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催蕾温度对工厂化栽培杏鲍菇产量和品质的影响

江苏农业科学 2014 北大核心

摘要:以杏鲍菇六号为试验材料,研究不同催蕾温度对工厂化杏鲍菇子实体生长发育及产量品质指标的影响。结果表明,在催蕾期,15℃更有利于诱导菇蕾形成和发育,且对幼菇子实体形态指标的影响与其他温度处理差异不显著。但至采收期,不同催蕾温度处理对子实体的影响差异显著。15℃处理子实体形态指标高于其他处理,且单朵菇质量、单包产量最高,但品质指标稍差;14℃处理杏鲍菇产量低于其他处理,但品质最佳。

关键词: 催蕾温度 杏鲍菇 工厂化栽培 产量 品质

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猪圈内粪、尿、冲洗水分开收集系统设计与效果研究

农业环境科学学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:养殖场污染物减排是养殖污染控制最有效手段之一,为此在对猪排泄过程及行为观察基础上,设计了一种能分别搜集猪粪、猪尿及冲洗水的猪圈,并进行了实际运用效果监测研究。结果表明:采用设计的新猪圈,在冬、春季节猪粪收集率较对照猪圈分别提高1.1%和3.8%,猪尿收集量分别提高20.5%和15.1%;所收集猪粪含水量为73.9%和69.6%,分别降低3.1%和4.8%;猪粪中总氮、总磷较对照没有显著差异,收集猪尿液中COD、总氮和总磷含量均显著低于对照;多次冲洗直到总氮、总磷检测为阴性时为止,累计冲洗水用量,新猪圈冲洗水量冬、春季较对照分别减少了23.7%和30.5%,冲洗水中TN分别降低20.7%和24.6%,TP降低10.1%和12.3%,COD降低6.7%和2.5%,达到了养猪场污染物减量减排的目标。

关键词: 猪圈 尿 冲圈水

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江苏省水稻细菌性基腐病病原分离与抗性资源鉴定

江苏农业科学 2014 北大核心

摘要:水稻基腐病是由玉米狄克氏细菌(Dickeya zeae)侵染引起的毁灭性细菌病害,对水稻产量和品质具有潜在的威胁。分别从江苏省南京市、扬州市采集水稻病根,通过菌落形态特征观察、分子鉴定以及致病性验证等对致病细菌进行分离和鉴定;同时筛选可供利用的太湖流域水稻抗性品种。结果表明:分离到的水稻基腐病致病菌JS2012是玉米狄克氏细菌;从56份太湖流域水稻资源中共筛选到26份抗性资源,结果为进一步研究水稻细菌性基腐病以及培育抗病品种奠定了基础。

关键词: 水稻 细菌性基腐病 玉米狄克氏细菌 太湖流域 水稻抗性品种

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重组T7噬菌体生物学特性的研究

动物医学进展 2014 北大核心 CSCD

摘要:以大肠埃希菌BL21为宿主菌研究重组T7噬菌体生物学特性。将构建好的重组T7噬菌体扩增纯化,分析其对pH、温度及离子浓度的敏感性,并将重组噬菌体与宿主菌以不同比例混合测定最佳感染复数并绘制其一步生长曲线。结果表明,重组T7噬菌体的热稳定性较弱,在60℃时20min效价明显下降,在70℃时5min内即会全部失活;pH 4~11的范围内重组T7噬菌体均可稳定存在;培养基中Mg2+浓度为10mmol/L及Ca2+浓度为5mmol/L时最有利于噬斑的形成,出斑率提高了约20%;重组噬菌体感染其宿主大肠埃希菌的最佳感染复数为10-5;其一步生长曲线的潜伏期约30min,裂解期约150min,裂解量为126pfu/cell。构建的重组T7噬菌体具有较强的裂解能力,潜伏期短,裂解量大,对理化因素稳定性好,为进一步大规模、高效率制造口蹄疫表位疫苗提供了理论基础。

关键词: 重组T7噬菌体 疫苗 生物学特性

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从蛋白质和转录水平鉴定类猪圆环病毒P1存在ORF2和ORF3

