鹅细小病毒VP3基因的克隆及表达

孙敏华; 董嘉文; 李林林; 袁建丰; 邝瑞欢; 胡奇林; 《广东畜牧兽医科技 》 2013

摘要：根据GenBank中的鹅细小病毒(GPV)全基因序列,设计并合成了1对特异性引物,利用PCR对GPV-Fos han-2009株的VP3基因进行了扩增。经酶切、连接、转化后,获得了pET32a-VP3重组表达载体。经BL21(DE3)原核表达显示,VP3蛋白为包涵体形式,37℃下该蛋白最佳I PTG诱导浓度为1.2 mM,最佳诱导时间为5 h。SDS-PAGE分析显示所表达的VP3融合蛋白的相对分子质量约80 kD。West ern Bl ot证实该蛋白能与番鸭抗GPV阳性血清反应,这为GPV血清学诊断方法的建立提供了物质基础。

关键词： 鹅细小病毒 VP3基因 克隆 表达

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柔嫩艾美耳球虫MAGL基因的克隆及表达

孟祥龙; 廖申权; 戚南山; 吴彩艳; 吕敏娜; 李娟; 孙铭飞; 李国清; 《畜牧与兽医 》 2013 北大核心

摘要：酰基甘油酯酶(MAGL)是将酰基甘油分解为甘油和游离脂肪酸的丝氨酸水解酶家族成员之一,在酯代谢中起着关键酶的作用,是研制抗鸡球虫药物的重要靶标。本研究利用生物信息学技术预测拼接了柔嫩艾美耳球虫MAGL基因序列,以第二代裂殖子总RNA为模板,通过RTPCR技术获得Etmagl基因。将Etmagl与pCold-43a载体连接,构建pCold-43a-Etmagl重组载体,并在大肠杆菌BL21中获得可溶性蛋白,经亲和层析获得纯化的重组蛋白。结果显示,扩增的Etmagl序列ORF长1 752 bp,编码584个氨基酸,与预测序列相似度为99%,与弓形虫MAGL相似度好(55%);IPTG诱导后融合蛋白高效表达,大小约为114 ku,经免疫印迹鉴定为目的蛋白。本研究成功利用大肠埃希菌原核表达体系重组表达并纯化了柔嫩艾美耳球虫酰基甘油脂肪酶,为建立以MAGL为靶标的抗球虫药物筛选模型奠定了基础。

关键词： 酰基甘油酯酶 柔嫩艾美耳球虫 表达 纯化

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激光扫描共聚焦显微技术在农业科研领域中的应用

张卫娜; 梅盈洁; 陈中健; 张文虎; 陆晓宇; 徐志宏; 《现代科学仪器 》 2013

摘要：激光扫描共聚焦显微技术(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)是当今世界上最先进的分子细胞生物学分析技术。LSCM能够进行三维重建、静态结构分析、活体细胞或组织功能的实时动态检测等,且能够获得较普通显微镜更高的空间分辨率。LSCM作为一项全新的实验手段和强有力的研究技术,近年来已在诸多领域显示出其强大的优势和生命力,将细胞水平研究的深度和广度大幅拓展。本文首次阐述了LSCM在农业科研领域中的应用,介绍其在作物育种、生长发育调控、植物保护、生物制药、食品加工和畜牧兽医等方面的应用。

关键词： 激光扫描共聚焦显微技术 农业科研 三维重建 静态结构分析 动态观察

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节杆菌YB6发酵滤液稳定性测定及其对盆栽番茄青枯病的防治效果

黄明媛; 顾文杰; 张发宝; 卢钰升; 解开治; 蒋瑞萍; 《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：节杆菌YB6(Arthrobacter spp.)为番茄青枯病拮抗菌株,其发酵滤液稳定性测定结果表明,该发酵滤液对热、酸碱及蛋白酶K敏感,在60℃及其以上温度失去抑菌活性;强酸强碱条件和蛋白酶K浓度1.5 mg/mL以上均会使其活性显著下降;对光照和紫外线稳定,5 h紫外线照射和35 000 lx光照条件下抑菌活性无显著变化。抗菌谱研究显示,对测试的8种病原菌均有抑制效果,其中对甘蔗黑粉病和小麦赤霉病抑制效果较强,抑菌率分别达88.6%和80.2%。以蘸根对番茄青枯病的防效最好,其防治率达到65.0%。

