科研产出
气调保鲜条件下广叶绣球菌贮藏期理化指标变化规律
《菌物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以广叶绣球菌Sparassis latifolia子实体为供试材料,对其进行定向聚丙烯（oriented polypropylene,OPP）膜气调包装,贮藏在4℃环境中,测定其在0、4、8、12、16、20、24d各时间点的理化指标。结果表明,广叶绣球菌失重率、色差随着贮藏时间的延长逐渐升高。营养成分总糖和还原糖含量减少,总蛋白和可溶性蛋白呈现出不断分解合成的动态变化过程,游离氨基酸含量增加。活性成分总酚含量先降低后升高,总葡聚糖含量减少,β-葡聚糖、麦角甾醇含量先增加后减少。贮藏过程中形态和活性成分的变化情况能间接表明采后品质所处阶段。相关气调包装低温贮藏下广叶绣球菌理化指标变化规律可为后续改进保鲜方法、提高贮藏期营养价值奠定理论基础。
关键词： 广叶绣球菌 定向聚丙烯（OPP）膜 低温贮藏 理化指标
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铁氧化物影响下生物质炭对土壤细菌群落结构的影响
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探究铁氧化物影响下不同制备方式获得的秸秆生物质炭（水热炭、裂解炭）对土壤细菌群落结构及组成的影响,以北方棕壤土为研究对象,分别添加铁氧化物、玉米秸秆及其制备产生的水热炭、裂解炭,进行为期120 d的室内培养试验.采用高通量测序技术,通过测定不同处理下土壤细菌16S rDNA V3～V4区序列,分析生物质炭及其与铁氧化物交互施用对土壤细菌群落结构的影响.结果表明:施用裂解炭对细菌丰度（Chao1指数）和多样性（Shannon指数）无明显影响,对细菌群落结构的影响也较小;单独施用水热炭和玉米秸秆均显著降低了细菌的丰度和多样性（P<0.05）,改变了土壤细菌群落结构,其中,施用水热炭后,土壤中变形菌门和放线菌门的相对丰度显著提高,而绿弯菌门和芽单胞菌门的相对丰度显著下降,表明水热炭对土壤细菌产生一定的负面影响;相较于单独施用水热炭,铁氧化物与水热炭的混施则显著提高了细菌的丰度和多样性,利于绿弯菌门的生长,但显著降低了变形菌门的相对丰度,在一定程度上改良了土壤环境.因此,在施用水热炭的同时,建议添加铁氧化物以抵消水热炭对土壤理化性质的不利影响.冗余分析和相关性分析结果表明,NH+4-N含量是影响细菌群落丰度和多样性的主要因素,其他土壤理化性质也与细菌优势菌群之间具有显著相关性.
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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定陈年老茶中16种真菌毒素残留
《食品科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：建立一种超高效液相色谱-串联质谱法测定不同种类陈年老茶中16种真菌毒素的方法。样品经甲酸-乙腈（10∶90,V/V）溶液提取,提取液加入QuEChERS盐包振摇离心,过OASIS PRIME HLB小柱和dSPE净化管处理,以ACQUITY UPLC HSS T3C18色谱柱分离,采用电喷雾正离子的多反应离子监测模式,茶叶基质匹配标准溶液。结果显示:16种真菌毒素在各自浓度范围内呈良好线性关系（R>0.999）;在茶叶基质中3个不同添加水平下的加标回收率在63.4%～109.7%之间,相对标准偏差为1.7%～11.3%,方法检出限为0.03～7.00μg/kg。选取了121份陈年老茶样品进行检测,1份乌龙茶样品检出黄曲霉毒素B1,含量为34.0μg/kg,1份红茶样品检出赭曲霉毒素A,含量为1.6μg/kg。本方法稳定、准确、灵敏、快速,能够满足各种茶叶样品中多毒素残留分析的需求。
关键词： 超高效液相色谱-串联质谱法 陈年老茶 真菌毒素
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利用BSA-Seq方法鉴定谷丰B抗稻瘟病基因
