科研产出
萝卜抗根肿病连锁标记的开发
《分子植物育种 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：根肿病现已成为中国十字花科作物的主要病害之一,萝卜等十字花科蔬菜因根肿病的侵害可大量减产甚至绝收.分子标记被广泛应用于标记辅助选择育种领域,本研究在前期定位的5个抗根肿病区间内挖掘抗病基因,并开发分子标记.与参考基因组比对后,进行基因KEGG和KOG_class注释分析,挖掘到注释为抗病(Disease resistance)和具有抗病基因结构域的基因,共计38个,在抗病基因所在的位置开发分子标记,共获得20对SSR标记.多态性鉴定筛选出5对SSR标记,利用F2分离群体的基因型和F2∶3的表型,最终确定SSR标记fold92946_4806与根肿病的抗性关联.重建图谱第九条染色体,对比之前的QTL定位结果,fold92946_4806标记在定位区间RsCr2内,研究认为该标记为QTL位点关联的抗病标记.
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circ-13267通过let-7-19/ERBB4通路调控蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡
《中国农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[背景]蛋鸭卵泡发育是决定其产蛋性能的关键因素.已有研究表明,禽类卵泡发育是极为复杂的生物学过程,目前人们已对家禽的卵泡发育模式有了一定的了解,但作为决定产蛋量的重要因素,卵泡发育的具体调控机理仍需进一步深入研究.颗粒细胞是卵泡中主要的功能细胞,可调控卵泡膜细胞和卵母细胞的生长、分化和成熟,同时也精确的调控卵泡的生长发育,维持卵巢的正常功能(诱导排卵、维持成熟分裂的阻断、为卵母细胞提供底物等).circRNA是一类新型的内源性非编码RNA,在卵泡发育中发挥重要的调控作用.[目的]通过构建circRNA过表达载体上调circ-13267的表达,研究circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞中的作用及其调控机制,为蛋鸭卵泡发育的调控机制解析提供依据.[方法]首先,利用Q-PCR检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质与细胞核中circ-13267的表达水平;构建circ-13267的过表达载体circ-13267-pLCDH,在蛋鸭颗粒细胞中过表达 circ-13267后,利用 Q-PCR 法检测 circ-13267、let-7-19、ERBB4、FAS和BCL2的表达水平;分别转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR于蛋鸭卵泡颗粒细胞,24 h后利用EdU法检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的增殖能力;将circ-13267的线性序列或ERBB4的3'UTR克隆到pmirGLo载体中,同时对上述野生型序列中的let-7-19结合位点进行突变,得到表达突变型序列的载体,利用双荧光素酶报告基因验证circ-13267与let-7-19及let-7-19与靶基因ERBB4的结合关系;在蛋鸭卵泡颗粒细胞中转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR,利用流式细胞术和Annexin V-FITC检测蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡情况.[结果]环状RNA circ-13267在细胞质和细胞核中均有表达;双荧光素酶报告基因试验结果显示,let-7-19能与ERBB4结合,进而下调荧光素酶的活性,当ERBB4序列中let-7-19的结合位点突变后,let-7-19则无法抑制荧光素酶的表达,说明ERBB4是let-7-19的一个靶基因;荧光定量检测结果显示,过表达环状RNAcirc-13267后BCL2基因的表达显著降低(P<0.05),而FAS和ERBB4基因的表达量显著升高(P<0.05),当过表达let-7-19后,ERBB4基因的表达量显著升高(P<0.05),而抑制let-7-19后ERBB4基因的表达量显著降低(P<0.05);EdU试验结果显示,过表达circ-13267后蛋鸭卵泡颗粒细胞数量显著减少,说明其促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡;然而,在蛋鸭卵泡颗粒细胞中共转染circ-13267和let-7-19后,与对照组相比共转染组中BCL2和FAS的表达量均无显著变化(P>0.05),而与过表达circ-13267组相比,共转组中BCL2基因的表达量极显著降低(P<0.01)、FAS的表达量极显著升高(P<0.01),说明circ-13267促进蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡的作用被抑制;利用流式细胞仪检测转染后的蛋鸭卵泡颗粒细胞发现,与共转染circ-13267和let-7-19组相比,仅过表达circ-13267后,晚期凋亡细胞数和总凋亡细胞数均显著增加(P<0.05),而活细胞数显著降低(P<0.05).[结论]蛋鸭circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质和细胞核中均有表达,circ-13267可以吸附let-7-19并靶向ERBB4基因,从而促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡,为解析蛋鸭卵泡发育的调控机制提供理论依据.
