科研产出
巴西橡胶树两个蔗糖合成酶基因的克隆和表达分析
《热带亚热带植物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了解蔗糖合成酶在巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)生长和发育过程中的功能,利用RACE技术从巴西橡胶树中克隆了蔗糖合成酶基因,并对基因的表达特征进行了分析。结果表明,从巴西橡胶树中克隆了两个蔗糖合成酶基因(HbSS1和HbSS2),HbSS1全长2864 bp,编码806个氨基酸;HbSS2全长2815 bp,编码811个氨基酸。两个基因编码的蛋白具有典型的植物蔗糖合成酶结构特征,包含1个磷酸化位点和两个保守的功能域。半定量RT-PCR分析表明,HbSS1和HbSS2在各组织器官中均有表达,其中HbSS1在叶中的表达量最高,HbSS2在树皮中的表达量最高,这说明HbSS1和HbSS2可能参与了各组织的生长和代谢过程,且功能有所分化。
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菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用
《植物保护 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：菠萝凋萎相关病毒-1(Pineapple mealybug wilt associated virus-1,PMWaV-1)是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物,建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为y=-3.307×log x+38.18,相关系数r2为0.998。试验结果表明,该方法能特异性地检测PMWaV-1,对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应;最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1.98%,是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。
关键词： 菠萝凋萎相关病毒-1 TaqMan探针 实时荧光定量RT-PCR 检测
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鸡热休克蛋白70基因克隆、单核苷酸多态性检测及生物信息学分析
《中国畜牧兽医 》 2014 北大核心
摘要：试验旨在克隆鸡热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因,获得基因序列并分析基因结构和相关遗传变异,检测单核苷酸多态性(SNP)位点在文昌鸡和北京油鸡群体中的分布。试验利用PCR扩增鸡HSP70基因组序列,通过克隆测序寻找基因中的突变位点。在鸡HSP70基因组中共发现3处突变位点,分别位于启动子区(T-564C)、5′非翻译区(A-68G)和编码区(A-1044G)。使用PCR-RFLP方法检测T-564C位点后发现,等位基因C在文昌鸡和北京油鸡中的基因频率分别为0.87和0.55。利用生物信息学分析发现,鸡HSP70基因启动子区域存在一些潜在的转录因子结合位点,如Sp1、AP-1、GATA-1、CREB、MZF1和HSF2等。
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苦瓜新品种引进比较试验
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为筛选出适合海南屯昌地区种植的苦瓜优良新品种,通过引进全国8个优良苦瓜新品种,对其农艺性状、抗病性、抗逆性和产量等方面进行了比较研究。结果表明:中华一号和桂农科1号苦瓜的综合性状表现良好,小区产量分别为43.30、43.23 kg,折合每公顷产量33 324.30 kg和33 270.45 kg,比枫木苦瓜(CK)分别增产16.43%和16.24%;其他参试品种也表现较好,产量均极显著高于枫木苦瓜(CK)。因此,中华一号和桂农科1号苦瓜在农艺性状、抗性和产量等方面均表现较佳,较适合海南冬季种植,可进行大面积示范推广。
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海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达
《分子植物育种 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本研究利用从海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到高效表达载体p GEX-4T-1上,构建重组载体p GEX-4T-Sp BADH,并对GST-Sp BADH融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时间增长GST-Sp BADH融合蛋白表达量提高,在37℃时,OD为0.6左右,诱导5 h GST-Sp BADH融合蛋白的表达量达到最大,在0.2 mmol/L IPTG浓度下,可以有效诱导GST-Sp BADH融合蛋白的表达。本研究结果以期解析Sp BADH基因的功能以及在海马齿抗盐过程中的作用机理。
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海南淮山茎腐病菌对戊唑醇的敏感性测定
《河南农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：研究海南淮山茎腐病菌株对戊唑醇的敏感性,以期为该病害的综合防治提供实践和理论依据。通过单孢分离获得32株茎腐病菌,分别采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定戊唑醇对各菌株的毒力,并进行毒力回归和敏感性分析。结果表明:戊唑醇对菌丝生长具有较强的抑制作用,其抑制中质量浓度(EC50)最小值、最大值、平均值分别为0.063 797、0.407 005、(0.228 3±0.080 5)μg/mL;该药对孢子萌发的抑制效果更明显,其EC50最小值、最大值、平均值分别为0.002 550、0.104 858、(0.031 8±0.024 2)μg/mL。正态分析表明:菌丝生长对戊唑醇的敏感性呈正态分布;而孢子萌发的敏感性呈非正态分布,其最大EC50和最小EC50之间的跨度较大,EC50表现不连续,在高质量浓度区仍有不敏感菌株存在,这表明在自然界中存在个别抗药性较强的淮山茎腐病菌株。
关键词： 戊唑醇 淮山茎腐病 尖孢镰刀菌 菌丝生长 孢子萌发 敏感性
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海南安诺兰RAPD-PCR反应体系的建立
《贵州农业科学 》 2014 北大核心
摘要：为海南安诺兰植物种质资源研究提供技术支持,以海南特有安诺兰种质为试验材料,采用正交试验,对影响RAPD分子标记的模板DNA、dNTPs、Taq聚合酶、Mg2+浓度和引物浓度5个因素进行优化,建立适合于安诺兰RAPD标记的反应体系。结果表明:5个因素优化后在20μL反应体积的浓度分别为模板DNA 60ng,dNTPs 150μmol/L,Taq酶1.0U,Mg2+2.0mmol/L,引物0.5μmol/L。
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海南省特有安诺兰ISSR体系的优化
《江苏农业科学 》 2014 北大核心
摘要：以海南省特有安诺兰为基因组材料,采用改进的CTAB法提取安诺兰叶片中的基因组DNA,通过单因素试验,对ISSR-PCR反应体系中各影响因子进行优化和筛选,建立适合海南安诺兰的ISSR-PCR反应体系:15μL PCR反应体积,10×PCR Buffer,200μmol/L dNTPs,0.5μmol/L引物,1.5 mmol/L Mg2+,1.0 U Taq DNA聚合酶,40 ng模板DNA。
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