科研产出
HPLC法测定鱼粉中氨基酸的含量
《广东饲料 》 2013
摘要：采用高效液相色谱(HPLC)AccQ—Tag法,C18色谱柱(3.9×150 mm,5μm),6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)衍生剂,柱前衍生,醋酸钠缓冲溶液、乙腈、水为流动相,进行梯度洗脱,紫外检测器在检测波长为248nm,用氨基酸混合外标,对四个鱼粉样品中的16种氨基酸进行测定,各氨基酸测定的重复性RSD均小于0.05%,线性回归相关系数R2为0.996~0.999,平均回收率为98.6%,结果表明:HPLC法适用于鱼粉中氨基酸检测,并取得较好结果。
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硝酸银对根癌农杆菌介导的木薯遗传转化的影响
《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：旨在提高木薯遗传转化效率,以成熟培养10-15 d的华南木薯SC8品种的胚状体子叶为外植体,研究硝酸银在根癌农杆菌介导的木薯遗传转化中的影响。结果表明,硝酸银对木薯SC8胚状体子叶愈伤形成有明显的抑制作用,对不定芽的分化有显著的促进作用。硝酸银的浓度在2-8 mg/L,对未经农杆菌处理的SC8胚状体子叶不定芽的分化率从58.5%提高到87.5%;愈伤组织形成率从92%下降到15.3%。对经农杆菌处理的SC8胚状体子叶不定芽的分化率从55.3%提高到85.3%;愈伤组织形成率从87.5%下降到8.5%。同时发现,经农杆菌转化后不定芽诱导所需硝酸银的最适浓度高于未经农杆菌处理的不定芽诱导所需硝酸银最适浓度,前者为8 mg/L,后者为6 mg/L。硝酸银对木薯SC8的遗传转化有促进作用。
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高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备
《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)是世界上分布最广的侵染甘蔗的病毒之一,引起甘蔗花叶病,对甘蔗产业危害很大。根据SrMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列合成一对引物,以海南(SrMV-HN)染病植株总RNA为材料,采用RT-PCR方法克隆了长约987 bp的目的片段。将CP基因与质粒pET32a(+)连接,构建了含SrMV CP基因的融合蛋白原核表达载体pET32a-SrMVCP。然后用正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测出一条约36kD的特异融合蛋白表达谱带。融合蛋白主要以可溶性蛋白形式稳定表达。通过优化诱导条件,确立了CP基因表达的最佳条件:IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为4 h,诱导温度为30℃。用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清。通过酶联法(ID-ELISA)测定本试验制备的SrMV CP抗血清工作浓度为1∶1 000,Western blotting检测结果表明,抗血清与SrMV-HN诱导表达的CP蛋白发生特异性反应。对田间25个甘蔗样品进行检测,结果表明该抗血清的效价高、灵敏度高、特异性强,可以应用于田间样品的检测。
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细菌介导RNAi研究甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因功能
《应用昆虫学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：甘蔗Saccharum officinarum L.是热带和亚热带地区种植的主要作物之一,也是许多国家和地区重要的糖料来源。为了解决甘蔗在农业生产中常常被甘蔗螟虫为害,重点控制甘蔗二点螟Chilo infuscatellus Snellen是一条显著提高甘蔗产量和品质的有效途径。近年来,RNA干扰技术已发展成为控制虫害、提高作物品质的新方法,通过dsRNA诱导的RNA干扰可以用来研究昆虫功能基因。本文以甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因为靶标,建立细菌介导的RNAi方法表达CiHR3基因dsRNA,通过提取靶标基因dsRNA,喂饲甘蔗二点螟3龄和5龄幼虫,结果显示:3龄甘蔗二点螟幼虫在一周内发生形态显著变化、体重明显下降;5龄甘蔗二点螟幼虫在一周内形态也出现显著变化,更明显的是出现畸形蛹,非正常化蛹。本研究结果验证了昆虫蜕皮调节转录因子CiHR3可作为甘蔗二点螟生物防治的靶标基因,为后续植物介导的RNAi表达dsRNA防治甘蔗螟虫打下很好的基础。
关键词： 细菌介导RNAi 甘蔗二点螟 CiHR3 生物活性测定
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次氯酸钠有效氯降解规律分析
《广东蚕业 》 2013
摘要：次氯酸钠消毒高效、广谱,尤其消毒后能使家蚕微粒子孢子消失解体或明显变形,方便判断检测消毒效果而成为广东蚕种生产中首选的消毒剂。但次氯酸钠有效成分易降解、浓度不稳定,若使用时间控制不当,会影响到消毒效果。本文调查次氯酸钠不同浓度溶液有效氯的降解规律,拟为生产应用提供参考。
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感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价
《植物研究 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your Own"Mate&PlateTM"Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。
关键词： 香蕉束顶病毒 香蕉叶片 酵母双杂交cDNA文库
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增城丝苗型优质杂交稻广8优2168的种植表现及栽培技术
《农业科技通讯 》 2013
摘要：广8优2168是广东省农业科学院水稻研究所育成的增城丝苗型优质三系杂交稻组合,2012年1月通过广东省农作物品种审定委员会审定。该组合在广东省东源县种植表现丰产性突出,米质达国标和省标优质3级,高抗稻瘟病,中感白叶枯病,耐寒性中等,适宜东源县晚造种植及早造搭配使用。晚稻栽培,宜于7月10日前后播种,7月22日前后抛秧;早稻栽培,宜于3月5日前后播种,3月22日前后抛秧,最适抛秧叶龄为3.5叶。一般抛秧密度以1.8万穴/亩为宜,基本苗以达4.5万/亩为宜;施肥以中高施肥水平较为适宜;苗数达到穗数苗的90%时开始露晒田,抽穗结实期活水养稻、间歇灌溉,防早衰,增粒重,提高稻米品质。
关键词： 增城丝苗型 优质 杂交稻 广8优2168 种植表现 栽培技术
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