新疆肉用绵羊颗粒细胞抑制素βA基因RNAi载体的构建及其干扰效率验证

林杉; 陈宝麒; 田占伟; 刘贤侠; 杨华; 赵宗胜; 《中国兽医学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：抑制素βA基因(inhibin-βA,INHβA)的表达与绵羊(Ovis aries)的产羔数有一定关系。为了观察INHβA对绵羊发情性状的影响以及在目的基因沉默后,引起的发情性状相关激素变化的情况,本研究利用RNAi技术构建载体干扰INHβA的表达。根据GenBank上绵羊INHβA(GenBank:NW_004080167.1)mRNA的序列设计干扰片段,通过酶切和测序验证,成功构建了4个INHβA基因RNAi质粒载体PLLU2G-shINHβA-1(I-1)、PLLU2G-shINHβA-2(I-2)、PLLU2G-shINHβA-3(I-3)、PLLU2G-shINHβA-4(I-4)和1个空载体(赛亚公司的PLLU2G)阴性对照;在成功分离卵巢颗粒细胞并建立培养体系后,利用Lip2000介导干扰载体转染细胞,通过荧光定量RT-PCR检测干扰前后INHβA的表达量。结果显示,4个干扰载体的干扰效率依次为34%,58%,39%,19%,其中I-2对INHβA表达的沉默效果最好。通过卵巢注射干扰载体I-2,检测干扰后绵羊血清INHβA、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二酮(E2)的含量。结果显示,注射干扰载体后INHβA和FSH分别呈现明显的下降和上升波峰,而血清中LH和E2水平没有发生明显变化。

关键词： 抑制素βA基因(INHβA) 绵羊 RNA干扰(RNAi) 卵巢颗粒细胞

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超高产优质冬小麦新品种—新冬41号

洪雪梅; 张斌; 李金霞; 罗勇; 《麦类作物学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：新冬41号是石河子农业科学研究院(原名农业科技开发研究中心)于2000年以石冬8号为母本、新冬22号为父本进行有性杂交,通过系谱法多年定向选育,结合抗病、品质筛选、抗寒抗旱鉴定、优化性状组合,选育出的高产、优质、抗倒伏冬小麦新品种,2013年6月通过新疆自治区品种审定委员会审定(新审麦2013年03号),2013年11月申请国家新品种保护(申请号20131036.7)。1特征特性

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化学打顶剂对新陆早48号棉花生长发育及产量的影响

王刚; 陈兵; 张鑫; 王旭文; 韩焕勇; 王方永; 赵海; 《广东农业科学 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：以新陆早48号为材料,开展土优塔棉花打顶剂的田间比较试验,研究化学打顶对棉花农艺性状、品质、产量等的影响,结果表明,经不同用量土优塔棉花打顶剂处理后,棉花的株高、果枝台数、叶龄数等农艺性状均优于人工打顶(CK),打净率在80%以上。化学打顶不同用量处理棉花的单铃重增大,皮棉重、霜前花率与对照无明显差异,喷施600、750、900 m L/hm~2用量土优塔棉花打顶剂相对于对照具有增产效果。化学打顶不同处理的百粒重、籽指、衣指、纤维长度、马克隆值、整齐度、伸长率等与对照相比均无显著差异。说明土优塔棉花打顶剂能有效控制株高,但对棉花的产量和品质影响不大。

关键词： 打顶剂 棉花 新陆早48号 生长发育 产量

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实时定量PCR检测转基因绵羊拷贝数

赵帅; 王立民; 王聪慧; 唐红; 张宾; 郭延华; 张译元; 赵兴旺; 丁新平; 《新疆农业科学 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：【目的】利用高通量、快速、灵敏的实时荧光定量PCR法,检测转类胰岛素样生长因子1-红色荧光蛋白基因(insulin-like growth factor 1-red fluorescent protein,IGF1-RFP)绵羊中外源基因的拷贝数。【方法】以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为绵羊的内源参照基因,梯度稀释法。【结果】分别获得RFP和GAPDH基因的Ct值与起始模板数的相关性标准曲线,R2分别为0.999和0.999,相关性高。通过比较目的基因RFP和GAPDH起始模板数,得到外源基因在转基因绵羊中的拷贝数。编号0152、0216、0217、0218的转基因绵羊拷贝数分别为3、1、1、1。【结论】以IGF-I转基因细毛羊为研究对象,针对外源基因序列和内源参照基因序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR法对IGF-I转基因细毛羊外源基因的拷贝数进行检测,并且准确检测外源基因的拷贝数。

关键词： 转基因绵羊 实时荧光定量PCR 拷贝数

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电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化

李炜杰; 杨娇; 王聪慧; 罗健; 周平; 黄威; 姚建龙; 何高明; 皮文辉; 《新疆农业科学 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：【目的】采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率。【方法】利用Lonza 4D—Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率。【结果】通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案:L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×106个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率。

关键词： 绵羊成纤维细胞 细胞转染 转染效率 条件优化

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塔里木河上游湿地土壤种子库特征

董鹏; 姜继元; 李铭; 陈奇凌; 丁新华; 《干旱区资源与环境 》 2015 北大核心 CSCD CSSCI

摘要：以塔里木河上游阿拉尔地区不同湿地类型土壤种子库为研究对象。通过野外调查取样和室内萌发试验相结合的方法,对土壤种子库的组成、物种多样性和空间分布特征进行分析。研究结果表明:研究区内各湿地类型土壤种子库物种匮乏,多样性低,萌发的物种数在仅10-13种之间,种子库密度在168-2093粒/m2之间,属于较低水平。各湿地土壤种子库密度表现为人工湿地>河流湿地>湖泊湿地,受保护的人工湿地土壤种子库最高。种子库的空间分布为聚集分布。

