科研产出
响应曲面法优选灵芝子实体多糖提取工艺(英文)
《食品科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:本研究采用响应曲面法对影响GLP提取率的三个主要影响因素即提取温度、提取时间和液固比进行了优化。利用Design Expert软件对GLP提取率的二次多项数学模型分析表明:在提取温度为89.35℃,提取时间1.47h,液固比29.19:1时,GLP提取率较高,最佳提取率预测值为0.776%,与实测值基本相符。利用优化工艺参数提取GLP时,可获得最大的提取率。


鹅催乳素受体基因cDNA 2种新5′-UTR特征分析
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:应用5′-RACE技术,在成年雄鹅睾丸中克隆到长度分别为361 bp、499 bp和594 bp 3种催乳素受体基因(gPRLR)cDNA5′-端片段,表明雄鹅睾丸至少表达3种gPRLRmRNA。3种5′-端序列含有长度分别为210 bp、348 bp及443 bp的不同5′-UTR。3种5′-端序列后195个核苷酸一致,与鸡催乳素受体基因(cPRLR)cDNA第3和第4a外显子高度同源。3种5′-端序列起始密码子ATG均位于第3外显子45~47 bp处,与cPRLRcDNA起始密码子同一位置。348 bp与443 bp 5′-UTR结构相似。348 bp 5′-UTR中,第3外显子上游依次是235 bp和69 bp,其中69 bp与cPRLRcDNA第2外显子高度同源。443 bp 5′-UTR比348 bp 5′-UTR多插在235 bp和69 bp之间的95 bp。这些结果表明,含348 bp和443 bp 5′-UTR的mRNA来源于同一初级转录本转录后的选择性剪接。与348 bp和443 bp 5′-UTR不同的是210 bp 5′-UTR在第3外显子的上游含有一个不同的166 bp序列。这表明含210 bp 5′-UTR的mRNA来源于另一初级转录本348 bp 5′-UTR或443 bp 5′-UTR mRNA。


拟除虫菊酯类农药多残留直接竞争ELISA建立及初步应用
《分析测试学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:以辣根过氧化物酶对兔抗拟除虫菊酯类农药抗体进行标记,通过优化分析条件和样品前处理方法,建立了可同时检测蔬菜中多种拟除虫菊酯类农药的直接竞争抑制ELISA方法(DC-ELISA),并在实际检测中进行了初步应用。该方法可用于同时检测蔬菜中甲氰菊酯、氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯4种农药的残留,检出限(I10)分别为0.25、0.30、0.43、0.81 mg.L-1,青菜样品添加含量为0.5~5.0 mg.kg-1,回收率分别为93%~114%,97%~110%,89%~126%,93%~113%。采用该方法对南京市场抽取的107个样品进行检测,并与气相色谱法进行比较,直接竞争ELISA阳性检出率为8.46%,气相色谱法阳性检出率为3.74%。
关键词: 拟除虫菊酯 农药残留 直接ELISA 甲氰菊酯 氯氰菊酯 三氟氯氰菊酯 溴氰菊酯


双拷贝抑制素基因疫苗pcISI的构建和表达及免疫
《畜牧兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:为构建高免疫原性的卵泡抑制素(Inhibin,INH)DNA疫苗,将INH基因片段α1-32插入到pcIS中乙肝表面抗原(HBsAg)S基因第112~113氨基酸残基密码子之间,构建含2拷贝INH的融合表达质粒pcISI。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pcISI构建成功。脂质体包裹法将pcISI转染HeLa细胞,ELISA检测表达产物的INH免疫反应原性。结果表明,融合目的基因在HeLa细胞获得表达,ISI融合蛋白具有比IS融合蛋白更强的INH抗原抗体反应性。将pcISI免疫6只大鼠后,5/6的大鼠产生了抗INH抗体,抗体P/N值在免疫后第2~6周高于pcIS免疫组。这些结果表明,所构建的质粒pcISI可以表达抑制素,表达产物具有较强的免疫原性。


水稻抗条纹叶枯病鉴定方法的研究
《植物保护 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:鉴于国内至今尚无水稻条纹叶枯病品种抗性鉴定标准的现状,本文分别研究了接种时间、接种强度与水稻接种苗龄3因素对抗性鉴定的影响。结果表明水稻条纹叶枯病的适合抗性鉴定方法应为:接种时间48~72h,接种强度2~6头/株和水稻接种龄期0.5~1.5叶龄。以本研究结果为基础制定了水稻条纹叶枯病品种抗性鉴定的江苏省地方标准。


猪CACNA1S基因部分序列的克隆、测序及SNP检测
《中国科学(C辑:生命科学) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:CACNA1S是钙离子通道主效亚基α1亚单位的编码基因,该基因突变会导致人(Homo sapiens)低钾性周期性麻痹和恶性高温综合征.目前CACNA1S基因的研究主要集中在人和模式动物上,而在家畜中的研究少见报道.本研究以金华猪(115头)、皮特兰猪(30头)、金华猪与皮特兰猪杂交产生的金皮F2代杂种猪(126头)、大约克猪(23头)为研究对象,根据人CACNA1S基因序列设计引物,对猪基因组DNA进行PCR扩增、克隆测序,并与人相应序列作同源性比较,然后采用PCR-SSCP技术检测序列中可能存在的单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,并对有合适内切酶存在的突变点应用PCR-RFLP技术进行验证.结果表明:(ⅰ)用6对引物对猪基因组DNA进行扩增,共克隆得到猪CACNA1S基因约5211bp的DNA序列,其中外显子区域,猪与人同源性为82.6%,序列已递交GeneBank收录(登录号DQ767693);(ⅱ)在克隆得到的DNA序列中,共检测到57个单核苷酸突变点,其中外显子区域存在24个;(ⅲ)突变位点的PCR-RFLP验证与PCR-SSCP检测结果一致,经与GenBank公布的猪CACNA1S基因EST小片段(Bx914582,Bx666997)比较,相应长度核酸序列内本实验检测到的11个SNP位点中,有8个位点的碱基突变与2个EST片段间存在的碱基差异相同.
关键词: 猪(Sus Scrofa) CACNA1S 单核苷酸多态(SNP) PCR-SSCP PCR-RFLP

