科研产出
不同果锈程度的阳光玫瑰葡萄果皮的代谢组学分析
《果树学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探明阳光玫瑰葡萄果锈形成的机制，为其有效防治提供科学的指导建议。【方法】以6年生阳光玫瑰葡萄植株为试材，在果实进入软化期后，采集有果锈和无果锈的果粒样品，按照果锈发生程度分成无果锈、轻度果锈和重度果锈3个等级，研究不同果锈等级的果皮相关物质含量、酶活性及代谢组的变化。【结果】随着果锈程度的增加，阳光玫瑰葡萄果皮的叶绿素、纤维素、半纤维素和总果胶含量逐渐降低，木质素、总黄酮和总酚含量逐渐升高；果皮中过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶、肉桂醇脱氢酶和4-香豆酸：辅酶A连接酶的活性逐渐升高，过氧化氢酶活性先升高后降低，肉桂酸-4-羟基化酶活性先降低后升高。不同果锈程度的果皮中共鉴定到1372种代谢物，差异代谢物有485种，3组果锈等级的果皮之间共有的差异代谢物有110种，其中，有105种差异代谢物在3组中均上调表达，占所有差异代谢物的95.45%，包括37种酚酸类、31种黄酮、17种芪类和5种醌类等；2种差异代谢物在3组中均下调表达，包括1种脂质和1种核苷酸及其衍生物。上述差异代谢物质主要分布在17条代谢途径中，包括山柰酚苷元Ⅱ的生物合成、山柰酚苷元Ⅰ的生物合成和次生代谢物的生物合成等。【结论】酚酸类和黄酮类物质对阳光玫瑰葡萄果锈的发生影响最大，且山柰酚苷元Ⅱ的生物合成途径可能在果锈的形成中发挥重要作用。
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农业科研单位科研项目申报管理机制优化策略研究
《种业导刊 》 2024
摘要：农业科研项目申报管理机制对农业科研发展至关重要，随着农业科技需求的不断增长和科研环境的变化，优化农业科研单位的项目申报管理机制成为必然要求。深入剖析了当前农业科研单位在项目申报管理机制方面存在的问题，如申报管理流程不规范、经费管理水平不足、信息化管理水平有限、跨学科和跨单位合作不够及激励机制不健全等。通过对相关问题的分析，提出针对性的优化策略，包括简化申报流程以提高效率，建立高效的信息共享平台以加强信息流通，建立跨学科、跨单位的合作平台提高创新水平等。优化后的管理机制有望提高农业科研单位项目申报的质量和成功率，促进农业科研成果产出，进而推动农业科技的发展。
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马立克病病毒meq基因缺失毒株HN302Δmeq的构建及致病性分析
《畜牧与兽医 》 2024 北大核心
摘要：马立克病(MD)是由马立克病病毒(MDV)感染引起的一种重要的家禽免疫抑制病与肿瘤病，严重危害世界养禽业。随着MDV持续进化及毒力增强，急需研发新型高效的MD疫苗以加强该病的有效防控。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，以MDV变异株HN302为亲本毒株，成功构建了meq基因缺失的毒株HN302Δmeq,经过PCR扩增鉴定及测序分析，证实meq基因缺失且传代稳定。间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析均证实HN302Δmeq感染鸡胚成纤维细胞(CEF)中无meq基因表达，并且meq基因的缺失不影响其他病毒基因的表达。利用RT-qPCR分析HN302Δmeq在CEF中的体外增殖曲线，结果显示meq基因的缺失不影响MDV体外复制。1日龄SPF鸡攻毒试验结果显示，与亲本毒株HN302相比，HN302Δmeq对宿主无致病性，其诱导的MD发病率、死亡率和肿瘤发生率均为0,且未观察到明显的免疫器官萎缩。上述数据表明，HN302Δmeq的毒力明显丧失，具备继续作为疫苗候选株开展相关研究的可能性。本研究成功构建了MDV变异株HN302的meq基因缺失毒株，为后续MDV的致病机制及新型疫苗研究奠定了基础。
关键词： 鸡 马立克病病毒 meq基因 CRISPR/Cas9 基因编辑 致病性
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辅料添加对芝麻粕发酵及镉钝化能力的影响
《河南农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探究添加不同辅料发酵的芝麻粕在镉污染土壤修复中的应用价值.[方法]设置添加不同辅料的芝麻粕发酵处理,包括 T1(5 kg芝麻粕+1 kg麸皮)、T2(5 kg芝麻粕+1 kg玉米秸秆)和 T3(5 kg芝麻粕+1 kg刨花),并以不加辅料的芝麻粕发酵为对照,即CK(6 kg芝麻粕),发酵 30 d.通过对芝麻粕发酵过程中的理化参数测定及傅里叶红外光谱分析,考察添加不同辅料对芝麻粕发酵的影响.将不同辅料发酵的芝麻粕施加到镉污染土壤中,通过土壤中有效镉含量及赋存形态的检测,分析其对土壤中镉的钝化作用.[结果]添加辅料发酵的T1、T2、T3 的 pH值、总磷、有机质、碳氮比(C/N)均显著高于 CK.傅里叶红外光谱分析发现,添加玉米秸秆的T2 的发酵程度较高.镉污染土壤修复试验结果表明,在镉含量为 5 mg·kg-1 的土壤中,施加 T2 使有效镉含量降低了 81.60%,显著高于其他处理和对照;在镉含量为 1、5、10 mg·kg-1 的土壤中,T2 显著提高了氧化态和残渣态的镉含量,最高可达 54.00%.[结论]在芝麻粕发酵过程中添加麸皮、玉米秸秆和刨花 3 种辅料能够促进芝麻粕的发酵过程.添加玉米秸秆发酵的芝麻粕对于镉含量为 5 mg·kg-1 的土壤中的镉具有显著的钝化效果.
