基于PCR技术的DNA分析测试关键要素

安娜; 柳方方; 董美; 胡晓颖; 宛煜嵩; 金芜军; 兰青阔; 李亮; 韩阳; 《基因组学与应用生物学 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：大多数国家对转基因生物研究与产业化日趋积极,把发展生物技术作为支撑发展、引领未来的战略选择,力求抢占新一轮经济和科技革命的先机与制高点。随之而来的是公众对转基因产品安全性的关注。转基因生物成分分析作为安全性评价的重要内容,发挥着举足轻重的作用,而基于PCR技术的转基因产品核酸成分分析是最经典、最广泛使用的方法。虽然此方法已普遍应用,但国内外鲜有较为全面的阐述此类分析测试要素的报道。为此,本综述对国内外相关方法的文献资料进行了梳理、比对和研究,结合已有的分析测试实验室的经验,提出了PCR测试体系的关键要素主要是标准和指南、方法的确认、标准物质及能力验证等四个方面,且在文中简明扼要的论述了各个部分的要点,供转基因核酸成分分析及相关领域工作者参考。

关键词： 转基因生物 分析测试 方法确认 标准物质 能力测试

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猪繁殖与呼吸综合征和副猪嗜血杆菌混合感染诊治报告

任卫科; 池晶晶; 田向学; 路超; 燕小翠; 郑丽; 鄢明华; 《中国兽医杂志 》 2019 北大核心

摘要：2017年天津市静海区某饲养规模400头母猪场内断奶仔猪出现发烧,消瘦,呼吸困难,部分关节肿胀及死亡等现象,其发病率在80%左右,病死率约为30. 0%。根据临床发病情况、病理剖检及实验室诊断确诊为猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和副猪嗜血杆菌(HPS)混合感染。报告如下。1发病情况该猪场于2016年7月份之后,每批保育猪自50日龄左右开始出现发病,病猪最初表现为发烧,体温40℃～41℃,部分体表发红,扎堆,食欲降低,

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设施温室智能化闭环式节水灌溉控制系统的设计与应用

张雪飞; 王建春; 彭凯; 李凤菊; 《贵州农业科学 》 2019 北大核心

摘要：为实现设施温室的智能水肥浇灌,提高水肥利用效率,进行了设施温室智能化闭环式节水灌溉控制系统的研究开发.该系统包括Zigbee终端环境参数采集器,将环境参数数据通过无线传感网络WSN发送至Zigbee协调器;arm控制器采用轮询方式收集环境传感器数据,避免采集器数据发送碰撞;通过设定浇灌参数并结合环境参数,给浇灌控制器发送浇灌指令;浇灌控制器通过流量计返回数据进行闭环反馈式控制驱动电磁阀实现水肥精准浇灌.

关键词： 智能灌溉 控制系统 水肥一体化 Zigbee 设施温室 精准施肥

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日粮添加过瘤胃氨基酸对高产奶牛生产性能、乳成分和经济效益的影响

芦娜; 潘振亮; 陈龙宾; 宋旭东; 王文杰; 马树纲; 刘景喜; 《饲料工业 》 2019 北大核心

摘要：试验旨在研究日粮添加过瘤胃蛋氨酸和过瘤胃赖氨酸对高产奶牛生产性能、乳成分及经济效益的影响。按照胎次、产奶日期、日产奶量一致的原则,选择处于泌乳高峰期的健康中国荷斯坦奶牛96头,随机分为对照组和试验组,每组48头牛,每头牛1个重复。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+过瘤胃氨基酸[过瘤胃蛋氨酸添加量20 g/(头·d);过瘤胃赖氨酸添加量27 g/(头·d)]。预试期7 d,正试期30 d。结果表明:①日粮添加过瘤胃蛋氨酸和过瘤胃赖氨酸极显著提高奶牛日产奶量3.63%(P<0.01),极显著提高饲料转化率4.49%(P<0.01)。②日粮添加过瘤胃蛋氨酸和过瘤胃赖氨酸极显著降低尿素氮含量26.92%(P<0.01),对乳脂率、乳蛋白率、体细胞数无显著影响(P>0.05)。③与对照组相比,试验组奶牛经济效益增加2.30元/(头·d)。在本试验条件下,日粮添加过瘤胃蛋氨酸和过瘤胃赖氨酸能够提高高产奶牛产奶量,提高饲料转化率,提高经济效益。

