科研产出
大蒜产地不同轮作模式对微塑料丰度和形态分布的影响
《生态毒理学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：地膜的大量使用会导致土壤微塑料（microplastics, MPs）和邻苯二甲酸酯（phthalate acid esters, PAEs）的污染，但较少有研究报道不同轮作模式对土壤中MPs丰度和形态分布的影响，同时MPs与PAEs之间在农业土壤中的相关性尚不清楚。本研究采集了邳州大蒜种植区内大蒜-玉米、大蒜-大豆和大蒜-水稻3种不同轮作模式下的土壤，采用激光红外成像系统对土壤中MPs的丰度、组成以及形态特征进行分析鉴定，并采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）法分析土壤中16种PAEs含量，结合土壤MPs丰度分析二者之间的相关性。结果表明，邳州大蒜种植区土壤MPs的平均丰度为4 710.67个·kg-1,主要由聚酰胺（PA）、聚乙烯（PE）和聚氯乙烯（PVC）等类型组成，分别占比47.82%、13.94%和17.51%;MPs以碎片状为主，且超过75%的MPs粒径≤50μm。不同轮作模式下的MPs平均丰度差异明显，呈现大蒜-玉米土壤(5 788.02个·kg-1)>大蒜-水稻土壤(4 983.71个·kg-1)>大蒜-大豆土壤(3 090.93个·kg-1)的趋势。大蒜-大豆土壤MPs的平均面积及高度和宽度等形态特征与大蒜-玉米土壤和大蒜-水稻土壤的MPs均存在显著差异。此外，土壤中的PAEs种类主要为邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）和邻苯二甲酸二甲酯（DMP）。邳州大蒜种植区土壤中MPs总丰度与∑PAEs含量（R2=0.68, P=0.0005）和DEHP含量（R2=0.54, P =0.004）呈显著正相关。
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基于Mhp336蛋白的猪肺炎支原体ELISA抗体检测方法的建立
《生物工程学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本研究拟建立一种高特异性的猪肺炎支原体酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)抗体检测方法。首先，构建重组菌大肠杆菌BL21(DE3)-p ET-32a(+)-mhp336，诱导重组蛋白Mhp336表达并纯化，获得的纯化蛋白作为包被抗原；然后，确定ELISA方法的抗原包被浓度、封闭液和封闭时间、血清和二抗稀释比例和孵育时间、显色时间和判定标准；之后进行重复性试验、与猪的其他主要病原抗血清的交叉反应性和确定血清最大稀释倍数；最后，用建立的方法检测226份猪血清样品，并与商品化猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒和猪肺炎支原体ELISA恢复期血清抗体检测方法进行比较，确定检测方法的灵敏性和特异性。最终确定Mhp336纯化蛋白的最佳包被浓度为0.05μg/m L，封闭液为含2.5%脱脂奶粉的PBS，封闭时间为1 h，血清稀释比例为1:500，孵育时间为0.5 h，二抗稀释比例为1:10 000，孵育时间为1 h，显色时间为5 min。检测方法的cut off值为0.332。试剂盒的批内和批间变异系数均低于7%。猪血清样品的检测结果表明，本研究建立的检测方法的灵敏性和特异性均优于商品化猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒和猪肺炎支原体ELISA恢复期血清抗体检测方法。本研究成功建立了基于Mhp336蛋白的猪肺炎支原体ELISA抗体检测方法，灵敏性和特异性均较好，为猪场猪支原体肺炎的净化提供了检测方法。
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轮作蒜(青蒜)对大棚连作芋产量、品质及土壤微生物群落的影响
