科研产出
小麦抗赤霉病品种NBS同源序列克隆与分析
《生物技术通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：根据二穗短柄草NBS-LRR类基因的保守序列设计同源引物,以小麦抗赤霉病品种苏麦3号、宁7840和望水白基因组DNA为模板,通过PCR扩增,得到43条序列,其中4条为非编码序列或结构域不完整;39条与植物抗病基因同源,其中的7条内部存在终止密码子,可能是假基因,经过比对分析,其余32条具有连续的开放阅读框和保守结构域,推导的氨基酸序列均具有Kinase-1a、Kinase-2和Kinase-3a及GLPL区等几个保守区,在GenBank中均能找到与之高度同源的其他物种的核酸序列,并且Kinase-2的最后一个氨基酸均为色氨酸(W),属于non-TIR类NBS基因。32条序列可分为4大类,它们之间核苷酸同源性为64%-98%,编码氨基酸同源性为22%-98%。根据序列分析随机设计5对不同基因特异性引物,并利用RT-PCR技术进行表达分析,结果表明,7-1、s-3、s-4和w-2均能表达,说明这些片段可能是功能性抗病基因的部分序列;7-13不表达,再次证明属于假基因。32条序列在之前未被报道过,这些RGA可以作为筛选赤霉病功能性抗病基因的候选序列。
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沿海滩涂地区不同栽培措施对禾本科牧草产量及品质的影响
《草地学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为探讨沿海滩涂地区牧草高产栽培技术,以4种禾本科牧草为材料,研究了3种不同的栽培措施对不同饲草品种的饲草产量和品质的影响。结果表明:覆秸秆与添加保水剂处理饲草的产量和叶/茎比显著高于对照(P<0.05)。同一品种,覆秸秆处理饲草的可溶性碳水化合物(WSC)、粗蛋白(CP)、干物质体外消化率(IVDMD)和体外可消化干物质产量最高,粗灰分(Ash)、酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)含量最低,品质最好,其次是添加保水剂处理,对照最差。不同品种之间的饲草产量和品质差异显著(P<0.05),其中青贮玉米(Zea mays L.)和高丹草(Sorghum bicolor×Sorghum sudanese)表现较好。在沿海滩涂地区,覆秸秆和添加保水剂处理可以显著提高饲草产量,改善饲草品质,但不同品种之间产量和品质差异较大。
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水葫芦净化富营养化水体效果及对底泥养分释放的影响
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：采用人工模拟方法,研究了水葫芦种养对富营养化水体净化效果以及底泥养分释放的影响。结果表明,水葫芦种养覆盖度为60%、初始放养量为4.0 kg/m2时对4种富营养化水体中的营养盐去除效果最好,出水中全氮、全磷浓度分别降至0.15～5.69 mg/L和0.04～0.14 mg/L。水葫芦在修复水体过程中还促使了底泥中养分向上覆水的释放,全氮、全磷的释放速率分别达到1.03～2.83 mg/(kg.d)、0.16～0.51 mg/(kg.d)。
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Ca(N03)2胁迫对茄子嫁接苗叶片活性氧代谢和膜脂过氧化的影响
《江苏农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以日本引进的茄子设施栽培专用耐盐品种Torvum Vigor为砧木,栽培品种苏崎茄为接穗,用营养液栽培,对80 mmol/L Ca(NO3)2胁迫下茄子嫁接苗和自根苗叶片抗氧化酶活性、活性氧代谢和膜脂过氧化的变化进行了比较.结果表明,Ca(NO3)2胁迫下茄子嫁接苗株高和生物量积累显著高于自根苗,叶片抗氧化酶活性显著高于自根苗,叶片O2.-产生速率与H2O2含量显著低于自根苗,叶片MDA含量与电解质渗透率显著低于自根苗.因此,Ca(NO3)2胁迫显著降低了幼苗叶片抗氧化酶活性,增加了O2.-产生速率、H2O2与MDA含量及电解质渗透率,但嫁接苗受Ca(NO3)2胁迫的抑制程度显著小于自根苗,良好的活性氧清除机制保护了植株细胞膜的完整性,使嫁接苗在Ca(NO3)2胁迫下表现出较高忍耐力.
关键词： 嫁接茄子 Ca（NO3）2胁迫 活性氧代谢 膜脂过氧化
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杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白PbCBLIO基因的克隆和表达特性研究
《果树学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CalcineurinB—likeprotein,CBL)基因的序列特征和表达特点,【方法】以杜梨幼苗为试材,运用同源克隆和半定量RT—PCR对PbCBLIO基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明.PbCBLIO基因编码区cDNA长度为801bp,编码的多肽由266个氨基酸组成。该多肽预测的等电点为4.56,估计的相对分子质量为30.45ku。其对应基因组DNA序列长1983bp,包括9个外显子和8个内含子。通过PSORT进行亚细胞定位分析发现PbCBLl0蛋白位于质膜上的几率最大。PbCBLIO基因编码的多肽具有4个钙离子结合域EF手形结构和1个钙调磷酸酶A亚基结合位点。PbCBLl0与番茄S1CBLIO(NP_001239045)和拟南芥AtCBLl0(NP_195026)蛋白间的同源性较高,分别为82%和77%,并与AtCBL10亲缘关系最近。PbCBL10基因在杜梨幼苗根、茎和叶片中均为诱导型表达,50~200mmol·L^(-1)CaCl2、20μmol·L^(-1)ABA、100mmol·L^(-1)NaCl、10%(w/v)PEG6000或180mmol·L^(-1)甘露醇处理后其表达量明显上调。【结论】PbCBLIO基因具备植物CBL基因家族的固有特征,能够响应胞内钙浓度变化,对ABA、盐碱、干旱和渗透胁迫均存在转录响应。
关键词： 杜梨 类钙调磷酸酶B亚基蛋白 基因克隆 表达特性
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猪CD81的克隆、序列分析及其LEL区原核表达
《中国预防兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为研究猪CD81基因特征及对其进行原核表达,本研究从猪PBMC的总RNA中扩增获得CD81全基因,测序后经比对分析表明,与已报道的序列同源性为99.7%～100%,与牛羊的同源性约为92%,其次为灵长类(约90%),大鼠和小鼠最低(约87%)。氨基酸序列分析其SEL和LEL区为主要变异区,尤其LEL区在不同物种间变异较大。进一步扩增其LEL区基因并以pGEX-4T-1为载体构建重组表达质粒,经IPTG诱导表达重组蛋白,其主要以包涵体形式存在。Western blot结果显示,重组蛋白以GST融合蛋白形式表达。
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