科研产出
梨杂种苗童区和成年区叶片光合荧光特征及超微结构研究
《果树学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为进一步揭示梨实生树童区和成年区的生理差异,以7 a生华酥×西子绿梨杂种单株为试材,比较分析了童区和成年区叶片光合荧光特性及超微结构差异。结果表明,童年区和成年区叶片光合荧光各参数随光强增加的变化趋势基本一致,但是在同一光强下,成年区叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO2浓度(Ci)以及光饱和点(Im)、表观量子效率(AQY)、光化学猝灭系数(qP)、非光化学猝灭系数(NPQ)、PSⅡ电子传递量子产率(ФPSⅡ)、电子传递速率(ETR)等指标参数均显著高于童区叶片。其原因可能在于成年区叶片具有较高的叶绿素含量、叶绿体紧贴细胞壁、个体大、片层清晰、排列有序,而童区叶绿体个体相对较小、片层结构垛叠紧密且数量较多。
关键词： 梨 杂种苗 童区 成年区 光合作用 叶绿素荧光 超微结构
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刚地弓形虫NT株MIC3基因的克隆和原核表达
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为构建刚地弓形虫微线体蛋白3(MIC3)原核表达体系,获得高纯度MIC3蛋白用于制备单克隆抗体,评价MIC3蛋白在临床诊断方面的应用价值,根据刚地弓形虫MIC3基因编码的已知序列设计引物,应用PCR技术从刚地弓形虫NT株的基因组DNA中扩增出去除信号肽的MIC3基因,将该基因克隆入pET-32a(+)表达载体,构建pET-32a(+)表达载体,并转化入大肠杆菌(Escherichia.coli)Trans 5α感受态细胞。扩增的MIC3基因与GenBank中相应基因序列(AF509564.1)的同源性达99.9%。将阳性重组表达质粒转化入E.coli BL21-codon plus,经IPTG20℃低温诱导表达,SDS-PAGE分析结果显示,MIC3融合蛋白分子量约为56 000。Western-blotting分析鉴定结果表明,MIC3融合蛋白可被猪抗弓形虫免疫血清所识别。获得的MIC3融合蛋白具有一定的反应原性,为下一步利用重组蛋白建立弓形虫的诊断方法和研制弓形虫的亚单位疫苗奠定了基础。
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低温胁迫下甘蓝叶片细胞超微结构及叶肉细胞内Ca~(2+)的分布变化
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以结球甘蓝幼苗为试验材料,探讨低温胁迫下甘蓝幼苗超微结构及叶肉细胞内Ca2+水平的变化。结果显示:①5℃和2℃低温胁迫时甘蓝幼苗叶肉细胞质膜、液泡膜清晰,叶绿体、线粒体结构没有明显的变化,表明甘蓝幼苗对5℃、2℃低温逆境有一定的适应能力;-2℃低温处理的甘蓝幼苗叶肉细胞出现质膜内陷,大部分叶绿体双层膜结构破坏严重,基粒片层解体,线粒体膜结构受损,脊消失,表明甘蓝幼苗已受到冻害。②未经低温处理的甘蓝幼苗叶肉细胞中焦锑酸钙沉淀颗粒主要分布于液泡和细胞间隙中,细胞壁中也见少量沉淀,而细胞基质中则看不到焦锑酸钙沉淀;经-2℃24 h低温处理后,细胞间隙和液泡中的Ca2+开始释放到细胞质,细胞基质和细胞膜上焦锑酸钙沉淀增加,而液泡和细胞间隙中的焦锑酸钙沉淀减少;经-2℃48 h低温处理后液泡内和细胞间隙中的焦锑酸钙沉淀很少或消失,而细胞基质和细胞膜上则分布有较多的焦锑酸钙沉淀;经-2℃72 h低温处理后,细胞间隙内的焦锑酸钙沉淀极少,有的也紧贴在细胞外壁上,而细胞基质和细胞膜上则分布有非常多的焦锑酸钙沉淀,在核基质和液泡中也见到少量的焦锑酸钙沉淀,并且细胞发生质壁分离,超微结构遭到了显著破坏,表明Ca2+的区域性分布变化与植物抗寒性存在一定关系。
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大豆苗期耐盐性的遗传及QTL定位分析