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为明确轮作蒜(青蒜)对大棚连作芋产量、品质及土壤微生物的影响，本研究通过芋连作、芋-蒜(青蒜)轮作的比较试验，分析了轮作蒜(青蒜)对大棚连作芋产量、品质及土壤细菌和真菌丰富度、多样性和属水平上群落结构的影响。结果表明，与芋连作相比，蒜(青蒜)轮作后茬芋产量、总淀粉含量和总多糖含量均有显著提高；土壤有机质含量、有效铁含量显著增加，交换性钙含量无显著差异；被孢霉菌属(Mortierella)有益真菌的相对丰度显著增加，镰刀菌属(Fusarium)、枝孢属(Cladosporium)、新丛赤壳属(Neonectria)、链格孢属(Alternaria)和曲霉属(Aspergillus)等有害真菌的相对丰度显著降低。因此，蒜(青蒜)-芋轮作不但可以提高后茬芋的产量和品质，而且可以改善土壤理化性质和微生物群落结构，有利于缓解大棚芋的连作障碍。
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大豆炭疽病病原鉴定及大豆种质资源抗病性评价
《植物病理学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：炭疽病是大豆生产上一种常见的真菌病害，不但影响大豆产量，而且严重影响籽粒活力、鲜豆荚的外观和食用品质。本研究从江苏省徐州市大豆产区采集大豆炭疽病病样，经过组织分离和纯化，从同一株大豆病株的茎秆上获得4株真菌分离物XZ-1～XZ-4。根据分离物的形态学特征以及基于ITS-TUB2多基因序列的系统发育分析结果，将分离物XZ-1和XZ-2菌株鉴定为平头炭疽菌(Colletotrichum truncatum),将XZ-3和XZ-4菌株分别鉴定为层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)和木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)。致病性测定结果表明这4种真菌均为致病菌，说明田间存在炭疽菌和镰刀菌复合侵染的现象。采用两种接种方法(离体豆荚菌丝液接种法、黄化苗下胚轴菌丝块接种法)分别对56个大豆材料的抗炭疽病性进行鉴定，结果显示：这两种接种方法的病情指数虽略有差异，但对大豆材料抗、感炭疽病的等级划分基本为同一类型，匹配率达92.9%;供试的56个大豆品种(系)中有3个表现抗病，19个表现中抗，未发现高抗和免疫品种，抗病材料占比39.3%。本研究从多种病菌复合侵染的大豆茎秆中成功分离到了具有较强毒力的大豆炭疽病菌，并通过改良豆荚接种方法和新设计的黄化苗下胚轴接种方法，快速准确地对不同大豆材料进行了抗炭疽病评价，筛选出部分大豆抗病品种(系),为抗病亲本的筛选和利用以及抗大豆炭疽病基因的发掘奠定了基础。
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不同LED光照对番茄幼苗生理特性及定植后开花结果的影响
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：以番茄品种千禧为试验材料，研究5种不同的发光二极管（LED）光照对番茄幼苗生长和生理特性以及幼苗定植后开花结果的影响。结果表明，与白光对照（CK）相比，白光∶蓝光=1∶1（WB）、白光∶红光∶蓝光=1∶1∶1（WRB）、白光∶红光=1∶1（WR）、红光∶蓝光=1∶1（RB）处理番茄幼苗株高显著降低，WRB、WR处理番茄幼苗茎粗显著降低，WB、RB处理的番茄幼苗壮苗指数显著增加；WB、WRB、RB处理番茄幼苗净光合速率、蒸腾速率、胞间CO2浓度、气孔导度显著增加；WB、WR、RB处理番茄幼苗叶片超氧化物歧化酶（SOD）与过氧化物酶（POD）活性显著增加，而过氧化氢酶（CAT）活性显著降低；WR处理的番茄幼苗叶片丙二醛（MDA）含量显著增加，而WB、WRB处理番茄幼苗叶片MDA含量显著降低。经WB、WRB、RB处理番茄育苗会使番茄苗在定植后始花期、前期产量、总产量及果实可溶性糖含量、可滴定酸含量、糖酸比显著提高。综上所述，WB、WRB、RB处理对番茄幼苗生长和壮苗培育，以及番茄植株定植后的始花期、产量和品质均有不同程度的促进作用，且以WB处理的促进效果最好。
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木霉生物有机肥对梨容器苗生长发育及根际关键微生物的影响