关键词： 节杆菌 番茄青枯病 发酵滤液 抑菌活性 防治效果

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芭蕉属rDNA的ITS序列分析

王静毅; 陈雪婷; 马子龙; 武耀廷; 《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为了研究芭蕉属ITS序列的变异情况和组群关联,以不同地理来源的33份芭蕉属野生种作为试材,对其ITS区进行扩增、测序和序列比对,构建NJ系统树。结果表明:芭蕉属中不同类型材料的ITS序列信息位点为108个,占总碱基数的24.43%,具有较强的系统发育信号;组群间序列比对结果分析发现澳蕉组ITS序列与其他组别相比具有非常显著的差异,特异性片段共21处;从序列上推断澳蕉组可能由M.schizocarpa与M.balbisiana(ITC0271)杂交产生;真蕉组和观赏蕉组没有确切的分类特性;ITS序列的分化上可能受到地理分布的影响;陈友鉴定的新种M.tongbiguanensi在ITS序列上与其他种可明显区分开,从分子水平上验证了新种的可能性。利用核糖体ITS序列对进一步深入研究芭蕉属植物遗传演化关系具有一定的指导意义。

关键词： 芭蕉属 核糖体DNA 内转录间隔区(ITS序列)

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烟草品种DB101青枯病症状发生前后部分蛋白质变化规律研究

袁清华; 谢锐鸿; 马柱文; 张振臣; 李淑玲; 李集勤; 陈俊标; 《中国烟草学报 》 2013 CSCD

摘要：应用蛋白质胶条鉴定技术,对DB101在接种后应对青枯病菌入侵时部分蛋白质组分的变化过程进行了探索。发现分子量在50～60 kD之间的部分蛋白质组分在该品种发病前后发生显著变化,进行生物信息学分析,得到2个与防御机制相关的蛋白。这些蛋白主要存在于组成剪切体的细胞核核糖核蛋白的合成和代谢通路中,和ABC转运子的合成与代谢也有关系。

关键词： 烟草 青枯病 SDS蛋白电泳 蛋白质组学

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冬瓜新品种‘铁柱’

谢大森; 何晓明; 刘文睿; 彭庆务; 江彪; 赵芹; 《园艺学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：‘铁柱’冬瓜为优质高产耐贮中晚熟杂交种。果实长圆柱形,瓜形一致,匀称,皮色墨绿,浅棱沟,平均瓜长81.3 cm,横径约19.7 cm,肉厚6.5 cm,肉质致密,致密度为1.944 g·cm-3,囊腔小,平均单瓜质量13.2 kg,可溶性固形物含量约3.68%。田间表现抗枯萎病,中抗疫病和病毒病。春季从播种至收获120 d,产量约90 t·hm-2。

关键词： 冬瓜 优质 高产 耐贮藏 品种

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2013年上半年广东蔬菜产业发展形势及对策建议

林伟君; 段东霞; 万忠; 《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：2013年上半年,广东蔬菜产业发展平稳,蔬菜播种面积、收获面积、产量比2012年同期分别增长了2.0%、1.9%、4.3%,蔬菜价格呈现上升趋势。蔬菜保险试点工作稳步推进,为进一步开展蔬菜保险工作做出了积极的探索。而蔬菜产品质量安全问题、蔬菜产业抗风险能力问题等仍将是广东省长期面临的重要产业问题,为促进蔬菜产业的发展提出对策建议。

关键词： 蔬菜产业 播种面积 价格趋势

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2012年广东鳗鱼产业发展形势与对策建议

禹绍国; 骆浩文; 黄薇妮; 万忠; 黄樟翰; 朱华平; 《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：分析了2012年广东鳗鱼产业发展现状,包括鳗鱼的产量、区域分布、进出口、产业化、鳗业供需情况、已取得新的成就和存在问题等。通过分析2012年广东鳗鱼价格的变化,预测2013年鳗鱼价格的走势,就目前广东鳗鱼产业及关联产业科技现状,提出广东省鳗鱼业的发展对策和建议。

关键词： 鳗鱼 广东 发展形势 对策建议

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柑橘新品种‘粤农晚橘’

周碧容; 谭克成; 陈云辉; 钟云; 罗卫良; 曾继吾; 钟广炎; 姜波; 吉前华; 《果农之友 》 2013

摘要：‘砂糖橘’为广东省栽培面积最大的柑橘品种,其品质优良,但成熟期集中于12月,市场价格颇受影响,生产上期望培育出成熟期不同的品种。2007年12月在广东省清远市飞来峡镇竹园村‘砂糖橘’园中发现1株4年生树的1条大枝结的果实着色期较其他枝条及其他植株果实明显延迟。

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