《中国油料作物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：利用亲本为科丰1号和南农1138-2的重组自交系群体NJRIKY进行大豆苗期耐盐性的遗传及QTL定位分析。以每个家系的平均存活时间为耐盐指标,采用主基因+多基因混合遗传模型进行RIL遗传分析,结果表明,NJRIKY群体的耐盐性遗传符合F-3模型,即由3对主基因控制,没有多基因修饰,主基因遗传率是64.4%。利用Cartographer V.2.5进行QTL定位,结果显示,共检测到3个耐盐QTL,它们分别位于B1、G和K三个连锁群上,分别解释8.4%、17.9%和11.3%的表型变异。
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早孕因子多克隆抗体的制备及应用
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：通过含有家兔早孕因子的重组质粒EPF-pET-32a(+)转化表达宿主菌Escherichia coli Rosetta,IPTG诱导,融合表达硫氧还原蛋白-兔早孕因子Trx-EPF。亲和层析纯化Trx-EPF,并在柱上进行肠激酶酶切,得到EPF蛋白并进行复性。EPF免疫波尔山羊,制备羊抗兔家兔早孕因子抗血清,硫酸铵沉淀纯化多克隆抗体,用于家兔早孕检测。Western-blot结果表明,羊抗兔家兔早孕因子多克隆抗体对家兔早孕的检出率达到100%。
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沼液对植物病害的防治效果及机理研究I:对植物病原真菌的抑制效果及抑菌机理初探
《农业环境科学学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用菌丝生长抑制和分生孢子萌发抑制的试验方法,以草莓枯萎病菌为靶标病原菌,研究了江苏省内运行稳定的21个大型沼气工程的沼液及其无菌滤液对草莓枯萎病菌的生长抑制特性.结果表明,所有沼气工程的沼液对草莓枯萎病菌的菌丝生长都有不同程度的抑制作用,不同运行年限的沼气池沼液以及不同发酵原料的沼液对草莓枯萎病菌的抑制效果均无显著差异,但不同贮液阶段的沼液对其抑菌效果影响显著.沼液的无菌滤液对草莓枯萎病菌菌丝的生长没有抑制作用;沼液及其无菌滤液对草莓枯萎病菌分生孢子的萌发均有不同程度的抑制作用,猪粪沼液及其无菌滤液对草莓枯萎病菌分生孢子萌发的抑制作用好于牛粪沼液.沼液对生产上常见的5种植物病原真菌的抑制效果有显著差别.沼液中的拈抗微生物是沼液抑菌防病的主要因子.
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‘金星无核’葡萄短节间突变体的遗传变异和内源激素水平分析
《西北植物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以秋水仙素处理‘金星无核’葡萄获得的短节间突变体植株‘3-2D-05’和‘金星无核’植株新抽枝梢嫩叶、梢尖和茎段为材料,利用高效液相色谱(HPLC)法测定了新抽枝梢不同部位内源GA3、IAA及ABA的含量及比值差异;采用细胞流式仪分析两种材料叶细胞染色体倍性,并通过RAPD和SSR两种标记对两种植株进行分子鉴定,以明确两者的遗传差异。结果显示:(1)与‘金星无核’相比,突变体‘3-2D-05’植株嫩叶、梢尖和茎段中的内源GA3、IAA和ABA含量均降低;‘3-2D-05’植株嫩叶、梢尖和茎段中的内源GA3、IAA和ABA含量总和分别为‘金星无核’的29.58%、20.04%和20.03%,GA3/IAA值分别为‘金星无核’的1.30倍、0.97倍和0.89倍。(2)两种材料叶片细胞的染色体倍性一致,DNA序列差异不大,其遗传背景表现出高度一致性。研究表明,秋水仙素处理‘金星无核’获得的染色体倍性未发生变化的葡萄短节间变异与调控内源激素的基因有关,秋水仙素诱发了基因突变,产生了节间变短的葡萄新种质。
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植物与螺组合浮床对富营养化水体的净化效果