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不同生长阶段香菇栽培料木质纤维素降解利用研究
《中国瓜菜 》 2024
摘要：为深入了解香菇生长发育过程中栽培料木质纤维素的变化，对不同生长阶段香菇栽培料中木质纤维素含量及其相关降解酶活性进行了测定，利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、X-射线衍射法(XRD)和显微镜观察研究了木质纤维素微观结构分子基团、纤维素相对结晶度(CrI)和纤维表面形态的变化。结果表明，在香菇生长发育过程中，栽培料中的纤维素、半纤维素和木质素含量显著下降，木质纤维素含量(w，后同)由85.27%降低至52.23%，其与相应的降解酶系活性负相关，木质纤维素降解与纤维破坏程度呈现一定的相关性。FTIR结果显示，不同生长阶段香菇栽培料中木质纤维素特征官能团峰值发生变化，木质素降解速率高于半纤维素、低于纤维素。随着香菇的生长发育，栽培料中CrI显著降低，纤维素晶体结构受到了一定程度的破坏。结果表明，香菇首先利用栽培料中非木质纤维素组分供菌丝生长，同时分泌胞外降解酶破坏纤维结构，将大分子组分降解为小分子组分，从而满足其生长所需，高木质纤维素降解酶活性对应高木质纤维素降解率。该研究结果可为促进香菇栽培料中木质纤维素的降解利用提供依据。
关键词： 香菇 木质纤维素 胞外酶 结晶度 红外光谱 纤维形态
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禽腺病毒血清4型Fiber2 Head蛋白表达及其单克隆抗体筛选
《中国动物传染病学报 》 2024
摘要：为制备抗禽腺病毒血清4型(FAdV4)Fiber2 Head蛋白的特异性单克隆抗体(mAb)，本研究将纤突蛋白(Fiber2)截短，并利用大肠杆菌系统进行原核表达。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠，细胞融合后通过间接ELISA及免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选单克隆抗体，并对单克隆抗体进行反应性测定、效价测定以及亚型鉴定。结果显示：Fiber2 Head蛋白在大肠杆菌中成功表达，且具有良好的生物活性，成功获得8株单克隆细胞株分别命名为5A5、1D5、7C9、4E5、3A11、5E11、9D7、6E3，均可分泌特异性识别Fiber2 Head蛋白及FAdV4的单克隆抗体。综上，本研究成功制备了能与Fiber2 Head蛋白和FAdV4病毒特异性反应的单克隆抗体，为FAdV4抗原和抗体检测试剂的研发奠定了基础。
关键词： 禽腺病毒4型 Fiber2蛋白 单克隆抗体 免疫检测
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基于表型性状和SCoT分子标记的白术种质遗传多样性分析
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：为了评价笔者所在课题组自选126个白术种质的遗传多样性，利用表型性状和SCoT标记相结合的方法对126个白术种质资源进行遗传多样性分析。结果表明，5个表型性状变异系数范围为17.23%～24.51%,其中变异系数最大的性状为叶宽，变异系数最小的是叶长；5个性状的多样性指数范围为1.71～2.53,叶长的多样性指数最高；冠幅与株高呈极显著负相关，而与叶长和茎粗呈极显著正相关。在欧氏距离为7.2处将126个白术单株聚为6类，其中第Ⅰ类表现出高株短窄叶型，第Ⅱ类表现出矮株短窄叶型，第Ⅲ类表现出高株长阔叶型。15条SCoT引物在126个白术种质间共检测出84个等位基因，平均每个引物可检测5.60个，变化范围为2～8个；PIC值变化范围为0.63～0.86,平均为0.78。有效等位基因数范围为1.31～2.01,平均值为1.31;Nei's多样性指数值为0.20～0.50,平均值为0.35,Shannon’s多样性指数为0.36～0.81,平均值为0.57。Structure群体结构分析表明，当K=6时，ΔK最高，126个白术种质中有87个材料的Q≥0.6,占所有供试材料的69.05%,说明各群体中大部分种质亲缘关系相对单一。本研究明确了126个白术种质的表型特征和亲缘关系，为指导亲本选配和高效育种提供重要依据。
