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巴西橡胶树HbTCTP基因的克隆及表达

分子植物育种 2009 CSCD

摘要:在先前的研究中通过抑制缩减杂交获得了一个在巴西橡胶幼态无性系与老态无性系胶乳中差异表达的片段(HbSSH12),BlastX分析表明,由该片段编码的氨基酸与麻疯树(Jatropha curcasL.)翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)的同源性达到92%。本研究根据HbSSH12的序列信息设计引物,通过3'-RACE的方法获得了一个长832bp的cDNA(命名为Hb TCTP),序列分析表明Hb TCTP含有507bp的阅读框,68bp的5'-UTR和255bp的3'UTR,编码168个氨基酸,该氨基酸序列与麻疯树、油棕、花生、南瓜、番茄和拟南芥的TCTP同源性分别达到93.45%、90.48%、89.29%、85.12%、82.74%和79.76%。RT-PCR表明,Hb TCTP在巴西橡胶叶片、胶乳及树皮中都有表达,乙烯利处理可诱导Hb TCTP的表达,割胶抑制Hb TCTP的表达,表明Hb TCTP可能参与伤信号或乙烯信号传导。Hb TCTP的表达分析有助于解析橡胶树幼态无性系高产的分子机制。

关键词: 乙烯 表达 巴西橡胶树 翻译控制肿瘤蛋白基因

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高效液相色谱法测定植物性食品中噻菌灵残留量

理化检验(化学分册) 2009 北大核心 CSCD

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重组马槟榔甜蛋白MabinlinⅡ在大肠杆菌中的表达

基因组学与应用生物学 2009 北大核心 CSCD

摘要:MabinlinⅡ是我国所特有且唯一的植物甜蛋白,在体外至今没有得到具有甜味的基因表达产物。本文根据已知马槟榔甜蛋白的序列设计引物克隆MabinlinⅡ基因,对基因进行剪切重组。将重组基因克隆至大肠杆菌表达载体pET-30a(+)中,构建了3个重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),得到三株表达重组马槟榔甜蛋白的大肠杆菌工程菌。经IPTG诱导,3个重组MabinlinⅡ基因可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。

关键词: 马槟榔 甜蛋白 诱导表达

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基于SSR标记的橡胶树无性系鉴定方法的建立

热带作物学报 2009 CSCD

摘要:从88对橡胶树SSR引物中筛选出5对产物清晰、扩增稳定的引物,采用6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合快速银染检测的方法,构建了87份橡胶树的DNA指纹图谱。5对引物共扩增出16条带,平均每对引物可扩增出3.2条带,多态性条带为15条,扩增条带分布在148~342bp,无性系之间只存在1~2个片段差异,说明遗传差异小;根据建立的无性系数字指纹图谱,能逐一区分65个无性系,表明应用SSR分子标记技术进行橡胶树无性系的鉴定是可行的。

关键词: 橡胶树 SSR 指纹图谱

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茉莉酸反应基因转录抑制因子JAZ蛋白家族研究进展

热带作物学报 2009 CSCD

摘要:茉莉酸类物质在调节植物对逆境的反应和生长发育方面有重要作用。最近,从模式植物拟南芥中分离鉴定了茉莉酸响应基因的转录抑制因子JAZ(茉莉酸ZIM结构域蛋白)蛋白家族的12个成员,这是植物茉莉酸信号途径分子机制研究的重大进展。JAZ蛋白不仅是联系COI1和下游茉莉酸反应基因的环节,而且COI1-JAZ蛋白的相互作用导致发现活性形式的茉莉酸类物质及其受体。笔者综述了JAZ蛋白家族的结构特点、不同成员之间及其与MYC转录因子之间的相互作用,以及JAZ蛋白对茉莉酸响应基因的转录调节机制,并展望其在橡胶生物合成中的调节作用。

关键词: 拟南芥 茉莉酸信号途径 SCFCOI1 JAZ 茉莉酸响应基因 26S蛋白酶体

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两个鹤蕉切花品种的贮藏保鲜技术

热带作物学报 2009 CSCD

摘要:在室内空气相对湿度为80%~85%、温度为18~28℃的条件下,研究‘巧舞女’(Choconian Dancer)和‘阳光’(Strawberries and Cream)2个鹤蕉(Heliconia psittacorum Linn.)品种的切花贮藏保鲜技术。结果表明:鹤蕉‘巧舞女’预处理以花枝在浓度为1mmol/L的STS中浸泡10min的效果最佳,贮藏寿命较对照的延长了6.5d;瓶插处理以处理组合3g/L蔗糖+400mg/L8-HQ(8-Hydroxyquinoline)+2mg/L6-BA的保鲜效果最佳,瓶插寿命较对照的延长了7d。鹤蕉‘阳光’预处理以1mmol/LSTS浸泡8min的贮藏效果最佳,贮藏寿命比对照的延长了4.5d;瓶插处理以处理组合2g/L蔗糖+200mg/L8-HQ+2mg/L6-BA的保鲜效果最好,瓶插寿命较对照的延长了5d。说明鹤蕉品种间的贮藏和瓶插寿命存在一定的差异。