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】挖掘和鉴定谷丰B稻瘟病抗性基因,了解谷丰B稻瘟病抗性遗传模式。【方法】以谷丰B和日本晴杂交获得F1和F2代遗传群体,接种稻瘟菌不同生理小种并分析抗病遗传模式;在F2群体中挑选极端抗/感单株构建DNA混合池,利用群体分离分析法（BSA）定位关联区域。【结果】谷丰B对KJ201、 RB22、 CHNOS、RB6、2Y838-1、501-3和IR16-1等菌株均表现高抗性,表明谷丰B基因组可能携带了广谱高抗稻瘟病基因。谷丰B和日本晴杂交,F1群体表现抗501-3和IR16-1,F2群体的抗病/感病分离比不符合3∶1,推测谷丰B基因组存在多个位点影响稻瘟病抗性。对F2群体的极端抗病、感病混合池及亲本DNA进行全基因组测序,鉴定了1 756 964个单核苷酸多态性（SNPs）标记。分析子代△SNP-index,定位到2个与抗病性显著关联区间,分别为Chr.6:10 082-11397 kb和Chr.11:120-266 kb。其中,6号染色体的关联区间与Pi2/9抗病位点等位,区间内含有4 006个SNPs和623个插入缺失（InDels）标记;11号染色体的关联区间含有752个SNPs和195个InDels标记。【结论】谷丰B对强致病力501-3菌株抗性可能是由第6号和11号染色体上的基因共同控制。研究结果为谷丰B抗性基因的精细定位及基因克隆奠定了基础,并为水稻抗稻瘟病分子标记辅助选择提供标记资源。
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镁营养对西瓜叶绿素荧光特性及生理代谢的影响
《福建农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探讨镁营养对西瓜（Citrullus lanatus）生长发育和生理代谢的影响,明确西瓜生长的适宜镁浓度范围。【方法】采用砂培法,对西瓜进行5个施镁质量浓度(0、24、48、96和192 mg·L-1)处理,并测定西瓜在不同施镁浓度下的生长特性（叶片和根系形态、生物量积累）、果实品质（维生素C、可溶性固形物、可溶性蛋白和可溶性糖含量）、叶绿素荧光特性和生理响应（渗透调节、膜伤害和抗氧化酶系统）。【结果】用24～96mg·L-1的镁素可以降低西瓜叶片膜伤害,提高光系统Ⅱ（PSII）活性,增加叶片抗氧化物质谷胱甘肽（glutathione,GSH）和还原型抗坏血酸（reducedascorbicacid,AsA）含量,增强叶片抗氧化酶活性,包括过氧化物酶（peroxidase, POD）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、过氧化氢酶（catalase, CAT）和单脱氢抗坏血酸还原酶（monodehydroascorbate reductase,DHAR）,降低叶片丙二醛（malondialdehyde,MDA）和脯氨酸（proline, Pro）含量以及细胞膜透性,促进AsA-GSH循环,增强光合作用,提高生物量积累,增加果实中维生素C、可溶性固形物、可溶性蛋白和可溶性糖含量。其中,48 mg·L-1镁处理对西瓜的生长发育增效最明显,而缺镁(0 mg·L-1)和镁过量(192 mg·L-1)胁迫下,西瓜叶片产生膜脂过氧化伤害,根系变短,叶绿素荧光参数放氧复合体（OEC）、电子传递量子产额(φEo)、受体库容量（Sm）和单位面积反应中心数量（RC/CSo）降低,单位反应中心光能的吸收（ABS/RC）、耗散（DI0/RC）、捕获（TR0/RC）及QA还原速率（Mo）增加,叶片光合机构完整性被破坏,光合作用减弱,西瓜生长受到明显抑制,其中缺镁影响最严重。【结论】缺镁和镁过量处理降低西瓜PSII活性,抑制西瓜生长,而适量增施镁可有效提高西瓜的生理活性,PSII的结构和功能稳定,光合作用强,西瓜生长好,果实品质高,48 mg·L-1为西瓜栽培最适宜施镁质量浓度。
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硒处理下冰菜的转录组响应及相关基因功能分析