关键词： 过瘤胃蛋氨酸 过瘤胃赖氨酸 奶牛 生产性能 乳成分 经济效益

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‘香白杏’原汁与原酒香气成分差异分析

陈颖; 商家胤; 杨丽维; 刘明; 张世杰; 张峻; 《中国果树 》 2019 北大核心

摘要：采用‘香白杏’原汁发酵杏原酒,分别检测了杏原汁和杏原酒的香气成分。经固相微萃取(SPME)技术提取,气相色谱-质谱法(GC-MS)进行定性和定量分析。结果表明:杏原汁中共检测出挥发性物质80种,总含量为460.12μg/L,杏原酒中共检测出挥发性物质93种,总含量为1 555.13μg/L;酯类和醇类物质为杏原汁和杏原酒的主要香气成分。以杏原汁发酵的杏原酒保留了57种原有香气成分,并且60%挥发性物质的含量有明显提高,发酵后新增挥发性物质38种,极大地丰富了杏原酒的香气品质。

关键词： ‘香白杏’ 杏原汁 杏原酒 香气成分

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复合植物提取物对奶牛产奶量、乳成分和血液指标的影响

刘景喜; 芦娜; 刘连超; 彭传文; 周娟; 冯晋芳; 王文杰; 南春朋; 云水; 潘振亮; 《中国畜牧杂志 》 2019 北大核心

摘要：本试验旨在研究日粮中添加复合植物提取物对奶牛产奶量、乳成分和血液生理生化指标的影响。选择25～27月龄、1胎、泌乳天数(67±1) d、产奶量(32±5) kg/d且健康的泌乳高峰期荷斯坦奶牛40头,随机分为对照组和试验组,每组20个重复,每个重复1头牛。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+1g/(d·头)复合植物提取物(每克含辣椒油树脂3.5%、肉桂醛5.5%、丁香酚9.5%)。试验预试期3d,正试期60 d。结果表明:与对照组相比,试验组奶牛产奶量提高2.37%(P>0.05);日粮添加复合植物提取物有降低牛奶体细胞数、尿素氮含量的趋势(P>0.05);与对照组相比,试验组奶牛血常规指标、血清生理生化指标差异均不显著(P>0.05)。在本试验条件下,日粮添加1 g/(d·头)复合植物提取物能够在一定程度上提高奶牛产奶量、降低牛奶体细胞数和尿素氮含量,但不影响血液生理状态。

关键词： 复合植物提取物 奶牛 产奶量 乳成分 血液指标

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天津市滨海地区制种黄瓜适宜滴灌灌溉指标的研究

梁新书; 廉晓娟; 王艳; 杨军; 王正祥; 张余良; 《种子 》 2019 北大核心

摘要：为了研究天津滨海地区制种黄瓜合理的滴灌制度,通过田间试验研究了5种灌溉制度(常规畦灌ck_1处理、常规滴灌ck_2处理、节水滴灌T_1处理、节水滴灌T_2处理及节水滴灌T_3处理)对制种黄瓜种子产量及水分利用效率影响。结果表明,相比于传统畦灌(ck_1),采用滴灌方式,灌水量控制在288～630 mm,可以实现节水13.9%～54.4%,种子产量增加15.8%～57.9%,灌溉水利用率提高61.9%～153.7%,增收12.0万～52.0万元/hm~2;采用滴灌方式,灌水量减少(T_2和T_3处理)虽然会提高水分利用率,但会在一定程度上抑制植株生长,造成黄瓜种子减产,不利于增产增收;灌水量增加(ck_2处理)也会造成黄瓜种子一定程度减产,不利于水分利用率的提高,也不利于经济效益的最大化。综合来看,采用节水滴灌T_1处理,采用滴灌方式,待黄瓜长至5～6片叶时,在授粉之前每次适宜灌溉量12 mm,授粉之后每次适宜灌溉量18 mm,灌水间隔为3 d,整个生育期灌溉总量为438 mm,可实现制种黄瓜节水增效增收的效果。