《植物营养与肥料学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】培育容器大苗是果树高效建园、缩短缓苗期及快速投产进入丰产期的重要途径。开展木霉生物有机肥促进容器大苗生长效应与机制研究，探讨土壤微生物群落组成与根系和地上部生长指标间的关系，为容器大苗的培育提供理论依据与技术支撑。【方法】以两年生早熟砂梨新品种‘苏翠1号’(Pyrus pyrifolia ‘Sucui1’)为试材连续开展两年试验，设置3个处理：80%原土+20%普通商品有机肥(OF，按重量计算，下同)；80%原土+15%普通商品有机肥+5%木霉生物有机肥(5%BF);80%原土+5%普通商品有机肥+15%木霉生物有机肥(15%BF)，测定梨根系、地上部生长指标，以及根际土壤微生物群落结构。【结果】与OF相比，5%BF和15%BF处理梨苗地径分别增加2.6%和8.8%，花芽数量增幅分别为40.0%和46.7%。与OF和5%BF处理相比，15%BF处理梨树总根尖数分别平均增加40.5%和37.7%，总根长分别平均增加47.3%和51.4%，且细根(直径<2 mm)占比最高。通过Zi-Pi分析(Zi>2.5且Pi<0.62)发现，微生物共现网络中核心微生物为放线菌门与子囊菌门；进一步利用随机森林模型预测关键物种，发现以放线菌门为主，包括链霉菌属(Streptomyces)与放线菌(Actinomarinicola)等具有生防作用的促生菌；线性回归分析结果表明，木霉属丰度与链霉菌属和放线菌两者之间均存在极显著正相关。【结论】施用高比例的木霉生物有机肥(15%BF)能够显著提高‘苏翠1号’梨容器大苗地径及根系发育，达到壮苗促花目的，是一条快速育成大规格苗木的有效途径。15%BF处理下除木霉自身促生作用外，还可能通过富集更多有益细菌如放线菌、链霉菌等微生物发挥协同促生效果。
关键词： 木霉 生物有机肥 梨 根际微生物 共现网络 随机森林分析
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蓝莓渣多酚对肝星状细胞的增殖与自噬作用
《中国食品学报 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：为了提高蓝莓全资源利用率，降低其加工副产物对环境的危害。通过高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）分析超高压提取、超声提取和溶剂提取技术对蓝莓渣多酚（BRP）组分及含量的影响。以活化的HSC-T6细胞为模型，通过噻唑蓝法和乳酸脱氢酶法检测BRP对HSC-T6细胞存活率和细胞毒性的影响，透射电镜和吖啶橙染色法观察BRP对HSC-T6细胞自噬的诱导作用，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测BRP对HSC-T6细胞自噬相关蛋白的表达量，酶联免疫法（ELISA）分析HSC-T6细胞的纤维化程度。结果表明：BRP中有14种组分，3种提取方法中的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷占比最高，分别为57.530%,58.703%,54.830%。3种提取方法所得BRP的组分种类相同，而含量存在较大差异。超高压提取法所得BRP含量显著高于常规溶剂法和超声辅助提取法（P<0.05）。BRP能显著抑制HSC-T6细胞增殖（P<0.05），且在一定浓度范围呈现时间-剂量效应关系；通过上调自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-II表达，下调p62蛋白表达，诱导细胞发生自噬；同时BRP显著下调HSC-T6细胞中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-β1的分泌量（P<0.05）。结论：超高压萃取的BRP组分总含量最高，生物活性功能最强，BRP可通过抑制活化的HSC-T6细胞增殖，诱导细胞自噬从而发挥其抗纤维化效果。
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双靶向融合蛋白用于新城疫病毒La Sota株对鸭的免疫效率的提高作用
