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南极磷虾抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 王怡菊 1 ; 房文红 1 ; 马丽艳 1 ; 李学英 1 ; 黄洪亮 1 ; 王春芳 2 ; 黄艳青 1 ; 白义化 3 ; 邢晓明 3 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院东海水产研究所

2.华中农业大学水产学院

3.威海市宇王集团海洋生物工程有限公司

关键词: 南极磷虾;抗氧化肽;分离纯化;液相色谱-质谱联用

期刊名称: 海洋渔业

ISSN: 1004-2490

年卷期: 2024 年 46 卷 005 期

页码: 646-656

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为获得纯度高、抗氧化效果好的南极磷虾抗氧化肽,首先选用碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶对脱脂南极磷虾粉进行酶解,然后采用纳滤、超滤、Sephadex G-15凝胶层析色谱法对酶解液进行分离纯化,并测定纯化组分的抗氧化活性,再进一步用液相色谱-质谱联用法对分离出的组分进行结构测定,最后通过在线功能预测软件分析南极磷虾抗氧化肽的结构与活性。结果表明:1)以脱脂南极磷虾粉为原料制备的抗氧化肽有较好的二苯基苦酰肼基(diphenyl picryl hydrazinyl, DPPH)清除率、超氧阴离子清除率、羟自由基清除率以及铁螯合力;2)经过初步超滤分离后,分子量<5 Ku的组分具有较强的体外抗氧化效果,当蛋白浓度为10 mg·mL-1时,其DPPH清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子清除率、铁螯合力分别为84.74%、91.36%、61.92%和57.95%;3)对分子量<5 Ku的组分进行Sephadex G-15凝胶柱纯化,获得3个组分:F1、F2和F3。对F1、F2和F3 3个纯化组分进行体外抗氧化活性检测,发现F3在其蛋白浓度为2.5 mg·mL-1时,羟自由基清除率相比于同等蛋白浓度的酶解液提升了43.60%(P <0.05);4)通过色谱鉴定以及在线软件分析预测,最终筛选出了6条抗氧化活性高、无毒且理化性质良好的肽段(LPGAIP、GPIALPE、APGELPY、RDWPEGR、GIPPAP、VDLPGW),可供今后进一步人工合成并进行生物学活性功能验证。研究结果可为南极磷虾抗氧化肽及抗氧化保健食品的开发提供一定的参考。

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