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了探明美人蕉、凤眼莲和花叶芦竹3种浮床植物单独种植及其与铜锈环棱螺组合对富营养化水体的净化效果,在玻璃温室中进行静态耗竭试验。结果表明:与对照相比,试验36 d时,各处理对水体总氮(TN)、总磷(TP)、硝态氮(NH4+-N)、氨态氮(NO3--N)具有显著的去除效果,但不同处理之间存在差异,凤眼莲与铜锈环棱螺的组合对TN、NH4+-N、NO3--N的去除效果最好,将系统中TN平均浓度从8.34 mg/L降低至2.34 mg/L,去除率达71.94%,将NH4+-N平均浓度从4.56 mg/L降低至0.67 mg/L,去除率达85.31%,将NO3--N平均浓度从3.52mg/L降低至1.42 mg/L,去除率达59.66%;美人蕉与螺的组合和凤眼莲与螺的组合对TP的净化效果相似,均将系统中TP平均浓度从0.34 mg/L降低至0.05 mg/L,去除率达85.29%,且优于单独种植浮床植物的净化效果。说明凤眼莲和美人蕉均是降低富营养化水体中氮、磷的优选植物,水生动物铜锈环棱螺对浮床植物的净化效果起到促进作用,组合浮床系统中水体总氮浓度的减少量与植物、螺生物量的增加呈显著正相关,组合浮床对富营养化水体净化效果好于植物单独处理。
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嵌合鞭毛蛋白fliC/esat佐剂效应的研究
《细胞与分子免疫学杂志 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究嵌合形式表达的鞭毛蛋白对结核分枝杆菌(MTB)抗原ESAT-6的免疫佐剂效应。方法:用PCR方法扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因fliCi及MTB抗原ESAT-6编码序列,通过重叠PCR将ESAT-6编码序列插入fliCi的高变区域,构建嵌合鞭毛基因片段fliC/esa。t将fliC/esat片段分别插入原核表达载体pET,构建pET-fliC/esat质粒。将ESAT-6编码序列插入原核表达载体pBCX的多克隆位点,构建原核表达质粒pBCX-esat。以质粒pET-fliC/esat及pBCX-esat分别转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基1-1硫代-β呋喃半乳糖苷诱导融合的嵌合蛋白fliC/esat及ESAT-6蛋白的表达。以抗ESAT-6 mAb HYB 076-08为一抗,通过W estern b lot鉴定嵌合蛋白fliC/esat及ESAT-6蛋白。以两种蛋白分别在体外刺激骨髓树突状细胞(BMDCs),通过FACS分析共刺激分子CD40、CD80、CD86和CD54的表达,同时用ELISA检测前炎性因子IL-12p70表达的水平。此外,以两种蛋白分别免疫C57BL/6小鼠,运用ELISPOT法分析ESAT-6特异的IFNγ-及IL-4分泌细胞的产生。结果:嵌合蛋白及ESAT-6蛋白均可溶性表达,相对分子质量(Mr)约为64000和39000。Western blot的结果显示,fliC/esat嵌合蛋白及ESAT-6蛋白均具有良好的反应原性。与ESAT-6蛋白相比较,fliC/esat嵌合蛋白在体外能诱导BMDCs成熟。IL-12p70的检测结果显示,fliC/es-at嵌合蛋白诱导BMDCs分泌的IL-12p70明显高于ESAT-6蛋白诱导分泌的IL-12p70(P<0.01)。体内实验结果表明,嵌合鞭毛蛋白免疫组能够显著增强ESAT-6特异性免疫应答,且免疫应答趋于Th1型。结论:鞭毛嵌合表达ESAT-6抗原,能够有效地上调BMDCs共刺激分子表达,增强ESAT-6特异性细胞的免疫应答,以嵌合形式表达的鞭毛蛋白对ESAT-6抗原具有诱导Th1型免疫应答的佐剂效应。
关键词： ESAT-6 嵌合蛋白 鞭毛蛋白 佐剂 Th1型应答
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