科研产出
鹅细小病毒NS1蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立
《中国动物传染病学报 》 2014
摘要:本研究克隆了鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)佛山株(Foshan-2009)的NS1基因,并将其克隆至原核表达载体p ET32a(+),构建重组质粒p ET32a-NS1。经转化,IPTG诱导表达及SDS-PAGE和Western blot分析表明,NS1蛋白得到了表达,并且能与抗GPV的番鸭血清发生特异性反应。通过棋盘法确定NS1蛋白包被量为0.5μg/孔,待检血清1:50稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1:10 000倍稀释时ELISA反应条件最佳,并确定阴阳性临界值为0.399。该ELISA方法特异性强,与番鸭细小病毒、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、新城疫病毒和鸭疫里默氏杆菌的阳性血清均无交叉反应;重复性好,批内和批间重复试验的变异系数分别小于5%和10%;检出率高,GPV阳性番鸭血清的检出率为92%。本研究所建立的间接ELISA方法为鹅细小病毒的血清学诊断和流行病学监测奠定了基础。
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菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用
《植物保护 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:菠萝凋萎相关病毒-1(Pineapple mealybug wilt associated virus-1,PMWaV-1)是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物,建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为y=-3.307×log x+38.18,相关系数r2为0.998。试验结果表明,该方法能特异性地检测PMWaV-1,对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应;最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1.98%,是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。
关键词: 菠萝凋萎相关病毒-1 TaqMan探针 实时荧光定量RT-PCR 检测
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一株感染家蚕的高致病性白僵菌的鉴定及在僵蚕生产中的应用
《蚕业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:僵蚕是传统中药材,筛选对家蚕具有高致病性的球孢白僵菌用于提高规模化生产僵蚕的产量和品质。从蚕区采集的僵蚕虫体分离纯化到一株高致病力的白僵菌,通过形态学鉴定和rRNA ITS序列系统发育分析,确定该菌株为球孢白僵菌(Beauveria bassiana),命名为Beauveria bassiana JC-1。优化该菌株应用于僵蚕生产中的接种菌液浓度为1×106~5×106mL-1,用此浓度的菌液喷洒接种5龄起蚕后5~6 d,幼虫大量死亡,僵化率达90%以上,万头蚕可生产僵蚕约5 kg。利用该菌株感染家蚕收获所得僵蚕的各项质量指标均符合《中国药典》中的有关标准,且僵蚕的总灰分和酸不溶性灰分含量较市售僵蚕更低。初步认为该菌株在僵蚕的标准化、规模化生产中具有应用价值。
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关于广东“谁来种地、怎么种地”的问题探讨
《南方农村 》 2014
摘要:近年来,随着大量农村剩余劳动力转移,广东农业种地兼业化、人口老龄化趋势加剧,集中表现为:农业生产布局缺乏统筹规划、供需对接不足;种地主体以兼业农户为主、专业化程度不高;生产单位以小规模农户经营为主、规模效益有限;农业生产条件落后、农业劳动强度大等。亟待通过"生产精准化"提高农业效益,通过"农民职业化"培育现代农业经营主体,通过"农田高标准、规模化"提高农业生产效率,以及通过"装备现代化"改造传统农业生产方式等多举并下,破解种地难题。
