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猪蓝耳病病毒分离纯化及Nsp2序列分析

文献类型: 中文期刊

作者: 张军杰 1 ; 龙桃 2 ; 孙瑞芹 2 ; 李艳 2 ; 夏平安 1 ; 宋长绪 1 ;

作者机构: 1.河南农业大学牧医工程学院

2.广东省农科院动物卫生研究所

关键词: PRRSV;分离鉴定;蚀斑;Nsp2;进化分析

期刊名称: 广东农业科学

ISSN: 1004-874X

年卷期: 2013 年 40 卷 02 期

页码: 135-138+237

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 对广东省几个地区发生疑似PRRSV感染的猪场送检的502份血清进行RT-PCR检测。将检测到的阳性血清接种到Marc-145细胞上并连续传代4~5次,收获出现明显细胞病变(CPE)的样品,利用蚀斑试验克隆纯化PRRSV。根据高致病性PRRSV Nsp2基因缺失区的两端保守区设计了1对引物区分经典PRRSV和高致病性PRRSV。研究结果表明,成功分离到12株PRRSV并纯化出2株病毒。从502份血清样品中检测到156份阳性血清,PRRSV感染阳性率达32%,经鉴定均为高致病性PRRSV变异株。对分离毒株的Nsp2基因序列进一步分析,发现此次分离株Nsp2基因与VR-2332株(70.7%~74.6%)的核苷酸同源性较JXA1株(87.1%~100%)偏低;在系统进化树上分离株与JXA1变异株亲缘关系比较近,而与VR-2332株亲缘关系比较远。说明广东省地区普遍存在PRRSV的感染,并且病毒出现了不同程度的变异。

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