科研产出
红地球葡萄健康叶片内生细菌多样性分析
《植物病理学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：本研究利用平板分离方法和变性凝胶梯度电泳(DGGE)技术,分析了北京、成都、合肥、武汉等4个地区的红地球葡萄在开花期、成熟期和衰老期健康叶片中内生细菌的群落结构。平板分离培养结果表明不同地区葡萄叶片中的内生细菌数量在8.0×10~3~2.8×10~4CFU·g~(-1)之间,其中武汉地区最高;不同生长时期葡萄叶片中的内生细菌数量在0.8×10~3~1.5×10~4CFU·g~(-1)之间,其中成熟期数量最大。扩增16S rRNA基因序列鉴定,分离获得的内生细菌属于芽胞杆菌属、泛菌属、短小杆菌属、假单胞菌属和葡萄球菌属,芽胞杆菌属为常见菌群。DGGE分析结果显示,同一地区和同一生长时期的样品间相似性较高;不同地区以成都地区的内生细菌种类最丰富;不同生长时期以成熟期种类最多。对特征条带回收测序,结果显示不可培养细菌和未确认的海洋浮游细菌在葡萄叶片中大量存在。
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响应面法优化鲟鱼精蛋白的提取工艺
《食品工业科技 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：以鲟鱼-甲骨板的精巢组织为原料,从中提取鱼精蛋白粗品,建立硫酸提取分离鱼精蛋白的最优工艺。以蛋白得率为指标,通过单因素实验研究硫酸浓度、液料比、提取温度、提取时间和提取次数的影响大小,初步确定鱼精蛋白的最佳分离条件。进一步利用响应面软件Box-Behnken设计模型确定鲟鱼精蛋白的最佳提取工艺条件,结果表明:硫酸浓度0.83 mol/L,液料比6.2∶1 m L/g,提取时间0.5 h,提取温度35℃,提取次数4次。经验证,最优工艺条件下鱼精蛋白的得率平均达到11.28%,且纯度高达86.13%,分子量约为10 ku,有良好的抑菌活性,金黄色葡萄球菌抑菌圈直径达15.75 mm。
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基于cDNA芯片的梨品种S基因型鉴定及新S-RNase基因进化分析
《植物遗传资源学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：梨品种S基因型鉴定对梨栽培中授粉品种选择和遗传育种都具有重要意义。本研究利用梨S-RNase基因荧光标记的特异引物PCR扩增获得梨品种荧光标记的cDNA特异产物;进一步完善梨S-RNase基因cDNA芯片,以被检测梨品种cDNA特异序列与梨S-RNase基因cDNA芯片杂交检测不同梨品种S基因型,并发现新的S-RNase基因。结果表明:利用梨S-RNase基因cDNA芯片鉴定了泸定王皮梨、兴山24号、弥渡百合等35个未知S基因型梨品种,确定了各品种的S基因型。结合PCRRFLP及DNA克隆和测序等技术,发现了7个新的S-RNase基因资源,获得了新S-RNase基因序列。序列分析表明各新S-RNase基因均具有S-RNase基因特异区域序列的典型特征;进化分析显示7个新S-RNase基因主要属于蔷薇科苹果亚科S-RNase类群,且存在种间和属间比种内和属内进化关系更近的现象。7个新的S基因分别命名为:PpS_(53)(Pyrus pyrifolia S53)、PpS_(54)、PpS_(55)、PpS_(56)、PpS_(57)、PpS_(58)和PpS_(59),GenBank登录号分别为:KX581753、KX581754、KX581755、KX581756、KX581757、KX581751和KX581752。
关键词： 梨 S-RNase基因 cDNA芯片 S基因型 进化分析
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氯化钠、蔗糖和碳酸钠对芡实淀粉糊化特性的影响
《食品科学 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：研究氯化钠、蔗糖和碳酸钠对芡实淀粉糊化特性的影响规律。采用差示扫描量热法等方法测定了不同质量分数氯化钠(1%、2%、3%、4%、5%)、蔗糖(4%、8%、12%、16%、20%)和碳酸钠(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%)对芡实淀粉的糊化温度、溶解度、膨胀度、冻融稳定性等糊化特性的影响。结果发现,氯化钠、蔗糖和碳酸钠均提高了芡实淀粉的糊化温度。原芡实淀粉透明度为1.3%,氯化钠的加入降低了透明度,而蔗糖和碳酸钠则提高其透明度。氯化钠、蔗糖和碳酸钠均增加了芡实淀粉糊的膨胀度和溶解度,并均降低其冻融稳定性。在凝沉性方面,三者表现不一,低含量的氯化钠(1%~3%)和碳酸钠(0.5%~1.5%)均有利于芡实淀粉糊的稳定;高含量的氯化钠(4%~5%)和碳酸钠(2.0%~2.5%)均促使淀粉糊凝沉增加,降低稳定性;而蔗糖则提高了芡实淀粉糊的凝沉稳定性。由此可见,在芡实淀粉糊化过程中,氯化钠、蔗糖和碳酸钠三者对其糊化特性的影响显著。
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我国水稻种子处理剂登记现状分析与展望