《西南农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探索外源硒对冰菜转录组相应机制影响及相关功能基因挖掘。【方法】利用高通量测序技术,构建冰菜硒响应转录组数据库。【结果】硒处理对冰菜植物激素信号转导途径影响:除油菜素类固醇外,其它7个激素代谢途径均产生重要影响。硒处理浓度的增加,能够促进生长素信号转导,激活下游基因表达;细胞分裂素信号转导途径中,AHP对硒处理敏感,A-ARR受硒处理呈显著上调作用,但均对硒浓度变化不敏感;硒处理浓度增加,使得赤霉素信号转导下游TF得到激活;脱落酸信号转导途径中,低硒处理（10 mmol/L）导致SnRK2表达量显著降低,抑制气孔关闭,导致冰菜易脱水;硒处理（100 mmol/L）SnRK2蛋白表达量显著恢复;乙烯信号转导途径中ETR和ERF1/2表达量随着硒处理浓度的提高而降低;硒处理（10 mmol/L）促进茉莉酸信号途径中JAZ和MYC2表达量上调,调节硒对冰菜的逆境胁迫,硒处理（10 mmol/L）对JAZ和MYC2表达量影响不显著;水杨酸信号转导途径中TGA和PR-1在硒处理（10 mmol/L）表达量无上下调表达,硒处理（100 mmol/L）TGA表达量下调,PR-1表达量上调,激活冰菜硒响应能力。经实时定量PCR分析,7个DEGs相对表达量与转录组表达谱分析趋势完全一致。【结论】本研究为冰菜硒关键基因挖掘和遗传育种奠定了一定基础。
关键词： 冰菜 转录组 差异表达基因 植物激素信号转导途径
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黄秋葵实时荧光定量PCR内参基因的克隆与筛选评价
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为筛选黄秋葵实时荧光定量PCR的稳定内参基因,本研究以绿白1号为试验材料,根据黄秋葵RNA-seq数据库,筛选并验证获得18SrRNA、ACT、EF-1α、TUA、TUB、GAPDH等6个内参基因ORF序列;以黄秋葵不同组织、不同发育时期果实、不同发育时期叶片和低温、高温、干旱胁迫处理的叶片为材料,利用实时荧光定量PCR技术分析测定基因表达量,并结合GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件评价6个内参基因的稳定性.结果表明,6个基因在不同组织、各发育阶段及不同胁迫下均有表达,但表达稳定性不尽相同,其中,EF-1α在黄秋葵果荚发育、高温胁迫下表达稳定性最好;18SrRNA在黄秋葵各组织、叶发育和干旱胁迫下表达稳定性最优;ACT在低温胁迫下表现最稳定.此外,在29个处理中,18SrRNA、EF-1α、ACT表达均较稳定,可以用于荧光定量表达分析.本研究结果为黄秋葵基因功能分析和调控机理研究提供了基础.
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吲哚放线杆菌AIFJ1607株全基因组测序及耐药特性分析
《中国兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：研究旨在探究吲哚放线杆菌AIFJ1607株的多重耐药机制。首先采用生化试验和16S rRNA的测序分析来鉴定细菌种类,然后应用药敏和MIC试验来分析20种抗生素的敏感性,再次采用全基因组测序和生物信息学方法来分析细菌的全基因组序列特征和耐药特性,最后分离纯化细菌质粒并测序来分析该质粒特征。结果显示,生化鉴定和16S rRNA测序分析结果显示该菌生长需要NAD或X因子的参与,过氧化氢酶和吲哚为阳性,尿素酶和cAMP试验为阴性,且16S rRNA序列与吲哚放线杆菌具有99%的同源性。药敏试验结果显示该菌对庆大霉素、妥布霉素、大观霉素、链霉素、新霉素、卡那霉素、青霉素、头孢、氯霉素、氟苯尼考、磺胺、四环素、博莱霉素、甲硝唑和恩诺沙星等15种抗生素耐药。全基因组序列分析结果显示了13种耐药基因,分别为ble、NimC/NimA、tetB、norA、blaROB-1、sul2、Cat3、aph33ib、aac（3）-Ⅱa、aph33ib、aph6id、aph3ia、ant3ia,另外还有一种砷抑制剂arsR基因。并且发现了多种插入序列（IS）,分别为IS6、IS10、IS30、ISApl1和ISApl4。质粒序列分析结果显示质粒pAIFJ1含有氟苯尼考耐药基因floR,且与副猪嗜血杆菌质粒pHPSGC具有很高的同源性。结果表明,该分离菌株AIFJ1607为吲哚放线杆菌,药敏试验结果与全基因组序列分析的耐药基因结果一致,分离质粒与副猪嗜血杆菌中的质粒高度同源预示着该质粒pAIFJ1可能在吲哚放线杆菌和副猪嗜血杆菌之间进行水平转移。