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烤烟新品种豫浓香201中部叶的烘烤特性及烘烤工艺
《浙江农业科学 》 2024
摘要：烤烟新品种豫浓香201是中烟100的突变体，为探索豫浓香201中部叶适宜的烘烤工艺，从烘烤特性入手，以中烟100为对照，设置暗箱试验和电烤箱试验，研究了豫浓香201中部烟变黄变褐特性、失水特性、叶绿素降解特性、多酚氧化酶活性变化、淀粉酶活性的变化，并根据其烘烤特性调整烘烤工艺。豫浓香201完全变黄时间为48 h,暗箱处理168 h后变褐程度仍不到30%,变黄、变褐特性较好；失水均衡性为1.10,失水均衡性较好；叶绿素降解速率在72 h为1.30%·h-1,降解量为93.68%,降解特性较好；多酚氧化酶活性平均值为0.29 U,耐烤性较好；豫浓香201淀粉酶活性高于中烟100。豫浓香210烤后烟叶基本性状、外观质量、感官质量均优于中烟100。综合认为豫浓香201中部烟易烤性较好，耐烤性较好。与中烟100相比较，变黄时间减少6 h左右，定色时间减少4 h左右。
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基于量子点的非洲猪瘟病毒抗体荧光免疫层析试纸研制
《畜牧与兽医 》 2024 北大核心
摘要：为了研发灵敏、准确的非洲猪瘟快速诊断试纸产品,本研究基于免疫层析技术原理,以非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白三聚体为检测抗原,量子点(QDs)为标记材料,金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)为检测线,p72单克隆抗体为质控线,建立了非洲猪瘟病毒抗体荧光免疫层析试纸,并对试纸的检测性能进行鉴定.结果:荧光免疫层析试纸检测ASFV标准阳性血清的效价为1:102 400,与猪瘟病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸道综合征病毒及猪圆环病毒2型阳性血清抗体无交叉反应,在临床样本检测中与商业化ASFV抗体检测试剂盒的符合率为92.92%.综上,该试纸具有良好的灵敏度、特异性、准确性及稳定性,可用于临床样品中ASFV抗体的快速筛查.
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暹罗芽孢杆菌对多重耐药细菌的抑菌活性及其抗菌次级代谢产物分析
《中国兽医杂志 》 2024 北大核心
摘要：为筛选对多重耐药细菌具有较好抑菌活性的药用植物内生菌，本试验采用平板对峙法和抑菌圈法分离筛选金银花内生菌，通过形态观察、16S rRNA基因PCR扩增和测序对其鉴定，并通过全基因组学分析其抗菌活性物质。结果显示，从金银花根、茎、叶和花中分离、鉴定和筛选出1株抗菌效果较好的革兰阳性内生菌(命名为HNYJ2204B),经鉴定为暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)。该菌能有效抑制多重耐药大肠杆菌(E.coli)、胸膜肺炎放线杆菌(APP)、副猪嗜血杆菌(HPS)和巴氏杆菌(PM)。全基因组测序分析结果显示，HNYJ2204B的基因组大小为3 929 792 bp, G+C含量为46.5%,预测其编码基因个数为3 747个。分别有3 744、3 527、3 348、3 074、2 870和2 364个基因被NR、Swiss-Prot、Pfam、COG、GO和KEGG数据库注释，通过antiSMASH软件预测到与次级代谢产物合成相关的8个基因簇；主要次级代谢产物有大环内酯类化合物大环内酰亚胺H、多烯类化合物杆菌烯、脂肽类丰霉素、抗真菌化合物的二肽化合物芽孢菌溶素和多肽类细菌素儿茶酚型杆菌巴汀/嗜铁素类和聚酮类艰难菌素等。从暹罗芽孢杆菌HNYJ2204B的基因组中含有的次级代谢产物可以预测出，该菌具有开发为新药和饲料添加剂的潜力。
关键词： 暹罗芽孢杆菌 金银花 内生菌 抑菌效果 抑抗菌活性物质
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