中国农业科学 2014 北大核心 CSCD

摘要:【目的】确定类猪圆环病毒P1存在开放阅读框ORF2和ORF3;【方法】采用Trizol法,提取类猪圆环病毒P1分子克隆转染PK-15细胞的总RNA,纯化之后,分别用P1 ORF2和ORF3特异性引物进行RT-PCR,应用AxyPrepTM DNA凝胶回收试剂盒回收PCR产物,转化Trans5α感受态细胞,挑取单菌落,经PCR检测为阳性后测序。同时,利用rapid-amplification of cDNA ends(RACE)技术分别扩增P1病毒ORF2和ORF3的5′-与3′-末端。另外,根据P1 ORF2和ORF3的序列预测其B细胞抗原表位,采用标准的逐步固相合成法合成表位肽,与载体蛋白KLH偶联后,免疫新西兰大白兔制备抗P1 ORF2和ORF3的多克隆抗体。采用常规间接ELISA法检测分离血清效价,包被抗原用合成肽,450 nm波长下测定,血清抗体效价为S/N≥2.1的血清最高稀释度。然后,用P1双拷贝分子克隆转染PK-15细胞,通过免疫组化方法对该多抗与P1的反应性进行检测,同时利用实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中P1的拷贝数。【结果】利用ORF2和ORF3特异性引物对P1 RNA进行的RT-PCR,均能扩增出目的片段,回收测序大小分别为111 bp和128 bp,分别与P1 ORF2和ORF3进行同源性比较,序列同源性均为100%;RACE技术分析,得到P1 ORF2的5′-和3′-RACE末端分别为第11位(G)和第168位(T),P1 ORF3的5′-和3′-RACE末端分别为第285位(T)和第579位(A)。根据预测结果,合成肽的氨基酸序列分别为ORF2:CLSRLPQSERPPGRW和ORF3:CVYPKVRERRVLKMP;用ORF2和ORF3表位肽与载体蛋白KLH的偶联物免疫新西兰大白兔制备的多克隆抗体效价均达到1﹕512 000以上,并且能够与P1病毒发生特异性显色反应,应用蓝色DAB显色试剂盒染色结果为紫蓝色,多数在细胞浆,少数在细胞核,而对照组细胞无显色反应。定量PCR检测结果显示,P1可以在转染P1双拷贝分子克隆的PK-15细胞中复制,并且转染后104 h增殖量达最大。【结论】通过转录分析和免疫组化试验分别从转录和蛋白质水平上证实了类猪圆环病毒P1存在ORF2和ORF3。

关键词: P1 ORF2 ORF3 RT-PCR RACE 免疫组化

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不同地理种群二化螟Ty3/gypsy反转座子天冬氨酰蛋白酶(AP)基因序列的克隆与分析

昆虫学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:【目的】Ty3/gypsy反转座子是广泛存在于生物体内的一类反转座子。反转座子上的天冬氨酰蛋白酶(aspartic protease,AP)基因是反转座子发生转座所需的一个重要基因。但由于该基因家族成员间变异较大,较难利用简并引物克隆得到该基因,所以对该基因家族成员的研究很少。【方法】本研究采用PCR方法克隆了二化螟Ty3/gypsy反转座子的AP基因序列,并对其序列特征和地理种群变异进行了分析。【结果】克隆获得的二化螟Chilo suppressalis(Walker)Ty3/gypsy反转座子中的AP基因具有独立的开放阅读框(open reading frame,ORF),长528 bp,编码的蛋白含175个氨基酸残基(GenBank登录号:KF886014)。Conserved Domain Search在线工具分析显示,该蛋白中含有一个特异的Asp_protease_2保守功能域。从7个二化螟不同地理种群中共克隆获得70份AP基因拷贝。对同一基因座位上的AP序列多重比对分析,发现共存在46处碱基替换,其中碱基转换(transition)有31处,碱基颠换(transversion)有15处,70份拷贝中有69份拷贝是完整的ORF,能编码完整的蛋白。从碱基替换形式看,A→G的变异形式出现最多,有15处;其次是T→C的变异形式,有11处;其余的变异形式都很少。对比这7个不同地理种群,没有发现碱基的替换存在明显的地理区划差异。【结论】碱基的替换形式与二化螟所处的地理区域无明显相关性。本研究对于认识反转座子序列的变异特点有所帮助。