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鳗鲡疱疹病毒ORF8基因的克隆表达及转录时相分析
《大连海洋大学学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为研究鳗鲡疱疹病毒（Anguillid herpesvirus,AngHV）ORF8基因的特性,根据GenBank中AngHV参考株（NC013668）的ORF8序列设计引物,采取PCR方法从分离的AngHV福建病毒株（AngHV-FJ）基因组中扩增出特异性片段,克隆至pMD19-T载体,经酶切和测序验证,获得了ORF8的基因序列。结果表明:经生物信息学分析,ORF8编码的蛋白稳定性较好,存在跨膜结构且抗原表位多,符合病毒囊膜蛋白的特征;经转录时相分析,ORF8是病毒的早期基因（early gene, E）,可能在病毒感染的早期阶段就发挥作用;将ORF8克隆至表达载体pET-32a,转化入大肠杆菌E.coli BL21中,以IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE及Western blot检验,实现了ORF8在大肠杆菌中的高效表达,进一步通过割胶的方法获得了相对分子质量约为44 000的高纯度融合表达蛋白。本研究为下一步评价该表达蛋白的免疫效果和制备抗体,以及开发免疫诊断试剂和疫苗提供了研究基础。
关键词： 鳗鲡疱疹病毒 ORF8基因 转录时相 克隆 原核表达
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金花茶组叶片生化成分评价及其最佳采收期研究
《热带作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本研究以26份来源于6种金花茶组植物、不同表型防城金花茶和不同月份采收的防城金花茶的成熟叶片为材料,建立同时测定芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚4种黄酮成分的HPLC法,以及优化了测定茶多酚、总黄酮、总多糖和总皂苷成分含量的紫外分光光度法,基于以上8种成分含量,结合主成分综合评分和聚类分析的化学计量学方法,对不同来源金花茶叶片生化成分进行综合评价。结果表明:8种成分含量在不同来源金花茶叶片中存在差异,其中无名金花茶8种成分含量均较高,四季金花茶、防城金花茶次之;8年生1—12月份采收的防城金花茶叶片中,总皂苷、总黄酮和总多糖含量均表现为升-降-升-降的变化规律,并在10月含量达到最高;5年生不同种（S1～S14）主成分综合评分顺序为:无名金花茶>四季金花茶>防城金花茶（花蕾大、花多、不抗寒、花黄且大、尖果）>显脉金花茶>凹脉金花茶>小果金花茶;8年生不同月份（S15～S26）主成分综合评分顺序为:10月采>2月采>3月采>4月采>5月采>7月采>6月采>1月采>8月采>12月采>11月采>9月采,其中无名金花茶、四季金花茶及防城金花茶中花蕾大、花多、花黄且大等表型的金花茶叶片与2—4月份和10月份采集的8年生金花茶叶片的多指标综合评分排序位列前10;聚类分析结果将供试26份样品分为5类。综上所述,金花茶叶片的生化成分与金花茶植物种类和采收期有关,无名金花茶、四季金花茶和防城金花茶中花蕾大、花多、不抗寒、花黄且大的表现型的综合生化成分较高,初步确定防城金花茶叶片的适宜采收期为2—4月份和10月份,所建立的多指标定量结合化学计量学分析方法为金花茶组植物叶片的生化成分评价提供依据。
关键词： 金花茶组 多成分测定 化学计量学 品质评价 采收期
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