关键词： 灌溉制度 制种黄瓜 种子产量 水分利用率

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不同产地和1-MCP、MAP处理对安梨贮藏品质的影响

王志华; 陈颖; 王文辉; 姜云斌; 佟伟; 贾朝爽; 李江阔; 《包装工程 》 2019 北大核心

摘要：目的比较不同产地安梨果实的贮藏品质,探索采用不同浓度1-甲基环丙烯(1-MCP)处理方法和薄膜包装对安梨黑皮病的防控效果。方法以辽宁海城、绥中、天津蓟县产的安梨果实为实验材料,在低温(0±0.5)℃条件下冷藏180 d,之后在20℃货架下平衡24 h和放置7 d,然后对3个产地安梨果实的贮藏品质进行测定,同时对天津蓟县产安梨进行了不同浓度(0,0.5μL/L,1.0μL/L)的1-MCP处理和不同薄膜(聚乙烯膜(PE),聚氯乙烯膜(PVC))包装的防黑皮病实验研究。结果通过对果实的黑皮指数、外观色泽和内在品质进行综合分析发现,绥中安梨采收时的品质要优于海城和蓟县的安梨,但在冷藏180 d,20℃货架7 d期间,海城安梨的外观色泽和耐贮性最好,绥中次之,蓟县最差。与CK组相比,2种薄膜包装可在一定程度上抑制安梨果实黑皮病的发生,但1-MCP处理完全抑制了安梨低温贮藏后货架期果实的黑皮病(黑皮指数均为0),维持了果实较好的果皮颜色亮度和黄绿色程度,在一定程度上降低了果实的呼吸强度、乙烯释放量、乙醇含量和乙醛含量,从而延缓了果实的衰老,其中1.0μL/L1-MCP处理组果实的硬度和可滴定酸含量较高,0.5μL/L1-MCP处理组果实能维持较高的可溶性固形物含量。结论与CK组和2种薄膜包装组相比,0.5和1.0μL/L 1-MCP处理可作为控制安梨冷藏180 d后货架期的主要技术之一,其果实黑皮病控制指数较低,外观和内在品质良好。生产中不建议采用厚度为0.03 mm的PVC薄膜袋来贮藏安梨。如果安梨贮藏期低于180 d(中短期贮藏),可以采用厚度为0.02mm的PE薄膜袋来进行自发气调贮藏。

关键词： 安梨 产地 1-MCP 薄膜包装 贮藏品质 黑皮病

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天津地区猪链球菌9型分离株致病性的研究

董志民; 李秀丽; 田向学; 杨春蕾; 燕晓翠; 谭世旭; 张万江; 刘思国; 鄢明华; 《中国兽医科学 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：猪链球菌是引起人和动物发生猪链球菌病的主要病原,给养猪业带来巨大的经济损失,并严重危害人类公共卫生安全.本实验室从天津地区212个养猪场送检的470份临床病料中分离鉴定出8株9型猪链球菌,通过昆明小鼠LD50测定试验、PCR方法分析菌株携带的主要毒力基因、黏附力试验和溶血性试验等,对分离株的致病能力、基因特性、黏附能力和溶血能力等进行了研究.结果显示,8株9型猪链球菌分离株对昆明小鼠的LD50差异较大,最小值6.4*106CFU/m L,最大值为5.7*108CFU/m L;受试菌株中gdh、cps9J、gapdh、 fbps、orf2、mrp、sly和ef基因的检出率依次为100.0%、100.0%、62.5%、50.0%、 37.5%、0.0%、0.0%和0.0%,分为5种毒力基因型,毒力基因型与菌株对昆明鼠的致病能力无直接关系.8株9型猪链球菌对PK-15细胞均具有黏附作用,黏附能力为1.2*103~3.9*104CFU/m L,其中CHTJS55菌株最强,CHTJS9-ZL次之,CHTJS72S最弱.溶血性试验结果表明,随着孵育时间的增长,各菌株的溶血能力均增强,且孵育3 h时,CHTJS41菌株的溶血能力最强,CHTJS70菌株最弱.上述研究结果为临床制定合理、有效的猪链球菌病防控措施以及候选疫苗株的筛选提供了参考依据.

关键词： 猪链球菌9型 致病性 黏附能力 溶血性 毒力基因

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小尾寒羊GnRH基因组织表达、多态性及其与产羔性状关联分析

寸静宇; 刘秋月; 王翔宇; 狄冉; 胡文萍; 张效生; 张金龙; 赵永聚; 储明星; 《中国农业大学学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：为揭示GnRH基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(Hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)中的表达规律、多态性及其与产羔数的关系,深入了解其对小尾寒羊多羔的作用,采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只)的生殖组织及脑组织中GnRH基因的表达谱进行分析,同时采用Sequenom MassARRAY(R) SNP技术对380只小尾寒羊和共380只的小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、策勒黑羊、湖羊和草原型藏羊GnRH基因2个单核苷酸多态性位点(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)的进行多态性检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析.结果 显示,GnRH基因在下丘脑、卵巢和子宫组织均有表达,其中在下丘脑高表达.在小尾寒羊多羔群体中,GnRH基因在卵巢、大脑、下丘脑、垂体的表达均极显著高于单羔群体(P<0.01),暗示其可能参与了小尾寒羊多羔性状调控.分型发现GnRH基因2个位点基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均不显著(P>0.05).关联分析表明,GnRH基因的2个SNPs位点的多态性与小尾寒羊各胎产羔数差异均不显著(P>0.05);2个SNPs在所有绵羊品种中均表现为低度多态(PIC<0.25);卡方适合性检验表明,2个SNPs在各个绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05).

关键词： 绵羊 多羔 GnRH基因 组织表达 SNP 关联

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