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广东省蔬菜产业电子商务发展研究
《电子商务 》 2014
摘要:广东省是蔬菜消费大省,蔬菜产业在广东省农业产业中占据重要地位。目前广东省蔬菜产业电子商务正在崛起,但在发展中主要存在三个问题:流通成本高、蔬菜质量难以把控以及消费者传统的购菜习惯。本文对广东省蔬菜产业电子商务发展现状进行全面阐述,指出了存在的问题,为促进广东省蔬菜产业电子商务的发展,有必要进行广东省蔬菜产业电子商务发展的相关研究。
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高良姜规范化种植技术
《中国热带农业 》 2014
摘要:随着高良姜在海南推广种植面积的不断扩大,规范化种植和管理技术显为重要。本文详细介绍了种植高良姜的管理技术,包括园地选择、品种选择、种植技术及园地土壤、水分、病虫害,以期达到种植高良姜的良好经济效益。
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花鲈对6种饲料原料的表观消化率
《饲料研究 》 2014 北大核心
摘要:采用Y2O3作为外源指示剂,以70%基础饲料和30%待测饲料原料配制试验饲料,测定初始体质量为(23.30±0.32)g的花鲈对鱼粉(FM)、豆粕(SBM)、花生粕(PNM)、棉粕(CSM)、菜籽粕(RSM)和玉米DDGS干物质、粗蛋白、粗脂肪、总能、磷和氨基酸的表观消化率。结果表明,花鲈对6种饲料原料干物质的表观消化率在33.85%~75.08%,其中PNM、CSM、RSM和DDGS与FM相比分别显著降低(P<0.05)。对粗蛋白的表观消化率为88.10%~94.55%,其中FM显著高于CSM(P<0.05)。对粗脂肪的表观消化率超过75%,CSM与FM相比显著降低(P<0.05),SBM和DDGS显著低于其他各种饲料原料(P<0.05)。对磷的表观消化率为29.03%~87.39%,其中SBM显著高于其他各饲料原料(P<0.05)。花鲈对FM总能的表观消化率显著高于其他各饲料原料(P<0.05),对CSM总能的表观消化率与其他原料相比显著降低(P<0.05)。花鲈对氨基酸的表观消化率范围为47.27%~98.90%,其中对SBM和PNM氨基酸的表观消化率与FM最为接近。结果表明,花鲈对PNM和SBM的干物质、粗蛋白、磷、总能和氨基酸的表观消化率与FM比较接近,可以作为饲料中替代FM的植物蛋白源。
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铁皮石斛抗肿瘤活性成分的探究
《现代食品科技 》 2014
摘要:为了探究铁皮石斛中的抗肿瘤活性成分,本研究采用乙酸乙酯、95%乙醇、水三种不同极性的溶剂依次对铁皮石斛茎的干燥粉末进行了提取,初步得到了三种提取物;初提取物在MTT细胞增殖检测结果的指引下,结合硅胶柱层析、TLC薄层分析和凝胶柱层析进行分离纯化,最终筛选出具有强抗肿瘤活性的组分。结果显示乙酸乙酯提取物经分离纯化后得到了最强抗肿瘤活性成分,其对肝癌细胞HepG-2、胃癌细胞SGC-7901和乳腺癌细胞MCF-7的增殖都有明显的抑制效果,半抑制浓度IC50依次为:0.45μg/mL、0.36μg/mL、0.34μg/mL,经波谱学数据鉴定,该化合物为金钗石斛菲醌。金钗石斛菲醌首次分离自金钗石斛,其抗肿瘤功效已经得到证实,并引起了广泛的关注,本研究成果对以铁皮石斛为原料的药品和保健食品的开发具有重要的指导意义。
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连续化生产线加工过程中客家炒青绿茶主要品质成分的变化
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:为研究连续化生产线加工过程中客家炒青绿茶品质成分的变化,以金萱茶树品种为原料,通过实时3次重复取样的方法,对连续化生产线加工过程中7个工序客家炒青绿茶主要品质成分的变化进行测定和比较分析。结果表明,在连续化生产线加工过程中,从鲜叶、萎凋、杀青、揉捻、动态失水、一炒到二炒,客家炒青绿茶的主要品质成分发生了显著变化,表现为茶多酚、游离氨基酸、可溶性糖、咖啡碱和非酯型儿茶素含量总体呈下降趋势;儿茶素总量和酯型儿茶素含量呈增加趋势。利用该生产线生产的清香型客家炒青绿茶具有与手工制作产品同样的品质特征。萎凋、杀青和一炒是连续化加工7个工序中茶叶主要品质成分发生最显著变化的工序,科学控制好萎凋、杀青和一炒工序,对于提高连续化生产线加工清香型客家炒青绿茶品质具有重要意义。
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