关键词： 土壤种子库 物种多样性 种子萌发 塔里木河

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扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin部分片段克隆及不同体节mRNA转录水平分析

叶倩; 马勋; 薄新文; 王正荣; 张艳艳; 《西北农业学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：旨在初步了解丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的作用。采用分子克隆获得扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin基因部分片段,应用MEGA软件对其进行进化分析。同时以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR技术检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异,最终克隆获得749bp的serpin基因片段。进化分析表明,扩展莫尼茨绦虫serpin基因与多方棘球蚴serpin基因有较近的亲缘关系。标准曲线分析显示,serpin和beta-Tubulin基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99,熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。同时试验结果显示,serpin基因在虫体各发育阶段中的表达丰度存在差异,从高到低依次为孕节、头节、成节、幼节。由此初步推测,此基因可能在扩展莫尼茨绦虫虫卵发育为六钩蚴的过程中发挥一定作用。

关键词： serpin 扩展莫尼茨绦虫 RT-PCR

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不同浓度烯效唑与胺鲜脂复配剂浸种对玉米幼苗抗旱性的影响

赵丽娟; 王秀珍; 焦天奇; 祝建波; 郭斌; 闫洁; 《西北农业学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：用不同质量浓度烯效唑、胺鲜脂配比的复配剂对玉米种子‘郑单958’进行12h及24h的浸种处理,测定玉米的发芽情况、幼苗形态指标以及干旱胁迫下玉米幼苗叶片的相对含水量、相对电导率、丙二醛浓度、过氧化氢酶活性、叶绿素质量分数。结果表明,当40mg/L烯效唑、50g/L胺鲜脂配比下浸种24h时,显著抑制玉米种子的芽长,但对玉米种子的发芽率影响不大,促进幼苗壮苗的形成;对干旱的抗性响应因浸种时间不同而异,在浸种12h时,不同质量浓度烯效唑、胺鲜脂配比的混合剂中烯效唑质量浓度高效果优于质量浓度低的处理,而在浸种24h时,烯效唑质量浓度低效果反而优于质量浓度高的处理。通过形态及生理指标的测定,已明确40mg/L烯效唑、50g/L胺鲜脂的配比质量浓度进行浸种处理24h对玉米有较好的壮苗效果及提高植物抗逆性的作用。

关键词： 烯效唑 胺鲜脂 玉米 壮苗 干旱

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TCF7基因增强子区域一处SNP在三尾型极端差异的绵羊群体中的多态分析

宋天增; 张伟; 高磊; 刘守仁; 甘尚权; 王新华; 《新疆农业科学 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：【目的】检测尾型极端差异的阿勒泰羊、湖羊和藏羊三群体中TCF7基因增强子一处SNP是否存在分化现象,从而确定该SNP是否可作为一个有效地筛选脂尾与瘦尾性状的分子标记。【方法】对三品种绵羊286份基因组进行目标SNP片段的扩增,并采用PCR-RFLP方法对以上样本扩增片段进行酶切分型,最后采用卡方检验的方法验证各基因型在各群体中的Hardy-Weinberg平衡性。【结果】高效扩增出所有样本含该SNP DNA扩增,经Mfe I酶切分型后共鉴定出了三种基因型(CC、TT和CT),其中CC基因型在瘦尾藏羊群体中的百分比高达80.3%,是脂尾型阿勒泰羊与湖羊的两倍以上。C/T等位基因的比率显示藏羊群体中这一比值分别为其他两种脂尾型绵羊品种的8倍,提示T等位基因可能与脂尾性状相关。【结论】该SNP可作为脂、瘦尾羊选育的一个分子标记。

关键词： 多态性 脂尾性状 等位基因 分子标记

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棉花棉叶螨叶片遥感监测技术研究

赵亮; 陈兵; 肖春华; 邹楠; 刘立峰; 《甘肃农业大学学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：通过使用便携式光谱仪对新疆石河子地区不同程度棉叶螨为害后的叶片光谱进行测量,同步进行理化参数测定,定性和定量地分析了棉叶螨为害后叶片叶绿素a、叶绿素b、叶绿素(a+b)、类胡萝卜素、厚度、全氮含量和含水量的变化和光谱反射特性,建立了棉叶螨叶片光谱诊断模型.结果表明:棉叶螨为害后的叶片所有理化参数较正常叶片低,叶绿素a变化幅度最大(88.8%),叶绿素(a+b)与棉叶螨的相关性最高(r=-0.924).棉叶螨叶片光谱反射率大小在近红外(750~860nm除外)和短波红外波段均随严重度的增加而增加,且可见光波段650nm附近有一个独特的反射峰,但在550nm附近低于正常叶片.605~724nm可作为棉花棉叶螨叶片光谱识别的敏感波段,706nm和758nm为最佳波段.4个估测参数建立的诊断模型均达到极显著相关水平,其中R758nm/R706nm建立的诊断模型检验R2最高(0.823),RE最小(0.351),可推荐为棉花棉叶螨叶片光谱识别的最佳模型.利用高光谱遥感可实现对棉花棉叶螨叶片的有效识别,可为棉花棉叶螨大面积监测提供借鉴和参考.

关键词： 高光谱 棉叶螨 叶片 遥感 叶片色素

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