关键词： circRNA miRNA 蛋鸭 卵泡发育 颗粒细胞
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稗18-WJJ-Ec种群对五氟磺草胺的靶标抗性机制
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：为明确稗(Echinochloa crus-galli)18-WJJ-Ec种群对五氟磺草胺的靶标抗性机制,采用整株生物测定法,以敏感稗18-NJ作为对照,明确稗18-WJJ-Ec种群的抗性指数(RI),通过分子生物学方法测定分析了稗乙酰乳酸合成酶(ALS)基因序列及表达量,并测定稗ALS离体活性.结果表明,五氟磺草胺对稗18-WJJ-Ec种群的鲜质量抑制中浓度(ED50)为20.54 g a.i./hm2,是敏感稗18-NJ种群RI的42.79倍;稗18-WJJ-Ec的ALS氨基酸基因序列574位色氨酸(Trp)突变成了亮氨酸(Leu);ALS离体活性显著高于敏感稗18-NJ;五氟磺草胺处理1 d后,稗18-WJJ-Ec种群ALS基因表达量极显著高于敏感稗18-NJ种群,ALS基因表达量是对照的8.72倍,总体结果表明稗18-WJJ-Ec种群对五氟磺草胺存在靶标抗性机制.
关键词： 稗 五氟磺草胺 乙酰乳酸合成酶 抗性水平 靶标抗性机制
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青霉属真菌Penicillium sp.1502次级代谢产物鉴定及其生物活性研究
《湖北农业科学 》 2022 北大核心
摘要：研究青霉属真菌Penicillium sp.1502产生的次级代谢产物及其生物活性。采用正相硅胶柱、制备高效液相色谱，从该菌株发酵液的乙酸乙酯提取物中共分离得到6个化合物，通过LC-MS以及NMR鉴定为methyl asterric acid（1）、methyl 3,5-dichloroasterric acid（2）、sulochrin（3）、monochlorsulochrin（4）、dihydrogendin（5）和penipurdin A（6）。进一步测定了化合物1至化合物6对细菌、真菌及豆蚜（Aphis craccivora）的生物活性。结果表明，化合物3至化合物5对猪链球菌（Streptococcus suis）有微弱的抑菌活性，MIC均为200μg/mL；而化合物1至化合物6对所测试的6种植物病原真菌和豆蚜无明显生物活性。
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育秧期钵盘施用全量控释肥显著降低稻田氮素损失风险
《植物营养与肥料学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究将全量控释氮肥由常规育秧大田施肥改为育秧钵盘中施用后,水稻产量及田面水氮素含量动态变化,为提高氮肥利用率、控制稻田的氮素流失提供理论依据.[方法]田间试验在湖北省安陆市车站村进行,供试水稻品种为'华夏香丝'.试验设常规育秧+大田不施肥(CK)、常规育秧+大田常规施肥(FF)、钵盘育秧全量施肥(PF)?3个处理,育秧28天后,调查水稻秧苗生长、地上和地下部分的氮磷钾含量.在基肥期、蘖肥期和穗肥期取样,测定田面水中全氮、铵态氮、硝态氮含量,收获期测产.[结果]与FF处理相比,PF处理的秧苗地下部生物量,地上部氮、磷、钾含量和地下部磷含量分别提高了77%、14.69%、17.47%、3.28%和41.65%,水稻千粒重和产量分别提高了6.82%和10.78%?(P<0.05).在水稻整个生育期内,PF处理的田面水中全氮、铵态氮、硝态氮浓度与CK相近,但显著低于FF处理.[结论]在相同施肥水平下,与常规育秧大田施肥相比,在育秧期将控释化肥全部施于水稻育秧钵盘,可显著提高秧苗地下部的生长和养分含量,提高水稻千粒重和产量,同时显著降低水稻整个生育期田面水中全氮和铵态氮浓度,有效控制稻田氮素损失风险.
