文献类型： 中文期刊

作者： 李玲 ¹ ; 祝博森 ¹ ; 朱婷 ¹ ; 商璐 ² ; 邓碧华 ³ ; 卢宇 ³ ; 徐海 ² ;

作者机构： 1.江苏农牧科技职业学院

2.江苏省农业科学院泰州农科所

3.兽用生物制品<泰州>国泰技术创新中心

关键词： 新城疫病毒;融合蛋白;靶向;免疫效率

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2024 年 40 卷 012 期

页码： 2317-2323

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在探究双靶向融合蛋白用于新城疫病毒（NDV） La Sota毒株对鸭的免疫效率的提高作用，为提升鸭新城疫免疫防控能力做有益探索。将特异性结合囊膜病毒表面糖蛋白的红藻凝集素（GRFT）与靶向结合禽树突状细胞的纳米抗体分子（VHH）的编码基因进行串联表达，经大肠杆菌表达系统制备双靶向融合蛋白。利用组氨酸（His）标签纯化GRFT-VHH融合蛋白，采用有限稀释法定量评价融合蛋白与La Sota病毒的结合能力。用饱和结合融合蛋白的La Sota病毒制备疫苗，分组免疫无特定病原体（SPF）雏鸭，监测免疫后血凝抑制（HI）抗体效价以及IL-4、IFN-γ细胞因子水平。结果显示，构建的重组大肠杆菌能够高效表达融合蛋白，经Ni柱纯化回收的GRFT-VHH54、GRFT-VHH74蛋白质量浓度分别为230μg/mL、1 350μg/mL,仅需100 ng融合蛋白即可完全结合1×10～8半数感染量(EID₅₀)病毒；NDV+GRFT-VHH54组免疫后21 d HI抗体效价达到7 log₂2以上，血清中IL-4和IFN-γ含量分别为80.0 pg/mL、8.8 pg/mL,显著高于NDV单独免疫组（P<0.05）。双靶向融合蛋白GRFT-VHH54能够提高新城疫病毒La Sota株对鸭的免疫效率，可作为免疫增强剂做进一步的开发与应用。