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香蕉ACC氧化酶反义基因植物表达载体的构建及其转化烟草的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 黄永红 1 ; 梅眉 2 ; 曾继吾 1 ; 周碧容 1 ; 吴元立 1 ; 易干军 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院果树研究所

2.山东省胶州市农业局

关键词： 香蕉;ACO;植物表达载体;遗传转化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2007 年 5 卷 05 期

页码： 16-20

收录情况： CSCD

摘要： 用限制性内切酶XbaⅠ和SacⅠ从克隆载体pUCm-ACO上切下约1.2kb的香蕉ACO基因,将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pBI-121上,构建成植物表达载体pBI-aACO。在此基础上用EcoRⅠ和HindⅢ从在pBI-aACO上切下大小约2.3kb的目的基因35Sp-aACO-NOSt,将其连接在质粒载体pCAMBI-A2301载体上,构建成香蕉ACO反义基因植物表达载体pCB-aACO。采用直接转化法将pCB-aACO导入根癌农杆菌菌株EHA105,采用该菌株转化普通烟草。在Kanamycin选择压力下获得的烟草转化不定芽和完整植株,经过GUS组织化学法检测、以及PCR和RT-PCR方法鉴定,验证了该植物表达载体的报告基因,选择基因和目的基因都得到了表达,证明该植物表达载体构建成功。此项研究为下一阶段用该反义基因转化香蕉品种以改良香蕉果实耐贮运性打下基础。

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