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在探究双靶向融合蛋白用于新城疫病毒（NDV） La Sota毒株对鸭的免疫效率的提高作用，为提升鸭新城疫免疫防控能力做有益探索。将特异性结合囊膜病毒表面糖蛋白的红藻凝集素（GRFT）与靶向结合禽树突状细胞的纳米抗体分子（VHH）的编码基因进行串联表达，经大肠杆菌表达系统制备双靶向融合蛋白。利用组氨酸（His）标签纯化GRFT-VHH融合蛋白，采用有限稀释法定量评价融合蛋白与La Sota病毒的结合能力。用饱和结合融合蛋白的La Sota病毒制备疫苗，分组免疫无特定病原体（SPF）雏鸭，监测免疫后血凝抑制（HI）抗体效价以及IL-4、IFN-γ细胞因子水平。结果显示，构建的重组大肠杆菌能够高效表达融合蛋白，经Ni柱纯化回收的GRFT-VHH54、GRFT-VHH74蛋白质量浓度分别为230μg/mL、1 350μg/mL,仅需100 ng融合蛋白即可完全结合1×10～8半数感染量(EID50)病毒；NDV+GRFT-VHH54组免疫后21 d HI抗体效价达到7 log22以上，血清中IL-4和IFN-γ含量分别为80.0 pg/mL、8.8 pg/mL,显著高于NDV单独免疫组（P<0.05）。双靶向融合蛋白GRFT-VHH54能够提高新城疫病毒La Sota株对鸭的免疫效率，可作为免疫增强剂做进一步的开发与应用。
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基于RAPD的MCID法快速鉴定不结球白菜品种和遗传多样性分析
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：不结球白菜是长江中下游地区蔬菜周年供应的主栽品种，在种质资源保护和开发利用过程中，品种鉴定的难度随着市场上品种的增多而增加。利用基于DNA分子标记的人工绘制品种鉴别图(manual cultivar identification diagram, MCID)方法对笔者所在单位收集和保存的34份不结球白菜种质材料进行鉴定，同时进行NTSYS-pc遗传多样性分析。结果表明，利用筛选出的5对RAPD引物扩增出的多态性谱带即可构建34份不结球白菜的品种鉴定图，该图可以快速地筛选出某品种鉴定所需要的引物及需要参考的特征性谱带，具有较高的可操作性和实用性。聚类结果表明，34份不结球白菜种质材料与品种的聚类模式基本符合其农艺性状表现和遗传背景。研究结果可为不结球白菜品种鉴定和种质创新提供了科学依据，对不结球白菜种质资源的保护、研究及品种的早期鉴定具有重要意义。
关键词： 不结球白菜 RAPD 人工绘制植物品种鉴别图(MCID) 品种鉴定
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猪细小病毒1~7型全基因组遗传变异
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：猪细小病毒1型(porcine parvovirus type 1,PPV1)是母猪繁殖失败的主要病原体，即通常所称的猪细小病毒。2001—2016年，在猪体相继鉴定出了6种新型猪细小病毒，分别被命名为猪细小病毒2～7型(PPV2～PPV7型)。为确定中国江苏地区PPV1～PPV7型感染情况和遗传变异特征，采用PPV1～PPV7型常规PCR检测方法，从江苏地区猪场收集到2株PPV1、2株PPV2,以及PPV3、PPV4、PPV5、PPV6、PPV7各1株阳性组织病料，对这9株阳性组织病料进行全基因组测序，采用生物信息分析软件与GenBank中PPV1～PPV7型参考毒株进行比较，系统分析全基因组和衣壳蛋白2(VP2)的遗传进化分子特征。结果表明，PPV1～PPV7型测序毒株与GenBank中同型毒株全基因组同源性均高于97%,而不同型基因组间同源性均小于60.40%。PPV1～PPV7型测序毒株的VP2氨基酸序列与同型毒株同源性均高于97%,但不同型毒株之间差异巨大，PPV4与PPV5有55%同源性，其他毒株之间同源性更低，仅为9%～17%。毒力分析结果表明，2株PPV1流行株与PPV1强毒株Kresse存在相似的毒力位点，且存在5处特有的突变，可能为高毒力毒株。研究结果有助于更好地了解中国猪群中PPV1～PPV7型分子流行病学并制定科学的防治措施。
关键词： 猪细小病毒 PCR检测 基因组 衣壳蛋白2 遗传变异 毒力分析
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