关键词: 鹤蕉 切花 贮藏 预处理 瓶插液

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重组人胰岛素在毕赤氏酵母中的分泌表达

药物生物技术 2009 CSCD

摘要:利用套叠PCR技术合成重组人胰岛素基因,并在A链和B链之间加入Kex2酶切位点。将合成的重组人胰岛素基因以正确的阅读框插入到组成型分泌表达载体pGAPZα-A的α-factor信号肽序列的下游,构建成pGAPZα-A/Insulin重组分泌表达载体。表达载体用BlnI线性化处理后电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,构建成分泌型表达Insulin的工程菌。SDS-PAGE和Native-PAGE的分析表明:蛋白在分泌表达过程中,加入Insu-lin的A链(2.4k)和B链(3.4k)之间的Kex2酶切位点发挥了作用,Kex2蛋白酶将A链和B链切开,在α-factor信号肽的作用下通过分泌途径将A链和B链分泌到胞外,同时A链和B链又以二硫键形成了高级结构。Western Blot结果表明:重组蛋白能够与鼠抗人Insulin抗体发生特异性反应,具有与天然Insulin相同的免疫原性。

关键词: 重组人胰岛素 毕赤酵母 分泌表达

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寄主植物对水椰八角铁甲生长发育和繁殖力的影响

植物保护 2009 北大核心 CSCD

摘要:研究了3种棕榈科植物对水椰八角铁甲生长发育的影响,结果表明:水椰八角铁甲取食不同棕榈科植物,其成虫寿命、存活率及产卵量差异显著,取食金山葵[Syagrus romanzoffiana(Cham.)Glassman]的成虫寿命长,产卵量大,存活率高。3种植物上的蛹历期均在6 d左右,完成1代所需时间在金山葵上约需(40.18±1.10)d,大丝葵(Washingtonia robusta H.Wendl.)和海枣(Phoenix dactylifera L.)上分别为(43.48±1.00)d和(45.02±0.89)d。单头雌虫产卵量以金山葵上最高,为(104.55±6.20)粒,大丝葵和海枣上较低,分别为(44.13±2.77)粒和(34.89±4.14)粒。幼虫取食不同寄主发育为成虫,雌雄比以大丝葵上最高,为2.33∶1,金山葵和海枣上较低,分别为1.33∶11和1.43∶11。在金山葵、大丝葵和海枣上的实验种群趋势指数分别为47.14、5.64和6.43。

关键词: 水椰八角铁甲 寄主植物 生长发育 繁殖力 生命表

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木薯皮堆肥过程中酶活性的变化

生态环境学报 2009 北大核心 CSCD

摘要:以木薯皮为原料进行高温堆肥发酵,研究了堆肥化过程中理化性质和酶活性的变化情况。结果表明:在堆肥发酵过程中,温度变化呈先上升后下降趋势,到后期已趋近于初始温度;而含水率在堆肥处理过程中变化不大。各处理的pH值在发酵结束时为7.3~7.5。过氧化氢酶活性初期较高,随后迅速降低,并维持在较低水平。纤维素酶和脲酶活性在堆肥初期增加,之后逐渐降低。由于堆肥原料不同,不同处理的酶活性变化趋势表现出一定的差异。考虑到堆肥腐熟度受多方面因素的影响,判断堆肥腐熟度时应根据多种指标(包括生物学、化学、物理学指标)综合判断。

关键词: 堆肥 木薯皮 酶活性 理化性质

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海洋沉积物中反硝化细菌的分离鉴定及反硝化性能研究

环境科学研究 2009 北大核心 CSCD

摘要:利用良好的通气条件对反硝化细菌进行富集筛选,同时利用二苯胺试剂和Griess试剂显色反应分别检测NO3--N的降解和NO2--N的产生情况,并结合产气量筛选出具有良好耐氧性且反硝化性能优异的菌株.最终从南海海域沉积物中筛选得到具有较强反硝化能力的细菌,并对目的菌株进行分子鉴定及反硝化能力测试.结果表明,目的菌株F-8-1能较好地降解培养基中的NO3--N和NO2--N,产气快.气相色谱检测发现,气体样品中的φ(N2)非常高,接近100%,且未检测出其他氮氧化物气体.16SrDNA序列分析表明,菌株F-8-1与假单胞菌属具有99%的序列相似性和很高的同源性.菌株F-8-1在有氧及高盐环境中生长良好.

关键词: 反硝化细菌 硝酸盐氮 反硝化作用 16S rDNA序列 系统发育分析

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