,提高了抗病性,qFsr10a、qFsr11及其附近的标记可望在稻曲病抗性分子标记辅助选择育种中加以应用。根据加性效应方向,qFsr1、qFsr2、qFsr8、qFsr10a、qFsr11和qFsr12等6个位点来自抗病亲本IR28,增加水稻对稻曲病的抗性;qFsr4、qFsr10b位点来自感病亲本大关稻,降低水稻对稻曲病的抗性。
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水葫芦和香蒲对富营养化水体及其底泥养分的吸收
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为探明水葫芦、香蒲改善富营养化水体水质的效果及其对底泥养分释放的影响,以其为试材,采用人工模拟试验方法,分析其对不同富营养化水体及其底泥养分吸收的情况。结果显示:水葫芦比香蒲有更好的适应性,在不同浓度的水体中生物量快速增加,而香蒲则需要较长的适应期;在总氮、总磷浓度分别为3.2～14.2 mg/L和0.2～1.0 mg/L的富营养化水体中,水葫芦、香蒲均可有效地消减上覆水中总氮和总磷。处理3个月后,水葫芦净化系统的总氮、总磷浓度分别降至0.84～0.86 mg/L、0.035～0.044 mg/L,对水体总氮、总磷的去除量分别为72.0%～94.0%、82.5%～98.1%,总氮、总磷的负荷去除量分别为18.4～105.8 mg/(m2.d)、1.3～7.6mg/(m2.d);香蒲净化系统的总氮、总磷的浓度分别降至0.96～1.09 mg/L、0.030～0.062 mg/L,对总氮、总磷的去除率分别为66.0%～92.8%、77.0%～93.8%,总氮、总磷的负荷去除量分别为8.4～52.3 mg/(m2.d)、0.6～3.7 mg/(m2.d)。表明水生植物水葫芦和香蒲可有效消减富营养化湖泊水体氮、磷等内源污染物,对富营养化水体水质具有良好的改善效果。
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RNAi沉默转基因油菜fad2基因表达的种子特异性分析
《分子植物育种 》 2012 CSCD
摘要：为研究RNAi沉默转基因油菜fad2基因表达的效果及其器官特异性,实时荧光定量PCR法分析比较了转基因油菜W-4与非转基因对照Westar开花后第7天、第14天、第21天、第28天的种子以及越冬期油菜根、茎、叶器官中的fad2基因的相对表达量。结果显示:对照Westsr种子中fad2基因的相对表达量随开花后的天数呈逐渐增加的趋势,但W-4种子中fad2基因的相对表达量在开花后第21天、第28天较对照Westar显著下降,降幅达到60%。说明转基因油菜W-4在种子发育过程中表达的fad2基因的dsRNA干扰了fad2基因表达。W-4与Westar在越冬期根、茎、叶器官中fad2基因的相对表达量基本一致,无显著性差异。脂肪酸组成分析结果显示:W-4种子中油酸平均含量达到81.5%较Westar增加了近15%,而多不饱和脂肪酸平均含量为5.25%,较Westar下降了近70%;但根、茎、叶中的脂肪酸含量二者无显著差异;结果表明转基因油菜中RNAi干扰fad2基因表达具有种子特异性,不干扰其它器官的fad2基因表达。研究还发现转基因油菜fad2基因表达下降的时期与napin基因表达时期同步,均始于开花后21d左右,表明目标基因的表达受napin启动子的准确控制。
关键词： 转基因油菜 实时荧光定量PCR fad2基因 表达特异性
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