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硒都黑猪新品种选育进展报告
《中国畜牧杂志 》 2022 北大核心
摘要：为更好地保护和开发利用湖北省优良地方猪种,满足优质种猪需求及多元化优质猪肉消费市场需求,本研究以地方品种恩施黑猪为基础,引入梅山猪和培育品种湖北白猪血缘,开展了硒都黑猪新品种培育.通过杂交亲本选择、杂交育种、基础群组建及6个世代的持续选育,新品种初产母猪总产仔数11.29±2.16头/窝、产活仔数10.74±2.06头/窝,经产母猪总产仔数12.67±2.43头/窝、产活仔数11.71±2.27头/窝;达90 kg体重日龄178.3±14.16 d,育肥期日增重646.77±47.16 g、饲料转化率2.84±0.22;体重达100 kg左右时屠宰,屠宰率70.63±2.14%,瘦肉率52.96±2.45%,肌内脂肪含量3.42±0.34%.硒都黑猪新品种的培育完全利用国内自有资源,充分发挥了亲本优势,繁殖性能好、生长速度适中、肉质优良,且耐粗饲、适应性良好,其育成将给我国地方猪的开发与利用、发展优质猪生产提供新的思路.
关键词： 硒都黑猪新品种 选育 繁殖性能 肥育性能 胴体性能 肉质性能
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利用单碱基编辑器定点突变猪肌肉生长抑制素基因的研究
《中国畜牧兽医 》 2022 北大核心
摘要：[目的]利用单碱基编辑器在宁乡花猪肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因第2外显子处引入终止密码子,以获得MSTNV基因表达沉默的肾成纤维细胞系,为后期培育MSTN碱基编辑猪奠定基础.[方法]首先在MSTN基因的第2外显子处设计1条单向导RNA(single guide RNA,sgRNA),将其连接至pMLM3636-puro质粒,形成重组表达载体pMLM3636-puro-MSTN,与含有红色荧光碱基编辑器YE1-BE3-FNLS共转入宁乡花猪肾成纤维细胞中,在红色荧光和嘌呤霉素双筛选条件下,挑取单克隆细胞,测序验证后,分析阳性单克隆细胞的蛋白表达情况.[结果]在MSTN基因第2外显子处发生了碱基定点突变,目标位点的氨基酸序列由色氨酸(TGG)转变成终止密码子(TAA),且G→A突变率为5.5%.Western blotting检测结果表明,试验组10号单克隆细胞的MSTN蛋白表达量与野生型相比降低了 60%.[结论]本研究运用单碱基编辑技术在宁乡花猪MSTN基因编码区引入终止密码子,使翻译提前终止,导致蛋白表达量显著降低,为后期MSTN基因碱基编辑猪的生产奠定基础.
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中国农业环境全要素生产率动态演进及收敛性分析
《中国农业资源与区划 》 2022 北大核心 CSCD CSSCI
摘要：[目的]厘清农业环境全要素生产率现状是探索农业绿色发展路径的逻辑起点.文章对农业环境TFP测算体系做了进一步的解构与改进,并分析其动态演进及收敛性.[方法]利用基于SBM-DEA模型的GML指数,测度了1995—2018年中国30个省(市、区,不含港澳台、西藏)的农业环境TFP,在此基础上运用经济增长收敛理论探讨其收敛性.[结果]中国农业环境TFP与农业生产总值变动态势基本吻合,两者的增长速率均在2010年达到峰值,此后农业环境TFP增长速率超过农业生产总值,成为推动农业高质量发展的重要力量;中国农业环境TFP的年均增长率为3.13%,增长率自东部、西部、中部、东北部依次递减;全国及四大区域的技术效率均呈现出不同程度的衰退迹象,其中东北部最为明显;全国及四大区域均存在β条件收敛,但不存在显著的σ收敛,除东北地区外,全国及其他区域均存在β绝对收敛.[结论]中国农业环境TFP仍存在较大的改善空间;应加强各地之间的农业经济联动,充分发挥农业技术的空间溢出效应,促进各地农业环境TFP逐步收敛;特别对于东北部,技术效率衰退较为严重且内部出现明显的两级分化现象,不利于粮食生产安全.
关键词： 环境全要素生产率;评价体系;农业绿色发展;动态演进;收敛性
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甘薯茎叶生物活性成分及其保健功效研究进展
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：中国是甘薯生产大国，栽培面积和产量均居世界首位。甘薯茎叶常被视为甘薯的附加产品用作动物饲料或直接丢弃。近年来，研究发现甘薯茎叶富含多糖、类胡萝卜素、绿原酸、黄酮和花青素等多种生物活性成分，具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂和抑菌抗炎等作用。本文综述了甘薯茎叶的主要生物活性成分、保健功效及其体内外活性之间的联系，旨在为深入研究甘薯茎叶生物活性成分、提高甘薯茎叶资源的市场利用价值提供参考。
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