猪PD-1分子及其配体的实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 彭金美

作者： 彭金美;李登云;田志军;安同庆;刘恒贵

作者机构：

关键词： 实时荧光定量聚合酶链反应;PD-1基因;PD-L1基因;PD-L2基因

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2010 年 04 期

页码： 410-414

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪程序性死亡因子PD-1及其配体PD-L1和PD-L2的基因序列,分别设计了特异性引物和TaqMan探针,以10倍系列稀释的重组质粒pMD-PD-1、pMD-PD-L1和pMD-PD-L2为标准品,对实时荧光定量PCR的条件进行优化,以建立定量检测这3个基因的方法。结果表明,建立的方法在1×102~1×108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系(r2>0.99),扩增效率均高于96%,可检测至少100 copies的阳性标准品。利用该方法对猪外周血单核细胞中这3个基因的表达情况进行了检测,结果也表明该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可应用于临床样品的检测。

分类号： S858.28

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