关键词: 二化螟 反转座子 Ty3/gypsy 天冬氨酰蛋白酶 基因克隆 序列分析

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温度对番茄根结线虫抗性相关基因表达的影响

江苏农业学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:为阐明番茄抗根结线虫基因Mi-1在土壤温度高于28℃时丧失抗性的原因,选用3份番茄材料Motelle(Mi-1)、LA2157(Mi-9)和新选育获得的具有热稳定抗根结线虫特性的栽培番茄材料ZN17(Mi-HT)进行研究。通过根结线虫的人工接种鉴定,确定Motelle在高温条件下丧失抗性,而ZN17和LA2157在高温条件下仍然具有良好的抗性。利用特异引物对各番茄材料的c DNA模板进行扩增、测序和序列比对分析,发现这3份材料扩增片段具有很高的相似性,因此利用该引物对各材料高温和常温条件下的基因表达变化进行分析,结果表明,Mi-1在高温条件下不表达是番茄材料Motelle高温条件下对根结线虫抗性丧失的原因。番茄材料LA2157和ZN17中扩增得到的相关基因表达状况与其在高温条件下对根结线虫的抗性表现相吻合。

关键词: 番茄 根结线虫 热稳定抗性 表达分析

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1例番鸭H9亚型禽流感病毒与鸭疫里氏杆菌混合感染的诊治

畜牧与兽医 2014 北大核心

摘要:鸭疫里氏杆菌和H9亚型禽流感病毒是对养鸭业危害严重的2种病原。鸭疫里氏杆菌血清型众多,免疫保护有一定的血清型特异性,使其不能得到有效控制,给养禽业造成了巨大的经济损失。近几年,H9亚型禽流感已成为危害我国家禽养殖业的主要流行疫病之一,临床上不同品种、日龄的鸡、鸭均有发生,

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早熟型多花黑麦草生产性能及饲用品质研究

草地学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:为适应不同耕作制度以及作物茬口的需要,筛选具有较好生产性能的速生牧草品种,以6个早熟型多花黑麦草(Lolium multiflorum)品种为材料,研究了不同品种的生长适应性和饲草品质。结果表明:6个品种(系)表现为越冬后早生速生,全生育期195~200d,饲草产量主要集中于4月初的第1次刈割,约占总产量的50%。生物产量在不同品种之间差异显著(P<0.05),其中LM015生物产量最高,为12750kg·hm-2,Waseaoba次之,产量为12532kg·hm-2,Sachiaoba最低,为11542kg·hm-2。随生育期的推进,各品种的酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维含量增加,可溶性碳水化合物含量降低,干物质体外消化率下降。不同品种的单位面积总可消化养分产量存在显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)差异,LM015的总可消化养分极显著高于其他品种(P<0.01),为8770kg·hm-2。综合饲草产量和饲草品质,LM015最好,Waseaoba次之,均适合该南京地区栽培利用。

关键词: 多花黑麦草 产量 品质

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~(15)N示踪的水稻氮肥利用率细分

作物学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:以粳稻武运粳23和超级杂交籼稻Y两优2号为供试品种,应用15N示踪方法研究不同时期施肥对水稻不同阶段氮肥利用率的影响,以确定不同时期施肥的最佳阶段氮肥利用率。结果表明,基肥在基肥阶段(移栽后的8 d左右)的吸收利用较低,2012年水稻基肥氮(15N)吸收量不到5 kg hm–2,2013年最大为7.5 kg hm–2,回收利用率在1.5%~11.5%之间;基肥主要是在蘖肥阶段(分蘖肥与穗肥之间)被吸收,其回收利用率在6.6%~24.9%之间,平均为15.6%;穗肥阶段(穗肥后到成熟)基本不再吸收基肥。基肥氮的总体恢复利用效率不高,在9.1%~22.8%之间,品种及氮肥运筹对基肥氮的总体恢复利用效率影响不显著。蘖肥主要在蘖肥阶段发生作用,施穗肥后水稻基本不再吸收蘖肥。蘖肥的总体恢复吸收利用率和基肥相当,在17%~34%之间,Y两优2号高于武运粳23。穗肥的回收效率最高,在54.0%~82.1%之间,武运粳23低于Y两优2号。水稻在整个生育期的总体氮肥恢复效率随氮肥用量的增加而下降,变化在32%~64%之间。水稻一生中吸收积累的氮素中,基肥的贡献占4.13%~10.59%(平均6.92%),蘖肥占3.98%~11.75%(平均7.58%),穗肥占13.32%~37.56%(平均26.02%),土壤的贡献在45.71%~70.83%(平均59.91%)之间。基蘖肥用量越大,其损失也越大,总体氮肥利用率也越低。研究结果证明,在水稻氮肥管理中必须考虑水稻各阶段对不同时期施肥的吸收利用情况,从而提高水稻氮肥利用效率,保证产量的同时减少不必要的损失。

关键词: 水稻 氮肥管理 15N示踪法 不同施肥阶段 氮肥利用率

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