《农药 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通过网络查询和文献检索,对2017年5月以来我国水稻种子处理剂登记现状进行了分析。我国现已登记的水稻种子处理剂共225个产品,其中100个制剂,占总产品的44.4%。以杀菌剂、杀虫剂和植物生长调节剂为主要组分的种子处理剂分别占已登记总产品的66.7%、21.8%和8.9%,以浸种、拌种和种子包衣3种使用方法登记的产品分别占总产品的41.8%、30.2%和28.0%。水稻种子处理剂有效成分少,可湿性粉剂和乳油仍占有较大份额,多元杀菌剂、杀虫杀菌混剂和多功能种子处理剂的品种较少,缺乏生物农药种子处理剂。水稻种子处理剂的研发空间和市场的发展潜力较大。
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用Cre/LoxP和CRISPR基因工程技术构建猪肌肉生长抑制素双等位基因敲除细胞系
《中国生物化学与分子生物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：肌肉生长抑制素(myostatin,Mstn)基因失活可引起哺乳动物的肌肉增生,但其调控机制尚不清楚,且缺乏可靠的试验材料验证Mstn相关分子通路的变化。本研究所用PK3108细胞系是在野生型PK15细胞系的基础上成功靶向敲除一条等位基因,在其靶位点敲入标记基因,敲除了204bp的外显子3序列,LoxP锚定在其标记基因两侧。利用Cre/LoxP重组酶删除系统删除插入PK3108Mstn靶位点的标记,借助流式细胞仪和荧光蛋白甄别得到无标记的过渡型细胞系PK3108-2。将Cas9/sgRNA表达载体和供体DNA共转染PK3108-2,借助G418抗性筛选和倒置荧光显微镜挑选出仅带阳性标记的克隆L18,对其基因组进行PCR产物凝胶电泳与PCR产物测序,证明克隆L18在预设位点发生同源重组;对其蛋白质进行Western印迹实验表明,Mstn被成功地敲除失活。综上结果证明,本研究实现了双等位基因的精准敲除,构建了Mstn双敲除梯度回复表达细胞系。本研究为揭示Mstn的作用机制提供理想的实验材料,也为双等位基因的敲除提供了可借鉴的技术路线。
复合青贮剂对苎麻青贮品质的影响
《河南农业科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了高效利用苎麻资源,生产优质苎麻饲料,以苎麻为材料,配制复合青贮剂进行青贮试验,评价其发酵品质,研究复合青贮剂的青贮效果。设计添加复合青贮剂(处理)和不添加复合青贮剂(对照)2个处理,分别检测28 d、42 d和56 d的青贮品质。结果表明,对照组56 d时有很强的霉味,且茎叶腐烂发霉,评分为0,青贮失败;复合青贮剂组青贮品质较好,评分为16,青贮等级优良。与对照组相比,复合青贮剂组粗蛋白含量显著提高7.67%(P<0.05),中性洗涤纤维含量下降1.82%(P>0.05),酸性洗涤纤维含量下降1.53%(P>0.05)。综上,在苎麻中添加复合青贮剂可以提高青贮品质,改善其营养品质。
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猕猴桃NIP5-1基因的克隆及缺硼胁迫表达分析
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通道蛋白家族NIPs(NOD26-like intrinsic proteins)是植物中重要的硼吸收与转运蛋白。利用同源克隆技术获得"金魁"猕猴桃(Actinidia deliciosa‘jinkui’)硼转运通道基因:AdNIP5-1,该基因序列包括897 bp的开放阅读框,编码298个氨基酸。AdNIP5-1蛋白包含通道蛋白家族2个典型的保守结构域:NPS、NPV和Ar/R,构建基因家族进化树分析AdNIP5-1属于NIPⅡ亚家族,与葡萄和拟南芥中的NIP 5-1蛋白序列比对一致性分别为:89%和82%。利用实时荧光定量分析表明AdNIP5-1主要在猕猴桃根部表达,在茎和叶中的表达量相对较低;在缺硼胁迫条件下,AdNIP5-1表达量显著升高,在12 h时达到最高值,为对照的2.1倍。结果表明AdNIP5-1基因参与缺硼胁迫响应过程,该基因可能会影响猕猴桃对硼的吸收效率。
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施用牛粪和绿肥对土地整治区玉米产量和土壤理化性质的影响
《应用生态学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：采用定位试验,研究了施用新鲜牛粪(15000和75000 kg·hm~(-2))和绿肥(36000kg·hm~(-2))对玉米产量、土壤呼吸和土壤化学、物理性状的影响.结果表明:与单施化肥相比,土地整治区施用牛粪的玉米籽粒增产7.2%~29.9%,千粒重增加2.5%~18.2%,活性有机碳和有机质含量分别增加5.3%~34.6%和8.0%~17.6%.施用绿肥的玉米籽粒增产10.8%~15.6%,千粒重增加4.5%~8.4%,活性有机碳含量增加14.1%~48.6%,在第二年土壤有机质含量增加了7.2%.施用牛粪和绿肥的土壤呼吸速率增加了20.0%~69.3%.施用牛粪和绿肥增加了土壤容重,减少了总孔隙度和毛管孔隙度,分别增加了<0.01 mm和0.05~1 mm粒径团聚体的比例.连续2年在土地整治区施用牛粪和绿肥不仅能够增加玉米籽粒产量,而且已经对土壤物理化学性质的改善表现出积极的作用.
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